显微镜的构造和使用一、目的要求1、了解显微镜的构造及其维护2、初步掌握显微镜的使用方法(一)显微镜的构造一般光学显微镜的构造包括两大部分,即保证成象的光学系统和用以装置光学系统的机械部分。目镜镜筒转换器物镜载物台光圈通光孔压片夹反光镜底座镜臂细准焦螺旋粗准焦螺旋倾斜关节1、机械部分(1)镜座:是显微镜的底座,支持整个镜体,使显微镜放置稳固。(2)镜柱:镜座上面直立的短柱,支持镜体上部的各部分。(3)镜臂:弯曲如臂,下连镜柱,上连镜筒,这取放镜体时手握的部位。镜臂的下端与镜柱连接处有一活动关节,可使镜体在一定范围内后倾,便于观察。(4)镜筒:为显微镜上部圆形中空的长筒,其上端放置目镜,下端与物镜转换器相连。(5)物镜转换器:接于镜筒下端的圆盘,可自由转动,盘上有3-4个螺旋圆孔,为安装物镜的部位,当旋动转换器时,物镜即可固定在使用的位置上,保证物镜与目镜的光线合轴。(6)载物台:为放置玻片标本的平台,中央有一圆孔,以通过光线。两旁装有压片夹,可固定玻片标本。(7)调焦装置:为了得到清晰的物像,必须调节物镜与标本之间的距离,使它与物镜的工作距离相等。这种操作叫调焦。在镜臂两侧有粗、细调焦螺旋各一对,旋转时可使镜筒上升或下降。大的一对是粗准焦螺旋,调动镜筒升降距离大,旋转一周可使镜筒移动2毫米左右。小的一对是细焦螺旋,调动镜筒的升降距离很小,旋转一周可使镜筒移动约0.1毫米。在用低倍物镜观察时,使用粗调焦螺旋;用高倍物镜观察时,用细调焦螺旋。(8)光圈:以调节光线。2、光学部分由成像系统和照明系统组成,成像系统包括物镜和目镜,照明系统包括反光镜和光圈。目镜:直插式:长度和放大倍数成反比。规格:5倍、10倍、16倍和40倍物镜:螺旋式:长度和放大倍数成正比。规格:10倍和40倍特别说明:放大倍数和与盖玻片之间的距离成反比。放大倍数=目镜放大倍数×物镜放大倍数低倍镜:放大倍数小,凹度小,直径大,通光量多,视野亮;高倍镜:和低倍镜正好相反该放大倍数指的是长度或宽度,而不是面积和体积。如图6-4中①、②表示物镜长度,③、④表示目镜长度,⑤、⑥表示物镜与玻片的距离,获得最大物像时正确的组合为A、①③⑤B、②④⑥C、①④⑥D、②③⑤视野及镜像亮度:视野是指一次所能观察的被测标本的范围。视野的大小与放大倍数成反比,既放大倍数越大视野越小,看到的标本范围就越小。镜像亮度是指视野里所看到的像的亮暗程度。它与放大倍数成反比,即在光源一定的情况下,放大倍数越大,视野越暗。(3)反光镜(反射镜):是个圆形的两面镜。一面是平面镜,能反光;另一面是凹面镜,兼有反光和汇集光线的作用,可选择使用,反光镜具有能转动的关节,可作各种方向的翻转,面向光源,能将光线反射在聚光器上。显微镜的使用一、取镜和安放1.右手握住镜臂,左手托住镜座2.把显微镜放在实验台上,略偏左(显微镜放在距实验台边缘7厘米左右)。安装好目镜和物镜。显微镜的使用二、对光3.转动转换器,使低倍物镜对准通光孔(物镜的前端与载物台要保持5厘米的距离)。显微镜的使用显微镜的使用三、观察5.把所要观察的玻片标本放在载物台上,用压片夹压住,标本要正对通光孔的中心。6.转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓下降,直到物镜接近玻片标本为止(眼睛看着物镜,以免物镜碰到玻片标本)。7.向目镜内看,同时反方向转动粗准焦螺旋,使镜筒缓缓上升,直到看清物像为止。再略微转动细准焦螺旋,使看到的物像更加清晰。显微镜的使用8、换高倍物镜:如果进一步使用高倍物镜观察,应在转换高倍物镜之前,把物像中需要放大观察的部分移至视野中央(将低倍物镜转换成高倍物镜观察时,视野中的物像范围缩小了很多)。如果换高倍物镜后物像不一定很清晰,可以转动细准焦螺旋进行调节。在转换高倍物镜并且看清物像之后,可以根据需要调节光圈或聚光器,使光线符合要求(一般将低倍物镜换成高倍物镜观察时,视野要稍变暗一些,所以需要调节光线强弱)。3.使用显微镜的注意事项(1)显微镜安放位置,显微镜应安放在离桌边缘5cm、镜筒向前,并讲清显微镜位置稍靠左侧的道理(两眼同时睁开观察,眼不易疲劳,便于绘图。)(2)对光根据光线的强弱来选择平面镜或凹面镜;用低倍镜进行对光,把低倍镜位置放低;在转动转换器时,物镜到位,光圈调节好,视野光线均匀、明亮.(3)正确使用高倍物镜的方法由于高倍物镜的工作距离小,镜头易损坏,,并且把光圈开大。(4)重视准焦螺旋的使用在使用高倍物镜时,不要调节粗准焦螺旋,避免物镜损坏、装片压烂。(5)不是倍数越大,越清晰如果目镜倍数过大,得到的放大虚像则很不清晰。在低倍镜下能看清楚的物像,不必用高倍镜观察。3.使用显微镜的注意事项视野中物像与标本移动的关系:如视野中某观察对象位于左下方如何移到中央,应将装片或切片向左下方移动(同向移动)。原因是视野中物像移动的方向或切片移动的方向相反污点判断:玻片移,污点移,则污点在玻片上;物镜换,污点移,则污点在物镜上;目镜转,污点移,则污点在目镜上目镜5X、物镜4X、视野中央有一排细胞共15个。若把物镜换成10X,则细胞数目为()个。因为视野中的细胞数目与放大倍数成反比;若目镜5X,物镜4X,视野中共有50个细胞,再把物镜换成10X,则视野中有()个细胞。因为视野中看到的实物的范围与放大倍数的平方成反比。练习:洋葱鳞叶表皮细胞(10×10)洋葱鳞叶表皮细胞(10×40)洋葱鳞叶表皮细胞(10×40)洋葱鳞叶表皮细胞装片(10×40)细胞壁细胞核细胞质(液泡)