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..使用高倍显微镜观察几种细胞教师邢华一、实验目的：1、学会如何使用显微镜观察细胞；2、了解细胞的结构；3、学会制作临时装片。二、实验材料及用具：（实验材料可换）松针、动物血液、动物神经细胞永久装片、载玻片、盖玻片、蒸馏水、滴管、镊子、土豆、刀片、显微镜（物镜5X、10X、40X）三、方法步骤：1、制作松针的临时切片：（1）取干净的载玻片一个平置于试验台上，用滴管在载玻片中央滴一滴蒸馏水。（2）将土豆切成条状（截面约：0.5X0.5cm)取两条，将一根松针夹在两个土豆条之间，用刀片削成尽量薄的薄片，削时，手腕不动，靠大臂带动小臂移动刀片。切片数次。从中选取较薄的切片，置于载玻片的水滴上。（3）从一侧轻轻盖上盖玻片，不要产生气泡。用吸水纸轻轻吸去盖玻片周围的水滴，即完成临时切片的制作。2、观察切片：（1）取出显微镜，置于试验台上靠左的位置，打开光源。（2)将上步制作好的切片置于显微镜的载物台上，调整载物台位置，使盖玻片对准光源。（3）使用5X物镜观察切片，使松针切片在视野中心，换成10X物镜，观察松针叶面横切结构。（4）换成40X物镜观察，注意细胞及细胞内物质结构，画图。3、动物血液临时装片的制作及观察（除了不用切片，其他类似）4、动物神经细胞永久装片的观察。四．实验现象：可在显微镜下看到清晰的细胞，低倍镜下视野中细胞数目多，细胞小，视野明亮，高倍镜下细胞数目少，细胞较大，视野较暗。..生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定教师邢华一、实验原理（1）鉴定实验设计的理念：某些化学试剂+生物组织中有关有机化合产生特定的颜色反应。（2）具体原理：①可溶性还原糖+斐林试剂→砖红色沉淀。②脂肪小颗粒+苏丹Ⅲ染液→橘黄色小颗粒。③蛋白质+双缩脲试剂→紫色反应。二、实验目的：初步掌握鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。三、实验材料1.可溶性还原糖的鉴定实验:选择含糖量较高、颜色为白色或近白色的植物组织，以苹果、梨为最好。2.脂肪的鉴定实验:选择富含脂肪的种子，以花生种子为最好(实验前浸泡3h～4h)。3.蛋白质的鉴定实验:可用浸泡1d～2d的黄豆种子(或用豆浆、或用鸡蛋蛋白)。四、仪器、试剂1.仪器:剪刀,解剖刀,双面刀片,试管,试管架,试管夹,大小烧杯,小量筒,滴管,玻璃漏斗,水浴锅,研钵,石英砂,纱布,载玻片,盖玻片,毛笔,吸水纸,显微镜。2.试剂:①斐林试剂(0.1g/L的NaOH溶液+0.05g/mL的CuSO4溶液)；②苏丹Ⅲ染液；③双缩脲试剂；④体积分数为50%的酒精溶液；⑤蒸馏水。五、方法步骤（一）、还原糖的鉴定1、还原糖的鉴定步骤:选材：苹果：洗净、去皮、切块，取5g放如研钵中制备组织样液研磨成浆：加石英砂，加5ml水研磨注入组织样液2ml过滤：将玻璃漏斗插入试管中，漏斗上垫一层纱布加斐林试剂：2ml（由斐林试剂甲液和乙液充分混合而成，不能分别加入）水浴加热：煮沸2min观察溶液颜色变化2、实验成功的要点：①还原糖的鉴定实验:选择含糖量较高、颜色为白色或近白色的植物组织，以苹果、梨为最好。②斐林试剂要两液混合均匀且现配现用。斐林试剂的配制过程示意：斐林试剂甲液（0.1g/ml的NaOH溶液）斐林试剂乙液（0.05g/ml的CuSO4溶液）③在鉴定尿液中是否含有葡萄糖时还能用其他那些鉴定方法？按一定比例混合均匀斐林试剂..学生回答：还可以用斑氏试剂产生砖红色沉淀；及糖尿试纸据糖的由少到多产生浅蓝、浅绿、棕或深棕色。（二）、脂肪的鉴定1、脂肪的鉴定步骤:取材：花生种子（浸泡3-4h）,将子叶削成薄片取理想薄片在薄片上滴2-3滴苏丹Ⅲ染液去浮色制成临时装片观察：先在低倍镜下，找到材料的脂肪滴，然后，转为高倍镜观察。结论：细胞中的圆形脂肪小颗粒已经被染成橘黄色。2、实验成功的要点：①.脂肪的鉴定实验:选择富含脂肪的种子，以花生种子为最好(实验前浸泡3h～4h)。②该试验成功的关键是获得只含有单层细胞理想薄片。③滴苏丹Ⅲ染液染液染色2-3min，时间不宜过长，以防细胞的其他部分被染色。（三）、蛋白质的鉴定1、蛋白质的鉴定步骤：结论：蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应。2、实验成功的要点：①蛋白质的鉴定实验:可用浸泡1d～2d的黄豆种子(或用豆浆、或用鸡蛋蛋白稀释液)。②双缩脲试剂的使用，一定要先加入A液(即0.1g/ml的NaOH溶液)，再加入双缩脲试剂B液(即0.01g/ml的CuSO4溶液)。③还可设计一只加底物的试管，不加双缩脲试剂，进行空白对照，说明颜色反应的引起是蛋白质的存在与双缩脲试剂发生反应，而不是空气的氧化引起。六、实验现象：1、还原糖的鉴定：浅蓝色→棕色→砖红色。2、脂肪的鉴定：细胞中的圆形脂肪小颗粒已经被染成橘黄色。3、蛋白质的鉴定步骤：紫色反应4、淀粉的鉴定：呈现蓝色。制片..观察DNA和RNA在细胞中的分布教师邢华一、实验原理(1)真核细胞的DNA主要分布在细胞核内，RNA主要分布在细胞质中。(2)甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同，甲基绿对DNA亲和力强，使DNA显现出绿色，而吡罗红对RNA的亲和力强，使RNA呈现出红色。用甲基绿、吡罗红的混合染色剂将细胞染色，可同时显示DNA和RNA在细胞中的分布。(3)盐酸的作用①盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂的跨膜运输；②盐酸使染色体中的DNA与蛋白质分离，便于DNA与染色剂的结合。二、实验目的：证明DNA主要分布在细胞核中，RNA主要分布在细胞质中三、实验器材1．材料人的口腔上皮细胞，洋葱表皮细胞，根尖细胞，蛙或蟾蜍的血细胞，果肉细胞。2．用具400mL烧杯，250mL烧杯，温度计，滴管，消毒牙签，载玻片，盖玻片，铁架台，石棉网，火柴，酒精灯，吸水纸，显微镜。3．试剂及配制方法（1）试剂质量分数为0．9%的NaCl溶液，质量分数为8%的盐酸，乙酸钠，乙酸，蒸馏水，吡罗红甲基绿混装粉。如果化学试剂商店没有吡罗红甲基绿混装粉，可以分别购买甲基绿和吡罗红G，然后按A液的第二种方法配制（见下文）。（2）染色剂的配制①染色剂A液的两种配制方法第一种方法：取吡罗红甲基绿粉1g，加入到100mL蒸馏水中溶解，然后用滤纸过滤，将滤液放入棕色瓶中备用。第二种方法：取甲基绿2g溶于98mL蒸馏水中，取吡罗红G5g溶于95mL蒸馏水中。取6mL甲基绿溶液和2mL吡罗红溶液加入到16mL蒸馏水中，即为A液，放入棕色瓶中备..用。②染色剂B液的配制方法B液是一种缓冲液，由乙酸钠和乙酸混合而成。先取乙酸钠16．4g，用蒸馏水溶解至1000mL备用；再取乙酸12mL，用蒸馏水稀释至1000mL备用。取配好的乙酸钠溶液30mL和稀释的乙酸20mL，加蒸馏水50mL，配成pH为4．8的B液（缓冲液）。四、主要步骤(以观察口腔上皮细胞为例)1.取材①滴：在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液；②刮：用消毒牙签在口腔内侧壁上轻轻地刮几下；③涂：将牙签上的碎屑涂抹在载玻片的生理盐水中；④烘：将涂有口腔上皮细胞的载玻片在酒精灯的火焰上烘干。2.水解①解：将烘干的载玻片放入装有30ml质量分数为8%的盐酸的小烧杯中，进行材料的水解；②保：将小烧杯放入装有30℃温水的大烧杯中保温5分钟。3.冲洗涂片①冲：用缓缓的蒸馏水冲洗载玻片10秒钟；②吸：用吸水纸吸去载玻片上的水分。4.染色①染：用2滴吡罗红甲基绿混合染色剂滴在载玻片上，染色5分钟；②吸：吸去多余染色剂；③盖：盖上盖玻片。5.观察①低：在低倍物镜下，寻找染色均匀，色泽浅的区域，移至视野中央，将物像调节清晰；②高：转到高倍物镜，调节细准焦螺旋，观察细胞核和细胞质的染色情况。六、实验现象可在高倍镜下看到被染成红色的细胞质和染成绿色的细胞核。..体验制备细胞膜的方法教师邢华一、实验原理：细胞膜的流动性和半透性二、实验材料：猪（或牛、羊、人）的新鲜的红细胞稀释液（血液加适量的生理盐水）三、实验用具：蒸馏水、试管、吸水纸、载玻片、盖玻片、显微镜四、方法步骤：1、用试管吸取少量红细胞稀释液，滴一小滴在载玻片上，盖上盖玻片，制成临时装片2、在高倍镜下观察，待观察清晰时，在盖玻片的一侧滴一滴蒸馏水，同时在另一侧用吸水纸小心吸引，注意不要把细胞吸跑。上述操作均在载物台上进行，并持续观察细胞的变化。可以看到近水的部分红细胞发生变化；凹陷消失，细胞体积增大，很快细胞破裂，内容物流出。四、实验现象：细胞体积增大，很快细胞破裂，内容物流出。..用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体教师邢华一、实验目的：高倍镜的使用步骤，及线粒体和叶绿体的形态与分布特点。二、实验器材：新鲜的藓类叶片（或菠菜叶、黑藻叶等），新配制的质量分数为1%的健那绿染液（将0.5g健那绿溶解于50ml生理盐水中，加温到30—40。C，使其充分溶解）显微镜，载玻片，盖玻片，滴管，镊子，消毒牙签。三．实验步骤取材制片观察（先低倍镜、后高倍镜）体验（描述、评价）四．实验现象：1、可在高倍镜下看到许多绿色的椭球形的叶绿体，随细胞质在进行缓慢的流动。2、可看到活细胞中看到被染成蓝绿色的线粒体，细胞质几乎无色。高倍镜使用中的注意事项：一般地讲，在低倍镜下调节清晰后，可直接转动转换器，使高倍镜对准通光孔。但若高倍镜不是原配的，则应先稍微转动粗准焦螺旋，使镜头上升后再换高倍镜，然后下降镜筒进必须从一侧注视物镜下降到一定距离。换高倍镜后因镜头与装片间的距离很小，切记不可再转动粗准焦螺旋，以防损坏镜头与或装片。应该一面从目镜里观察，一面逆时针方向转动细准焦螺旋，直至清晰为止。在高倍镜下若要换装片，必须升高镜筒后才能进行。..植物细胞的吸水和失水教师邢华一、实验目的：证明成熟的植物细胞可以通过渗透作用吸水和失水。二、实验原理：水分子可以透过半透膜从低浓度溶液一侧向高浓度溶液一侧扩散。三、实验器材：紫色洋葱鳞片叶的外表皮、白色洋葱鳞片叶的外表皮、洋葱根尖、菠菜叶、水绵、干燥的红枫叶；0.1g/mL的蔗糖溶液、0.3g/ml的蔗糖溶液、0.5g/ml的蔗糖溶液；清水；0.9%NaCL溶液;酒精、显微镜。1、应选择哪些材料进行实验呢？启发学生依据给出的实验材料讨论如下问题：（1）材料选活细胞还是死细胞？（2）材料选洋葱鳞片叶的外表皮还是洋葱根尖？（3）材料选紫色洋葱鳞片叶的外表皮还是白色洋葱鳞片叶的外表皮？创设比较：如部分同学做活细胞、部分做死的表皮；部分同学做根尖分生区细胞、部分做洋葱鳞片叶的外表皮；部分同学做紫色洋葱鳞片叶的外表皮，部分同学做白色洋葱鳞片叶的外表皮。在比较中得出本实验材料选择的要求是:（1）材料必须是完整的活细胞。（2）材料必须是成熟植物细胞，成熟植物细胞中才有较大的液泡。（3）材料选紫色洋葱鳞片叶的外表皮，细胞液中带有色素,最好带红色或紫色的花青素。并分析白色的材料有何缺点。2、用什么试剂可以达到细胞失水、吸水的效果？学生分析得出：蔗糖溶液，清水老师强调：用蔗糖溶液做质壁分离剂对细胞无毒害作用。用哪种浓度蔗糖溶液最好？引导学生回忆哺乳动物红细胞制备细胞膜的实验，通过设计不同浓度蔗糖溶液的对照实验来探究确定0.3g/ml的蔗糖溶液最好。3、用什么方法观察实验现象？学生思考并得出：制作临时装片，用显微镜观察。..4、观察的对象是什么？将会看到什么现象呢？学生讨论得出：洋葱鳞片叶外表皮细胞。洋葱鳞片叶外表皮细胞发生质壁分离、洋葱鳞片叶外表皮细胞发生质壁分离复原老师介绍自身对照实验:自身对照实验是指实验与对照在同一对象上进行，即不另设对照组。洋葱鳞片叶外表皮细胞质壁分离和复原实验，就是典型的自身对照。自身对照，方法简便，关键是要看清楚实验处理前后现象变化的差异，实验处理前的对象状况为对照组，实验处理后的对象变化则为实验组。设计目的：以问题串的形式引导学生进行思维探究，让学生体验设计实验的方法步骤。训练学生分析问题的能力。5、学生设计实验先组内讨论，再组间交流，指导学生确定最佳实验方案6、组织学生分组实验，两个学生一组，分28个小组进行实验强调探究过程中应注意的问题:(1)取材的厚薄是实验成功的关键。（让学生比较，再探究！）表皮撕取太薄,容易撕破液泡,色素外溢,只能观察到细