DNA的粗提取与鉴定的实验练习

1选修1DNA的粗提取与鉴定的实验练习1、DNA的粗提取与鉴定的实验．（l）本实验材料选用鸡血细胞液而不用鸡的全血，主要原因是由于鸡血细胞液中含有较高含量的．（2）图A中加入蒸馏水的目的是．（3）通过图B所示步骤取得滤液后，再向滤液中加入2mol/L的NaCl溶液的目的是．并在坐标系内画出DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的变化的图象（4）图C所示加入蒸馏水的目的是．（5）为鉴定实验所得丝状物的主要成分是DNA，可用试剂进行检验，颜色反应为色．2、下面是某位同学以洋葱为实验材料进行DNA提取与鉴定的实验步骤：a．称取30克已切碎的洋葱，放入研钵中，加入少量石英砂，倒入10mL0.14mol/L的氯化钠溶液，充分研磨．b．研磨后，用漏斗和纱布过滤，得到滤液．c．沿烧杯壁缓缓向滤液中加入95%的酒精溶液20mL，并用玻璃棒快速搅拌，待纤维状粘稠物析出，用玻璃棒可将其轻轻卷起．d．取两支试管，编为1、2号，各加入2mol/L的氯化钠溶液2mL，向1号试管中加入一些纤维状粘稠物，振荡使其溶解，然后向两支试管中各加入2mL二苯胺试剂，观察颜色变化．请分析回答：（1）指出以上实验步骤中的三个错误：、．（2）在a步骤中，加入少量石英砂是为了，有时人们还在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂，原因是洗涤剂能，有利于DNA的释放．（3）c步骤中用玻璃棒轻轻卷起的纤维状粘稠物是色的．（4）在所有操作均正确的情况下，d步骤中1号、2号试管内溶液颜色变化分别为．（5）DNA提取实验不宜用猪血作为实验材料，原因是．3、关于DNA粗提取的实验材料的选择，研究者经过多次实验效果的比较，最终选择鸡血做实验材料．请据图回答问题：（1）在实验中，两次向烧杯中加入蒸馏水的作用是BA．稀释血液，冲洗样品B．使血细胞破裂、降低NaCl浓度使DNA析出C．使血细胞破裂、增大DNA溶解量D．使血细胞破裂、提取含杂质较少的DNA．（2）生活在牧区的人们，采集牛、羊和马血比较方便，若它们按实验要求完成实验步骤后，结果是很难提2取到DNA，原因是．（3）不同的NaCl溶液中，DNA的溶解度不同，在NaCl溶液浓度是时，DNA的溶解度最小．（4）DNA的析出和鉴定时，析出DNA时应将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等的、冷却的（写出体积分数），静置后溶液中将析出DNA．鉴定时所用的试剂为．4、某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动。具体步骤如下：材料处理：称取新鲜的菜花、辣椒和蒜黄各2份，每份10g。剪碎后分成两组，一组置于20°C，另一组置于-20°C条件下保存24h。DNA粗提取：第一步：将上述材料分别放入研钵中，各加入15mL研磨液，充分研磨。用纱布过滤，取滤液备用。第二步：将滤液放在60〜75°C的恒温水浴箱中保温10〜15min，然后将溶液过滤。第三步：先向6只小烧杯中分别注入10mL滤液，再加入20mL体积分数为95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。第四步：取6支试管，分别加入等量的2mol/LNaCl溶液溶解上述絮状物。DNA检测：在上述试管中各加入4mL二苯胺试剂，混合均匀后，置于沸水中加热5min，待试管冷却后比较溶液颜色的深浅，结果如表：材料保存温度菜花辣椒20°C++++++-20°C+++++++++注：+越多表示蓝色越深。分析上述实验过程，回答下列问题：(1)该探究性实验课题的名称是_________________________________。(2)第二步操作目的是_________________。(3)第三步中缓缓地搅拌，这是为了减少________。(4)根据实验结果，得出结论并分析。①结论1:与20°C相比，相同实验材料在-20°C条件下保存，DNA的提取量较多。结论2:_______________________________________。3②针对结论1，请提出合理的解释:_____________________________。(5)氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和DNA均不相溶，且对DNA影响极小。为了进一歩提高DNA纯度，依据氯仿的特性，在DNA粗提取第四步的基础上继续操作的步骤是：______________________。然后用体积分数为95%的冷酒精溶液使DNA析出。5、图为鸡血细胞中DNA的粗提取和鉴定实验过程中的部分操作示意图，请据图分析，回答下列问题：（1）图中正确的实验操作顺序是（用序号与箭头表示）．（2）步骤③中加入蒸馏水的目的是；步骤⑤中加入蒸馏水后DNA析出，该操作的原理是．（3）步骤①中所用酒精最佳是经过后再使用，该步骤的目的是．（4）DNA可用试剂鉴定，沸水浴后的颜色反应为．（5）由于鸡血较难找到，某学生试图用人血代替，结果没有成功，其原因最可能是．6、请回答下列有关DNA粗提取及鉴定的相关问题．（1）在提取DNA实验过程中用到两种浓度的NaCl溶液，其作用分别是：①2mol/LNaCl溶液：；②0.14mol/LNaCl溶液：（2）用鸡血提取DNA的整个操作过程中，每100mL血液中加入3g柠檬酸钠的作用是：．（3）鉴定DNA所用的试剂：．7、下图表示以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取与鉴定的操作程序，请分析回答下列问题：4(1)步骤一中，向鸡血细胞液中加入________并搅拌，可使鸡血细胞破裂。(2)步骤二中，过滤后收集含有DNA的________。(3)步骤三、四的操作原理是____________________；步骤四中，通过向溶液中加入________调节NaCl溶液的物质的量浓度至________mol/L时，DNA将会析出，过滤去除溶液中的杂质。(4)步骤七：向步骤六过滤后的________中加入等体积的冷却的________，静置2～3min，溶液中会出现________色丝状物，这就是粗提取的DNA。(5)步骤七：DNA遇________试剂，沸水浴5min，冷却后，溶液呈________色。5选修1DNA的粗提取与鉴定的实验练习参考答案1、解：（1）DNA存在于鸡血细胞中，因此DNA提取实验的材料用鸡血细胞液而不用鸡的全血．（2）分析题图可知，图A的操作是向鸡血细胞中加入蒸馏水，目的是使血细胞吸水胀破，释放出核物质DNA．（3）图B所示步骤是向含有DNA的滤液中加入2mol/L的NaCl溶液，目的是使DNA溶解于NaCl溶液中；DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的变化曲线如下图：．（4）分析题图可知，C步骤是向溶解有DNA的高浓度NaCI溶液中加入蒸馏水，目的是稀释NaCL溶液的浓度，使DNA析出．（5）在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会呈现蓝色，因此可以用二苯胺鉴定DNA．故答案为：（1）DNA（2）使血细胞吸水胀破，释放出核物质DNA（3）使DNA溶解于NaCl溶液中（4）使DNA的溶解度下降而沉淀析出（5）二苯胺蓝色2、解：（1）以上实验步骤中的三个错误为：a步骤中“倒入的氯化钠溶液浓度为0.14mol/L”；b步骤中“用玻璃棒快速搅拌；d步骤中没有沸水浴加热．（2）洗涤剂能溶解细胞膜，有利于DNA的释放．（3）c步骤中用玻璃棒轻轻卷起的纤维状粘稠物是白色的．（4）1号试管中含有DNA，加入二苯胺后沸水浴加热颜色变蓝；2号试管中不含DNA，加入二苯胺后沸水浴加热颜色不变蓝．（5）DNA提取实验不宜用猪血作为实验材料，原因是猪的成熟红细胞无细胞核（或无DNA）．故答案为：（1）a步骤中“倒入的氯化钠溶液浓度为0.14mol/Lb步骤中“用玻璃棒快速搅拌”d步骤中没有沸水浴加热（意思正确即可）（2）研磨充分溶解细胞膜（3）白6（4）变蓝、不变蓝（5）猪的成熟红细胞无细胞核（或无DNA）3、解：（1）实验中两次使用蒸馏水，第一次的目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出DNA，第二次日的是稀释NaCl溶液，使DNA从溶液中析出，故选B．（2）牛羊马为哺乳动物，其成熟的红细胞中没有细胞核，因此若它们按实验要求完成实验步骤后，结果是很难提取到DNA．（3）不同的NaCl溶液中，DNA的溶解度不同，在NaCl溶液浓度是0.14mol/l时，DNA的溶解度最小．（4）DNA的析出和鉴定时，析出DNA时应将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等的、冷却的95%的酒精，静置后溶液中将析出DNA．鉴定时所用的试剂为二苯胺．故答案为：（1）B（2）牛羊马为哺乳动物，其成熟的红细胞中没有细胞核（3）0.14mol/l（4）95%的酒精二苯胺4、(1)探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响(2)去除滤液中的杂质(3)DNA断裂(4)①等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下，从蒜黄中提取的DNA量最多②低温抑制了相关酶的活性，DNA降解速度慢(5)将第四步获得的溶液与等量的氯仿充分混合，静置一段时间，吸取上清液5、（1）③→②→⑤→④→①（2）加速血细胞的破裂DNA在NaCl溶液中的溶解度，随NaCl溶液浓度的降低而减小（3）充分预冷提取含杂质较少（或较纯净）的DNA（利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNA）（4）二苯胺蓝色（5）人血含DNA太少（成熟的红细胞没有细胞核）6、（1）①溶解DNA②析出DNA（2）防止血液凝固（3）二苯胺7、(1)蒸馏水(2)滤液(3)DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同，通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质蒸馏水0.14(4)滤液酒精白(5)二苯胺蓝