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专题1基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过_________________，赋予生物以_____________，创造出__________________________。基因工程是在__________上进行设计和施工的，又叫做_____________。（一）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——__________________________（1）来源：主要从_____________中分离纯化出来的，常见的有_____和___________。（2）功能：能够识别双链DNA分子的________，并且使每一条链中_____部位的两个核苷酸之间的___________断开，因此具有_____性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：________和________2.“分子缝合针”——_________(1)DNA连接酶的种类（和）的比较：①相同点：都缝合_________键。②区别：E·coliDNA连接酶来源于_________，只能将双链DNA片段互补的_______之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于_________能缝合_______，但连接平末端的之间的效率较_。(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将_________加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接_________的末端，形成磷酸二酯键。3.“分子运输车”——_________（1）载体具备的条件：①___________________________②___________________________③___________________________④（2）最常用的载体是____,其本质是_____________（它并非只存在于原核细胞，某些真核细胞中也存在）（3）其它载体：___________________________(二)基因工程的基本操作程序第一步：__________________1.目的基因是指：。2.获取目的基因的方法有_________、_______、_______。3.PCR技术扩增目的基因（1）原理：_________。（2）条件：_______、_______、_______、_______。（3）过程：第一步：加热至90～95℃使________；第二步：冷却到55～60℃，_________________；第三步：加热至70～75℃，_______酶从引物起开始互补链的合成（4）结果：目的基因以_______形式扩增，即________。第二步：_______________（基因工程的核心）1.目的：使目的基因在受体细胞中_______________，2.组成：__________＋__________＋__________＋__________（1）启动子：是一段有特殊结构的，位于基因的__________，是______酶识别和结合的部位，能驱动基因，最终获得所需的。（2）终止子：也是一段有特殊结构的，位于基因的。（3）标记基因的作用：，常用的标记基因是_______。第三步：____________________1.转化的概念：进入内，并且在受体细胞内________和__________的过程。2.常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：常用的方法是______，其次还有__________和__________等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是。此方法的受体细胞是__________。将目的基因导入微生物细胞：最常用的原核细胞是__________，其转化方法是先用_____处理细胞，使其成为__________，再将_________溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。第四步：____________________1.首先要检测上是否插入了，方法是采用____________________2.其次还要检测____________________，方法是采用作探针与杂交。3.最后检测，方法是从转基因生物中提取，用相应的__________进行____________________。4.有时还需进行水平的鉴定。如。（三）基因工程的应用1、基因治疗的概念：___________________________。（四）蛋白质工程1、概念：蛋白质工程是指以作为基础，通过____________________，对现有蛋白质进行，或制造一种__________，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产的蛋白质）2、蛋白质工程的基本途径：____________________，____________________，____________________，____________________。