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1生药学实验讲义漯河医学高等专科学校2目录实验室守则3实验一生药中常见的化学成分的理化鉴定（一）4实验二生药中常见的化学成分的理化鉴定(二)5实验三根类生药6实验四根茎类生药7实验五皮类生药8实验六茎木类生药9实验七植物细胞基本结构10实验八植物的组织11实验九根的组织构造12实验十双子叶植物茎的初生构造和次生构造单子叶植物、裸子植物茎的构造13实验十一叶的构造14实验十二花的组织构造15实验十三果实的内部组织构造16实验十四种子的内部组织构造17实验十五菌类、裸子植物的性状显微鉴定18实验十六双子叶植物根及根茎类生药的显微及显微理化鉴定19实验十七单子叶植物根及根茎类生药的显微及显微理化鉴定20实验十八皮类生药的显微及显微理化鉴定21实验十九花类生药的显微及显微理化鉴定22实验二十果实种子类生药的显微及显微理化鉴定23实验二十一全草及其他类类生药的显微及显微理化鉴定24实验二十二动物类和矿物类生药的性状鉴别25实验二十三户外见习26实验二十四附院药房见习27附录一常用试剂配置法28附录二层离法常用显色剂29附录三显微镜测量法30附录五显微镜的构造与使用31附录六生物绘图323实验室守则一、实验注意事项：1．根据教学进程，温习与本次实验有关的课堂讲授内容。2．仔细阅读本次实验的内容，要求弄懂实验的原理与方法。3．准备好各种自备的实验用品，如铅笔、橡皮、直尺、报告纸等。二、实验过程中的几点要求：1．遵守实验室规则，保持实验室安静。2．实验认真，观察仔细，观察应当与思考结合起来，应当手、眼、脑三者并用。3．由于实验时间有限，实验时应当善于安排自己的工作，注意力应当集中在主要问题上，不要用过多时间去钻研细小的次要问题，一时解决不了的次要问题，可留课外时间去解决o4．在实验过程中，应当随时注意观察到的现象，测量或称量的数据，计算结果等写在报告纸上，养成能随时作出准确、清淅、整齐的记录而不需要重抄的良好习惯。5．实验进行过程中，必须注意听取教师的指导。6．实验桌前应随时保持整洁，非实验必要物品一律不许放在桌面或桌架上。7．纸屑、废物应放人污物缸内，不得乱丢地上，污物缸内不得倒入液体。4三、实验完毕时的几点要求:1．按照教师指定时间完成实验报告。2．把实验用仪器、用品等收拾干净，放在指定位置。发放给个人保管的可放抽屉或柜内。3．临时借用物品应及时归还。4．值日生负责最后清扫实验室卫生，并及时清除污物缸内的废弃物。5．实验结束后，检查门、窗、水、电，保证无安全隐患后方可离开实验室。实验一生药中常见化学成分的理化鉴定（一）一、实验目的要求：1．了解化学检出法在药材鉴定中的应用。2．熟悉药材鉴定中常用的理化鉴定方法。3．掌握生物碱，羟基蒽醌的理化性质和定性检识反应。二、实验主要材料、仪器及试剂：马钱子、黄柏(苦参)黄连、大黄、秦皮、黄连乙醇液。水浴锅、荧光灯、蒸发皿、锥形瓶、试管、微量升华装置。碘化铋钾试液、碘化汞钾试液、碘一碘化钾试液、浓硝酸、浓硫酸、5％NaOH、HCl、乙醚、氨水。三、实验内容：1．显微化学反应法：(1)将药材的切片或粉未置载玻片上，滴加适当试液，加盖玻片在显微镜下观察产生的颜色或结晶等，作为鉴别特征。’①取干燥马钱子的胚乳部分作徒手切片，加l％硫矾酸试剂l滴，镜检，观察结果。②另取一切片，加浓硝酸l滴，镜检，观察结果。（2）取药材粗粉加适当试剂浸出，将浸出液滴于载玻片上，滴加适当试剂，加盖玻片，镜检观察反应结果。取黄连乙醇液1滴，加浓HN031滴，镜检，观察结果。(3)取药材的切片或粉末滴加适当试剂，直接观察皇现的种种颜色作为鉴别特征。取大黄饮片，加5％NaOHl~2滴，出现什么颜色?再加稀HCl1~2滴，又出现什么颜色?2．微量升华法：是利用药材中所含的某些成分，在一定温度下能升华的性质，获得升华物，在显微镜下观察其形状，颜色及化学反应，作为鉴别特征。具体方法：取金属片，安放在有圆孔(直径约2cm)的石棉板上，金属片上放一小金属圈(高度约0.8cm)，5对准石棉板上的圆孔，圈内加药材粉末一薄层，圈上放一载玻片，在石棉板下圆孔处用酒精灯徐徐加热(火焰距板约4cm)数分钟，至粉末开始变焦，并有气化物发生，去火待冷，则有结晶状升华物附着于覆盖的载片上，将载玻片取下反转，在显微镜下观察结晶形状，并可加化学试液，观察其变化。取大黄粉未，进行如上操作，观察反应结果。3．荧光分析法：将药材切片或粉末或提取液等，在荧光灯下观察荧光，有些药材不产生荧光，如以酸碱处理或其他化学方法处理后，可使其中某些成分在荧光灯下产生荧光，以便鉴别。如取黄连饮片、浙贝母粉末或秦皮水浸液，在紫外灯下观察荧光颜色。．‘4．层析法：‘分为纸层析、柱层析、薄层层析等(略)。’5．化学定性检查：药材中的化学成分可利用其能与某些试剂产生特殊的颜色、沉淀反应来进行鉴别。(1)生物碱的检出：沉淀反应取黄连，马钱子，黄柏(苦参)粉未各2g，分别盛入锥形瓶中，各加水l5ml，浓HClO．5ml，60℃水浴上温浸30分钟，时时振摇，取滤液备用。各取2ml滤液于试管中，分别加下列试液2—3滴，观察有何现象？碘化铋钾试液碘化汞钾试液碘一碘化钾试液黄连马钱子黄柏(苦参)(2)羟基功醌的检出：Bomtrǎger反应取大黄粉未0.2g，置试管中加入5％NaOH试液4ml，在小火上煮沸，取滤液加HCl呈酸性后，再加乙醚5ml，振摇，分取醚层，于醚层中加入等量氨试液，振摇，观察反应现象。四、作业：简要记录各反应的实验步骤和结果。五、思考题：1．显微化学反应法有几种操作方法?2．微量升华法用于生药鉴别有何特点?3．含何类成分的生药常会产生荧光?4．生物碱常甩的沉淀试剂有哪些?Bornträger反应过程的原理是什么?实验二生药中常见化学成分的理化鉴定(二)一、实验目的要求：．掌握香豆精类，强心苷类、皂苷类、鞣质类、氰苷类、黄酮类的理化性质和定性检识反应。二、实验主要材料、仪器及试剂：秦皮、桔梗、穿山龙、五倍子、儿茶、苦杏仁、洋地黄叶、黄芩(槐米水浴锅蒸发皿锥形瓶盐酸羟胺甲醇液、l0％氢氧化钾甲醇液、乙醚、氯仿、盐酸、l％三氯化铁乙醇液、2％红血球悬浮液、1％盐酸奎宁试液、明胶液、铁铵矾试液、三氯化铁试液、冰醋酸、浓硫酸、镁粉。三、实验内容：1．化学定性检查(1)香豆精类的检出：异羟肟酸铁反应取秦皮粗粉0.2g，置具塞试管中，加乙醚3ml，浸渍5~10分钟，时加振摇，放置，吸取上清液(或滤过)于试管中加新配制的盐酸羟胺甲醇溶液2~3滴，l0％氢氧化钾甲醇溶液2~3滴，水浴温热1~2分钟，冷后加l0％盐酸，使pH为3~4，再加l％三氯化铁乙醇溶液1~2滴，两液混合面或溶液应显什么颜色?6（2)强心苷的检出：三氯化铁一冰醋酸反应取洋地黄叶粉末0.5g，加水5ml，水浴加热20分钟，滤液加3mlCHCl3，振摇萃取后，再加乙醚3ml，待分层，用吸管吸取取下层，将CHCl3层转于蒸发皿中蒸干，放冷，加冰醋酸lml使残渣溶解，移人试管中，加三氯化铁溶液1滴，并沿管壁缓缓注入浓H2S04l5~20滴，观察上层液及界面的颜色变化。(3)皂苷的检出：①泡沫反应取桔梗粉末0.2g，加水5ml，加热煮沸，过滤，滤液在试管中强烈振摇，注意是否产生大量持久性泡沫。②溶血试验取穿山龙的l％生理盐水溶液lml和l％生理盐水lml，分别置试管中，各加2％红血球悬浮液0.3ml，摇匀后放置，注意观察哪支试管溶液变清而透明。(示溶血现象)（4)鞣质的检出：显色及沉淀反应取五倍子，儿茶粉末各0.5g，分别置于锥形瓶中，加25ml水，水浴加热，过滤备用。各取滤液2ml，分别加下列试剂，观察反应现象。1％盐酸奎宁试液明胶液铁铵矾试液、五倍子儿茶(5)氰苷类的检出：苦味酸钠反应取苦杏仁一粒捣碎，用水湿润置试管中，试管中悬挂用NaHC03饱和溶液湿润的苦味酸试纸一条，用软木塞塞紧，置40—50○C水浴中，观察试纸颜色变化。(6)黄酮苷的检出：盐酸镁粉反应取黄芩(槐米)粉末约0.2g，加乙醇5ml，水浴温热约5分钟，滤过，取滤液2ml，加镁粉少量，混匀，滴加盐酸数滴，注意有气泡产生，同时观察呈现什么颜色。四、作业：简要记录各反应的实验步骤和结果。五、思考题：1、香豆精苷，强心苷，氰苷，黄酮苷及鞣质的反应机理是什么？2、黄酮类成分遇盐酸一镁粉是否都显红色?如不显红色是否可以否定黄酮成分的存在?实验三根类生药黄芪RabixAstragali、甘草RadixClycyrrbizae一、实验目的：l、掌握黄芪、甘草生药性状。2、掌握黄芪、甘草粉末显微特征。二、实验主要仪器及试剂：显微镜、临时装片用具、蒸馏水、水合氯醛溶液、白瓷板、蒸发皿、蒸馏水、80％硫酸。三、实验材料：．蒙古黄芪AstragalismembranaceusBgc．Var．mongholieus(Bgc．)Hsiao粉末、甘草clycyrrbizauralensisFisch.粉末。四、实验内容及步骤：1、镜检黄芪粉末，分别以蒸馏水和水合氯醛试液装片，注意以下特征：①纤维众多，成束，细长，直径9~36μｍ，壁厚，非木化，孔沟不明显。另取黄芪生药，刮取少量纤维(粉末)，透化后装片，注意纤维的先端常纵裂成扫帚状。②导管主为具缘纹孔导管，纹孔呈椭圆形，类方类或斜方形。7③木栓细胞表面观呈多角形或类方形。④淀粉粒单粒类圆形、椭圆形或类肾形，直径3~13μｍ，复粒由2~4分粒组成。2、镜检甘草粉末分别以蒸馏水和水合氯醛试液装片，注意以下特征：①纤维众多，成束或散离，细长，直径6~14μｍ，壁厚，木化或非木化，孔沟不明显；晶鞘纤维易察见，草酸钙方晶类双锥形，长方形或类方形，含晶细胞的壁增厚，微木化或非木化。②导管主为具缘纹孔导管，多破碎，纹孔椭圆形或略呈斜方形，对列或互列，有的导管旁可见小型具缘纹孔管胞。．③木栓细胞棕红色，壁薄，微木化，表面观呈多角形。④淀粉粒众多，单粒椭圆形、卵形或类球形，直径3~16μｍ，脐点点状或短缝状。复粒稀少，由2分粒组成。此外，尚有少数黄棕色或红棕色的色素块。五、作业：1、绘黄芪粉末特征图，示纤维，导管，木栓细胞与淀粉粒。2、绘甘草粉末显微特征图，示晶纤维，具缘纹孔导管，木栓细胞和淀粉粒。六、思考题：l、甘草的组织构造中，有哪些较显著的鉴别特征?2、什么是晶鞘纤维?3、如何能方便而有效地鉴别甘草和黄芪粉末?实验四根茎类生药黄连、大黄一、实验目的：l、掌握黄连、大黄的生药性状特征。2、掌握黄连大黄的粉末显微待征。3、了解其它根及根茎类中药的性状特征二、实验主要仪器及试剂：显微镜、临时装片用具、蒸馏水、水合氯醛试液。三、实验材料：黄连CoptischinensisFranch．原植物标本、生药(味连)组织切片及粉末。四、实验内容及步骤：1、取黄连粉末分别以蒸馏水及水合氯醛试液装片，镜检下列特征：①石细胞鲜黄色、类圆形、类方形或类多角形，有时稍延长，长径25~75μm，孔沟及纹孔明显。②韧皮纤维鲜黄色，纺锤形或长梭形，直径：20~40μm，壁较厚，纹孔少。③木纤维众多，常成束，鲜黄色，直径l5~35μm，壁具裂隙状纹孔。④导管多为孔纹导管，也有具缘纹孔，网纹及螺纹导管。⑤鳞叶表皮细胞类方形或长方形，壁薄曩垂厨壁微波状。⑥淀粉粒单粒长圆形、肾形或类球形，直径l~l0μｍ，复粒少，由2~4分粒组成。2、取大黄粉末分别以蒸馏水及水合氯醛试液装片，镜检下列特征：①草酸钙簇晶大而多，棱角大多短钝。，。②导管主为网纹导管，并有具缘纹孔及细小螺纹导管，直径约至140μm，非木化。③淀粉粒单粒呈圆球形或长圆形，脐点大多呈星状，复粒由2~7个分粒组成。3、观察所示标本的性状特征。五、作业：l、绘黄连粉末显微特征图，示石细胞、韧皮纤维、木纤维、导管、鳞叶表皮细胞及淀粉粒。2、绘大黄粉末显微特征图，示草酸钙簇晶、导管、淀粉粒。六、思考题：l、如何从性状与组织上鉴别“味连”、“雅连”和“云连”?8实验五皮类生药肉桂、黄柏一、实验目的：1、掌握肉桂、黄柏的生药性状与组织鉴别特征。2、掌握皮类生药的鉴别特征。二、实验主要仪器及试剂：显微镜、临时装片用具、蒸馏水、水合氯醛试液、稀