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DNS法测还原糖方法一原理DNS即二硝基水杨酸法是利用碱性条件下，二硝基水杨酸（DNS）与还原糖发生氧化还原反应，生成3-氨基-5-硝基水杨酸，该产物在煮沸条件下显棕红色，540nm处有吸收，且在一定浓度范围内颜色深浅与还原糖含量成比例关系的原理，用比色法测定还原糖含量的。二试剂及方法2.1试剂1.1mg/ml的葡萄糖溶液2.3,5－二硝基水杨酸用400mL蒸馏水溶解6.3g3，5—二硝基水杨酸，逐步加入21g氢氧化钠，再加入182g四水合酒石酸钾钠、5.0g苯酚、5.0g无水亚硫酸钠，温水浴(不超过48℃)，不断搅拌，直至溶液清澈透明。用蒸馏水定容至1000mL，保存在棕色瓶中，与二氧化碳隔绝，静置5～7天后使用，贮存期为6个月。2.2葡萄糖标曲的绘制表1葡萄糖标曲的绘制方法试剂试管012345葡萄糖标准液(ml)00.10.20.30.40.5蒸馏水(ml)0.50.40.30.20.103,5-二硝基水杨酸(ml)0.50.50.50.50.50.5糖含量（mg）00.10.20.30.40.5混合均匀，沸水浴5min，冷却后加入4mL蒸馏水，混匀，在540nm下测OD值2.3发酵液样品测定将发酵液稀释一定倍数后，取3只比色管标号1,2,3，加入稀释和的发酵液0.5ml，加入DNS试剂0.5ml混匀，沸水浴5min，冷却后加入4ml蒸馏水混匀，测OD540表2样品的测定方法管号012还原糖待测样品（mL）0.00.50.5蒸馏水（mL）0.50.00.0DNS试剂（mL）0.50.50.5蒸馏水（mL）444A540nm计算所得还原糖含量（mg）三结果计算3.1标曲3.2样品的还原糖含量稀释倍数）加人样品的体积（）计算得到的还原糖量（）还原糖含量（ml5.0mg/gL