斐林试剂和双缩脲试剂区别

斐林试剂和双缩脲试剂区别1、试剂的浓度和配制方法不同斐林试剂：甲液：0.1g/mL的NaOH溶液；乙液：0.05g/mL的4CuSO溶液。使用前临时配制，在2mL的甲液中滴入4滴～5滴乙液，振荡使混合均匀后即可。双缩脲试剂：A液：0.1g/mL的NaOH溶液；B液：0.01g/mL的4CuSO溶液。分别配制好A液和B液即可。2、试剂的作用和鉴定原理不同斐林试剂：作用：可鉴定可溶性还原糖。原理：甲液和乙液混合后产生2)OH(Cu沉淀，2)OH(Cu与含醛基（—CHO）的可溶性还原糖，在加热条件下反应，将2)OH(Cu还原为砖红色的OCu2沉淀。双缩脲试剂：作用：可鉴定蛋白质溶液。原理：在碱性溶液（NaOH）中，双缩脲（22CONHNHNCOH）能与2Cu反应，形成紫色络合物。由于蛋白质分子中含有许多与双缩脲结构相似的肽键（—CO—NH—），因此，蛋白质都可以与双缩脲试剂发生反应而使溶液呈现紫色。3、试剂的使用方法不同斐林试剂：使用时现配现用，要水浴加热。如果斐林试剂放置一段时间，因2)OH(Cu沉淀在溶液底部而无法使用。使用时，甲液和乙液不可分别加入到待测液中，否则，待测液（苹果组织样液）中的有机酸会中和NaOH，使产生的2)OH(Cu不足而影响鉴定。双缩脲试剂：使用时，双缩脲试剂A液和双缩脲试剂B液要分别先后加入到待测液中，不需要加热。双缩脲试剂A液和双缩脲试剂B液不可以混合后再加入待测液。如先混合，则会产生2)OH(Cu沉淀而无2Cu产生。加入的双缩脲试剂B液（4CuSO）也不能过量，否则蓝色的2)OH(Cu会遮盖产生的紫色。4、反应中出现的颜色不同斐林试剂鉴定可溶性还原糖，出现的颜色变化为：浅蓝色→棕色→砖红色。待测液加入刚配制的斐林试剂，溶液是浅蓝色；水浴加热后，一部分2)OH(Cu被还原为砖红色的OCu2，溶液呈现两种颜色的混合色——棕色；随着反应的完成，2)OH(Cu全部被还原为OCu2，溶液呈砖红色。双缩脲试剂鉴定蛋白质，出现的颜色变化为：无色→浅蓝色→紫色。加入双缩脲试剂A液，溶液无色；再加入双缩脲试剂B液，有2Cu形成，溶液呈浅蓝色；振荡均匀后，反应完成，溶液呈紫色。