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实验诊断学复习资料第一章临床血液学检测第二节溶血性贫血的实验室检测一溶血性贫血的筛查实验（一）血浆游离血红蛋白测定1.参考值：50mg/l2.临床意义：血管内溶血时明显增高，血管外溶血不变，自免和溶血性贫血轻度增高（二）含铁血黄素尿试验1.原理：含铁血黄素和酸化的低铁氰化钾——普鲁士蓝反应。尿沉渣镜下深蓝色物质2.临床意义：血管内溶血可见，常阵发性睡眠性蛋白尿。溶血初期阴性3.正常值：阴性二、红细胞膜缺陷检测——红细胞渗透脆性试验1.正常值：0.42%-0.46%/0.28%-0.34%2.临床意义：（1）增高：0.5%/0.38%：遗传性球形红细胞增多，温抗体型自身免疫性溶血性贫血，遗传性椭圆形红细胞增多症。（2）减低：海洋性贫血，缺铁性贫血和阻塞性黄疸等。三、红细胞酶缺陷的检测（一）高铁血红蛋白还原试验1.原理：G6DP正常时可以完成2.参考值：75%，高铁血红蛋白0.3-1.3g/l3.临床意义：G6PD缺陷，高铁血红蛋白还原率减低。见于蚕豆病和伯安奎类药物溶血。（二）变性珠蛋白小体生成试验1.原理：高铁血红蛋白增高生成2.参考值：30%3.临床意义：增高见于G6PD缺陷症，不稳定Hb,HbH病高于45%四、珠蛋白生成异常——血红蛋白电泳1.原理2.参考值：（阳极→阴极）HbA→HbA2→NH1→NH23.临床意义：（1）HbA2增高：轻型地贫诊断标准。个别恶性贫血、巨幼细胞性贫血，不稳定血红蛋白血病（2）减低：缺铁性贫血和铁幼粒细胞贫血五、自身免疫性溶血性贫血（AIHA）的检测（一）抗人球蛋白试验1.原理：coombs实验，直接阳性说明患者红细胞表面上有不完全抗体；间接阳性说明血清中存在不完全抗体2.参考值：直接和间接都是阴性3.临床意义：（1）阳性：新生儿溶血病、自身免疫性溶血、SLE、类风湿性关节炎、恶性淋巴瘤、甲基多巴和青霉素药物溶血（2）AIHA大多为温抗体型，IgG，必要时要在4℃进行试验排除假阳性,也要用广谱抗人球蛋白血清试验（3）间接：主要用于Rh或ABO妊娠免疫性新生儿溶血母体血清抗体检测（二）冷凝集素试验1.原理：冷凝集素：可逆性抗体，在低温时与自身红细胞等同型红细胞反应，温度增高凝集块消失。2.参考值：效价＜1：40，最适反应温度4℃3.临床意义：AIHA升高六、阵发性血红蛋白尿（PNH）检测（一）酸溶血试验（Ham）1.原理：PNH患者红细胞对补体敏感性增高，在酸化血液中孵育后易溶血2.参考值：阴性3.临床意义：阳性见于PNH和AIHA严重的（二）蔗糖溶血试验1.原理：蔗糖溶液孵育后能加强补体和红细胞膜结合，使细胞膜上产生小孔，蔗糖进入以溶血（PNH患者）2.参考值：阴性3.阳性：PNH。轻度阳性也可见于巨幼细胞贫血、再障、AIHA和遗传性球形红细胞增多。阳性者应再做Ham实验第三节骨髓细胞学检测一、血细胞的生成、发育和正常形态学特征（见组胚）二、骨髓细胞学检查（形态学、免疫、细胞生物学、分子生物学）（一）骨髓形态学检测1.标本采集：骨髓穿刺2.染色：瑞吉染色后显微镜检查3.正常骨髓象——增生活跃，20:1；粒红比值：2-4:1增生程度成熟细胞：有核细胞有核细胞数/HP常见病例增生极度活跃1:1100急慢性白血病增生明显活跃10:150-100急慢性白血病，增生性贫血增生活跃20:120-50正常骨髓象，增生性贫血增生减低50：15-10再障增生极度减低200:15再障（2）粒系：0.4-0.6，原＜百分之二；早＜百分之五；中晚各百分之十五，杆状多于分页，酸五碱一（3）红系：0.2，原一早五中晚十。三、细胞化学染色（一）过氧化物酶染色（MPO）1.目的：鉴别急粒和急淋2.参考范围：粒系：强阳性（是碱性粒细胞阴性，原粒细胞阴性）单核系：弱阳性淋巴系：阴性3.临床意义：鉴别急淋和急粒，一般仅计数幼稚细胞（二）中性粒细胞碱性磷酸酶染色（NAP）1.原理：碱性磷酸酶主要存在于成熟阶段的中性粒细胞中。2.参考值：10%-40%3.临床意义：鉴别诊断（1）感染性疾病：急性化脓菌感染增高，病毒感染正常或降低（2）慢粒：明显减低（3）类白血病反应：极度增高，与慢粒鉴别的重要指标（4）急粒：降低（5）急淋：增高（6）急单核：正常或增高（7）再障：增高（8）阵发性睡眠性血红蛋白尿：降低，和再障区别（9）其他血液病（10）腺垂体或肾上腺皮质功能亢进：增高（三）酯酶染色1.特异性酯酶染色1.1粒细胞酯酶（AS-DNCE）（1）原理：氯化醋酸AS-D萘酚酯酶主要存在粒细胞中，原粒细胞阴性。早幼粒细胞强阳性，之后又减弱（2）临床意义：急粒强阳性，急淋阴性，急粒-单核部分阳性部分阴性1.2α-丁酸萘酚酯酶染色（单核细胞酯酶）α-NBE1.3酯酶双染：粒-单核系白血病诊断2.非特异性酯酶染色（α-NAE）鉴别诊断必须做NaF抑制试验：急粒：原粒弱阳性，不被抑制，原单阳性，被抑制（四）糖原染色（PAS反应）1.原理：过碘酸能将血细胞中的糖原氧化生成醛基，醛基和品红结合形成紫红色化合物2.临床意义：（1）强阳性：红血病、红白血病。（2）阳性：部分贫血，急淋、急单（3）弱阳性或阴性：急粒（五）铁染色1.原理：普鲁士蓝反应2.参考值：外+~++，内20%~90%3.临床意义：（1）缺铁性贫血鉴别：外铁消耗完（2）铁粒幼细胞、溶血性贫血、巨幼细胞贫血、再障等：外铁增加（3）环状铁粒幼细胞15%，铁粒幼细胞贫血四、急性白血病的MICM分型（详见PPT五、常见血液病血液学特征第四节血型鉴定与交叉配血试验第三章出血、血栓与止血检测第一节止血、凝血和纤溶机制第二节血管壁检测一、出血时间（BT）测定1.原理：将皮肤刺破后，血液自然流出到自然停止的时间2.参考值：（6.9±2.1）min，超过9为异常3.临床意义：（1）延长：1）血小板明显减少2）严重缺乏某些凝血因子3）血管异常：遗传性出血性毛细血管扩张症4）药物影响（2）缩短：临床价值有限，多为误差二、血管性血友病因子抗原测定（vWF）1.原理：在含血管性血友病因子抗体的琼脂糖凝胶板中加入一定量受检血浆，电泳，出现抗原-抗体反应形成的火箭样沉淀峰，高度和受检血浆中血管性血友病因子浓度正相关2.参考值：LAURELL免疫火箭电泳法：94.1%±32.5%；ELISA：70%-150%3.临床意义：（1）降低：血管性血友病（vWD），诊断分型指标之一（2）升高：血栓性疾病、心肌梗死、心绞痛、脑血管病变、糖尿病、妊娠高血压、肾小球疾病、大手术后、恶性肿瘤、免疫性疾病、感染性疾病、骨髓增生症等第三节血小板检测一、血块收缩试验1.原理：检测析出血清容积反应血小板血块收缩能力2.参考值：血块收缩率：65.8%±11.0%；血块收缩时间：2小时开始收缩，18-24小时完全收缩3.临床意义：（1）减低：特发性血小板减少性紫癜，血小板增多症、血小板无力症、红细胞增多症等等（2）升高：先天性和获得性因子XIII缺陷二、血小板第三因子有效性试验1.原理：三、血小板黏附试验1.原理：计数血液通过含一定量玻璃珠柱前后血小板数的差，计算出黏附后的血小板占总数的百分比2.参考值：62.5%±8.6%3.临床意义：（1）增高：血栓前状态和血栓性疾病（2）减低：血管性血友病，巨血小板综合征、血小板无力症、尿毒症、肝硬化、异常蛋白血症、骨髓增生异常综合症、急性白血病、服用抗血小板药物、低纤维蛋白原血症等第四节凝血因子测定一、凝血时间测定二、活化部分凝血活酶时间测定三、血浆凝血酶原时间测定第四章排泄物等检测第一节尿检（见手稿）第二节脑脊液检查（见手稿）第三节粪便检测一、标本采集——自然排出法1.常规检查标本：（1）干燥洁净容器，新鲜标本，无尿液（3）取脓血部分检查（4）在没有粪便又必须检查可以肛门指诊2.寄生虫（1）初筛三送三检（2）阿米巴等原虫要三十分钟内送检保温3.隐血试验：素食三天，禁服维生素C二、理学检查（一）量100-300g/次/日（二）颜色与性状1.鲜血便：直肠息肉、直肠癌、肛裂和痔疮等2.柏油样：上消化道出血，稀薄粘稠漆黑发亮3.白陶土：胆管阻塞4.脓性和脓血便：肠道下段病变。阿米巴血为主，细菌脓为主5.米泔样：霍乱6.粘液便：小肠炎症混合在粪便中，大肠炎症覆盖在表面，各种炎症痢疾7.稀糊状或水样：感染和非感染性腹泻。（绿色，小儿肠炎。大量黄绿色稀汁有膜状物，假膜性肠炎。洗肉水样，副溶血弧菌性食物中毒。红豆汤样，出血性坏死性肠炎。）8.细条样：直肠狭窄，直肠癌。9.乳凝块（蛋花样）：乳儿消化不良（三）气味1．肉食者臭，素食者轻2．恶臭：慢性肠炎、胰腺疾病、结肠和直肠溃烂。3．血腥臭：阿米巴肠炎4．酸臭：糖类或脂肪消化不良（四）寄生虫体（五）结石：胆胰胃肠石三、化学检查——粪便隐血试验（FOBT）1.参考值：阴性2.原理：含铁血红素催化过氧化物分解显色3.临床意义：鉴别诊断消化道出血（1）间歇性阳性：消化性溃疡（2）持续性阳性：消化道恶性肿瘤（3）常为阳性：急性胃粘膜病变、肠结核、克罗恩病、溃疡性结肠炎、钩虫病和流行性出血热等四、显微镜检查（一）细胞1.红细胞：下消化道出血和直肠病变——阿米巴痢疾红细胞多于白细胞，菌痢白细胞多于红细胞2.白细胞：各种炎症，小肠炎小于153.巨噬细胞：菌痢和溃疡性结肠炎4.肿瘤细胞（二）食物残渣1.淀粉颗粒：腹泻者，慢性胰腺炎等。2.脂肪小滴：急慢性胰腺炎、胰头癌、肠蠕动亢进等3.结缔组织：胃蛋白酶缺乏（三）寄生虫和寄生虫卵第五节浆膜腔积液检查一、分类和发生机制（一）漏出液（非炎症性积液）1.血浆胶体渗透压降低2.毛细血管内流涕静压增高3.淋巴管阻塞4.多浆膜腔积液（二）渗出液（炎症性积液，大分子从破溃血管壁溢出）1.感染性2.非感染性：外伤、化学性刺激、肿瘤等3.单一浆膜腔积液二、一般性状检查（一）颜色1.漏出液：淡黄色2.渗出液：随病情不同而不同（1）红色：血性：肿瘤什么的（2）淡黄色：化脓菌感染（3）绿色：绿脓杆菌感染（4）乳白色：淋巴管阻塞（二）透明度1.漏出液清晰透明2.渗出液不同程度浑浊（三）比重1.漏出液1.0802.渗出液1.080（四）凝固性1.漏出液一般不凝固2.渗出液容易凝固或可以自行凝固三、化学检查（一）黏蛋白定性试验（rivalta试验）：1.原理：浆膜上皮细胞受炎症刺激时分泌增加，等电点ph3-5，稀醋酸中可以析出2.鉴别：漏出液阴性，渗出液阳性（二）蛋白定量试验（鉴别漏出液和渗出液最好）1.渗出液：30g/l2.漏出液：25g/l（三）葡萄糖测定1.渗出液：细菌或细胞酶分解而减少2.和血浆中葡萄糖含量差不多（四）乳酸测定：10mmol/L高度提示细菌感染。风湿、心功能不全和恶性肿瘤引起的积液中可以轻度增加（五）乳酸脱氢酶（LDH）：化脓性胸膜炎达到正常血清的30倍（六）腺苷脱氨酶测定（ADA）：结核40U/L癌漏出液，可以作为抗结核治疗治标（七）溶菌酶（lys）：结核性胸水和癌性胸水的鉴别，结核与血清比值大于1，癌性小于1（八）淀粉酶（AMY）：急性胰腺炎四、显微镜检查1.细胞计数：漏出液白细胞小于100，渗出液大于5002.细胞分类计数3.脱落细胞检测4.寄生虫检测五、渗出液与漏出液的区别（见前述自行整理）鉴别要点漏出液渗出液原因非炎症因素各种损伤导致炎症外观淡黄清晰透明各种颜色并且很浑浊透明度清晰透明浑浊比重小于1.080大于1.080凝固不自凝容易自凝黏蛋白定型阴性阳性蛋白定量（g/l）2530葡萄糖定量等与血糖小于血糖细胞计数100500细胞分类间皮细胞和淋巴细胞为主各种白细胞或淋巴细胞为主细菌学检测阴性有病原菌积液/血清总蛋白小于0.5大于0.5积液/血清LDH比值小于0.6大于0.6LDH（IU）小于两百大于两百第六节生殖系统体液检测一、阴道分泌物检测二、精液检测三、前列腺液检测第五章肾功能检查第一节肾小球功能检查一、内生肌酐清除率试验（Ccr）1.原理：肌肉生成1ml/min，严禁肉类和利尿，饮水后24h或4h收集尿液。2.公式：Ccr=min/ml血肌酐浓度每分钟尿量尿肌酐浓度3.参考范