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专题5测评(时间:100分钟,满分:100分)一、选择题(每小题2分,共50分)1.DNA在nm的紫外线波段有一强烈的吸收峰,其峰值的大小与DNA含量有关。()A.220B.240C.260D.280解析:DNA在260nm的紫外线波段有一强烈的吸收峰,其峰值的大小与DNA含量有关。据此,可以进行DNA含量的测定。答案:C2.下列关于DNA粗提取与鉴定实验中所使用的试剂、操作及作用的表述,不正确的是()试剂操作作用A柠檬酸钠溶液与鸡血混合防止血液凝固B蒸馏水与鸡血细胞混合保持细胞形状C蒸馏水加入到溶解有DNA的物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液中降低NaCl溶液的浓度,使DNA析出D二苯胺试剂DNA与二苯胺在沸水浴的条件下发生蓝色反应鉴定DNA解析:蒸馏水在本实验中的作用有两个:一是用于调节NaCl溶液的浓度,使DNA沉淀析出或溶解;二是用于鸡血细胞的破碎,释放细胞内的物质。解答此类试题时需要学生理解实验的各个环节的操作和作用。答案:B3.下列叙述中错误的是()A.改变NaCl溶液的浓度只能使DNA溶解而不能使其析出B.在沸水浴中,DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色C.用电泳法可分离带电性质、分子大小和形状不同的蛋白质D.用透析法可去除蛋白质样品中的小分子物质解析:当NaCl溶液的物质的量浓度为0.14mol/L时可以析出DNA。答案:A4.DNA的粗提取与鉴定实验中有三次过滤:(1)过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液;(2)过滤含黏稠物的物质的量浓度为0.14mol/LNaCl溶液;(3)过滤溶解有DNA的物质的量浓度为2mol/LNaCl溶液。以上三次过滤分别为了获得()A.含核物质的滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液B.含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠物、含DNA的滤液C.含核物质的滤液、滤液中DNA黏稠物、纱布上的DNAD.含较纯的DNA滤液、纱布上的黏稠物、含DNA的滤液解析:用蒸馏水稀释鸡血细胞液,使血细胞的细胞膜、核膜破裂,释放出核物质,此时过滤只能得到含DNA和其他物质如蛋白质的滤液,这种滤液必须经过实验中其他步骤的相继处理,方能得到较纯的DNA。DNA在物质的量浓度为0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低,呈丝状黏稠物,可经过滤留在纱布上。DNA易溶解于物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液中,过滤可获得含DNA的滤液。答案:A5.下列有关PCR技术的说法,不正确的是()A.PCR技术是在细胞内完成的B.PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术C.PCR技术的原理与DNA复制的原理相同D.PCR技术的前提是有一段已知的目的基因的核苷酸序列解析:PCR技术是在生物体外进行DNA复制的技术,其原理与DNA复制的原理相同,但前提是必须要有一段已知的目的基因的核苷酸序列和根据核苷酸序列合成的引物。答案:A6.下列符合PCR反应条件的是()①稳定的缓冲液环境②DNA模板③合成引物④4种脱氧核苷酸⑤DNA聚合酶⑥DNA解旋酶⑦限制性核酸内切酶⑧温控设备A.①②③④⑤⑥B.①②③④⑤⑥⑦⑧C.③④⑤⑥⑦⑧D.①②③④⑤⑧解析:PCR反应应模拟生物细胞内DNA复制的条件,只是无需解旋酶(可热变性),也不需要基因工程的工具酶(限制性核酸内切酶)。答案:D7.从细胞中提取某种特定的蛋白质比提取DNA难度大,其原因不包括()A.蛋白质对温度、盐浓度、pH等条件更敏感,更易失活B.蛋白质的空间结构多样,理化性质各不相同,使得蛋白质的提取没有统一的方法C.提取某种特定蛋白质时需根据其特性摸索提取的程序D.提取血红蛋白程序可分为样品处理、粗分离、纯化、纯度的鉴定四大步解析:提取蛋白质比提取DNA的难度大,是因为与DNA相比,蛋白质对温度、盐浓度、pH等条件更敏感,更容易失活;并且蛋白质的空间结构多样,理化性质各不相同,使得蛋白质的提取没有统一的方法,只能根据特定蛋白质的特性摸索提取的条件,设计特定的方法;血红蛋白是位于红细胞内的含Fe2+的蛋白质,其分离和提取程序大致为:样品处理、粗分离、纯化和纯度的鉴定,但这一点不是提取蛋白质难度大的原因。答案:D8.做DNA粗提取和鉴定实验时,实验材料用鸡血而不用猪血的原因是()A.鸡血的价格比猪血的价格低B.猪的红细胞没有细胞核,不能提取到DNAC.鸡血不凝固,猪血会凝固D.用鸡血提取DNA比用猪血提取操作简便解析:猪属于哺乳动物,哺乳动物成熟的红细胞无细胞核,不能提取到DNA。答案:B9.下列关于DNA的粗提取实验和血红蛋白的提取实验的叙述,正确的是()A.前者选择鸡血细胞作为材料较好,后者选择哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料较好B.样品预处理时,前者静置1天处理除去上清液;后者需要加入清水,反复低速短时间离心洗涤,至上清液无黄色C.在DNA粗提取实验中,往物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液中加入蒸馏水析出DNA时,应该缓慢加入,直到出现黏稠物为止D.洗涤红细胞的目的是去除血浆中的葡萄糖、无机盐等解析:鸡血细胞有细胞核,适于提取DNA;哺乳动物成熟红细胞无细胞核和众多细胞器,适用于提取血红蛋白。提取血红蛋白的实验中,洗涤红细胞时,不能加清水,应该加入生理盐水,否则细胞提早释放出血红蛋白与杂质混合,加大提取难度。DNA初次析出时,加蒸馏水至黏稠物不再增加为止。洗涤红细胞的目的是去除杂质蛋白,以利于血红蛋白的分离和纯化。答案:A10.某同学用洋葱进行DNA粗提取和鉴定实验,操作错误的是()A.加入洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨B.用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的DNAC.加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌D.加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热解析:A项中,应该是加入洗涤剂和食盐后进行轻缓、充分的搅拌和研磨,故错误。B项中,加入蛋白酶,消除滤液中的蛋白质,用于纯化DNA,故正确。C项中,DNA不溶于酒精溶液,加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌获取的丝状物就是DNA,故正确。D项中,二苯胺试剂用于鉴定DNA,其鉴定过程需要沸水浴加热,故正确。答案:A11.下列关于DNA的粗提取与鉴定实验的相关叙述,错误的是()A.可以选择DNA含量较高的生物组织为材料,如鸡的血细胞B.DNA不溶于酒精,且在物质的量浓度为0.14mol/L的NaCl溶液中析出C.可以利用嫩肉粉把杂质多糖和RNA去除D.洗涤剂可以溶解细胞膜,从而获得含有DNA的滤液解析:鸡血细胞中含有DNA,可作为提取DNA的生物组织材料;DNA不溶于酒精,NaCl溶液的物质的量浓度为0.14mol/L时DNA溶解度最小,此时可大量析出;嫩肉粉中含有蛋白酶,可将蛋白质水解,从而除去蛋白质,不能除去多糖和RNA;洗涤剂可以溶解细胞膜,从而获得含有DNA的滤液。答案:C12.下面左图用DNA测序仪测出的某人DNA片段的碱基排列顺序,右图是DNA测序仪测出的另外四个DNA片段的碱基排列顺序,请认真比较这四幅图,其中与所给样本碱基排列顺序最相似的是()解析:将A、B、C、D所给碱基序列与所给样本作比较,分布最相似的,就是碱基序列最相似的。答案:C13.下列关于红细胞的洗涤过程的叙述,正确的是()A.低速长时间离心,如500r/min,12min,以保证达到很好的分离效果B.离心后用胶头吸管吸出下层透明的红色血浆C.将下层暗红色的红细胞液体倒入烧杯,再加入五倍体积的蒸馏水D.直至上清液中没有颜色,表明红细胞已洗涤干净解析:红细胞洗涤过程中,应做低速短时间离心,以避免白细胞、淋巴细胞等一同沉淀,影响血红蛋白的提纯;离心后血浆在上层,并呈现黄色;洗涤红细胞时应用生理盐水而不用蒸馏水,否则,将导致红细胞破裂影响实验结果。答案:D14.PCR仪实质上是一台自动调控温度的仪器,它调控不同温度的目的是()①94℃,使DNA分子变性,失去生物活性②94℃,使DNA分子变性,解开螺旋③55℃,使DNA分子开始复制、延伸④55℃,使DNA分子恢复双螺旋结构,恢复活性⑤72℃,使DNA分子开始复制、延伸⑥72℃,使DNA分子恢复双螺旋结构,恢复活性A.①③⑤B.②③⑤C.②④⑤D.②④⑥解析:PCR利用了DNA的热变性原理,通过控制温度来控制双链的解旋与结合。PCR仪实质上是一台能够自动调控温度的仪器。当温度上升至94℃时,DNA分子变性,解开双螺旋结构;温度下降到55℃时,引物与DNA单链结合,DNA恢复双螺旋结构,恢复活性;温度上升至72℃,DNA分子开始复制、延伸,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。答案:C15.PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,但令人头痛的问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生。防止污染的办法不包括()A.将样品的处理、配制PCR反应液、PCR循环扩增及PCR产物的鉴定等步骤分区或分室进行B.吸样枪吸样要慢,吸样时尽量一次性完成,枪头、小离心管应一次性使用,以免交叉污染C.所有的PCR试剂都应放置于大瓶分装,以减少重复加样次数,避免污染机会D.PCR试剂、PCR反应液应与样品及PCR产物分开保存,不应放于同一冰盒或同一冰箱解析:所有的PCR试剂都应放置于小瓶分装,一次性用完,避免因多次使用造成污染。答案:C16.多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述三十多次循环:94℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性(引物与DNA模板链结合)→72℃下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是()A.变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键,也可利用解旋酶实现B.复性过程中引物与DNA模板链的结合依靠互补配对原则完成C.延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、4种核糖核苷酸D.PCR与细胞内DNA复制相比,所需要酶的最适温度较高解析:变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键,也可利用解旋酶实现;复性过程中引物与DNA模板链的结合依靠互补配对原则完成;延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、4种脱氧核苷酸;PCR与细胞内DNA复制相比,所需要酶的最适温度较高。答案:C17.下列关于DNA聚合酶催化合成DNA子链的说法,正确的是()A.以DNA为模板,使DNA子链从5'端延伸到3'端的一种酶B.TaqDNA聚合酶必须在每次高温变性处理后再添加C.DNA聚合酶能特异性地复制整个DNA的全部序列D.TaqDNA聚合酶是从深海生态系统中发现的解析:在PCR扩增DNA分子的过程中,各种组分要一次性加入;DNA聚合酶只能特异性地催化DNA特异片段的复制;TaqDNA聚合酶是从美国黄石国家公园的一个热泉中发现的。答案:A18.关于凝胶色谱柱的装填,除哪项外均为正确解释?()A.交联葡聚糖凝胶(SephadexG-75)“G”表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围,75表示凝胶得水值B.色谱柱内不能有气泡存在,一旦发现有气泡,必须重装C.用300mL物质的量浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝胶12hD.凝胶用自来水充分溶胀后,配成凝胶悬浮液解析:凝胶色谱中使用的交联葡聚糖凝胶(SephadexG-75),其中G表示凝胶的交联程度、膨胀程度及分离范围,75表示凝胶得水值,即每克凝胶膨胀时吸水7.5g;气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果,因此,一旦发现有气泡,必须重装;在洗脱过程中,应在约50cm高的操作压下,用300mL物质的量浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝胶12h,以使凝胶装填紧密;凝胶溶胀时,应使用蒸馏水将其充分溶胀,制成凝胶悬浮液。答案:D19.(2015广东理综)关于DNA的实验,叙述正确的是()A.用兔的成熟红细胞可提取DNAB.PCR的每个循环一般依次经过变性-延伸-复性三步C.DNA溶液与二苯胺试剂混合,沸水浴后生成蓝色产物D.用甲基绿对人的口腔上皮细胞染色,细胞核呈绿色,细胞质呈红色解析:本题考查DNA提取、鉴定以及PCR技术的有关知识。兔是哺乳动物,哺乳动物成熟的红细胞无细胞核,故不能用兔的成熟红细胞作为提取DNA的实验材料,A项错误。PCR技术的每个循环一般经过变性-复性-延伸三步,B项错误。