紫外灯消毒效果验证

第1页共9页传递窗紫外灯表面消毒效果验证编号Code:版本Version:编写Preparedby:日期Date:审核Checkedby:日期Date:批准Approvedby:日期Date:生效日期DateofEffective:第2页共7页传递窗紫外灯表面消毒效果验证目录1、概述.............................................................................................................................................22、实施日期及时间安排.................................................................................................................33、验证小组成员.............................................................................................................................34、仪器和设备.................................................................................................................................35、材料与试剂.................................................................................................................................36、验证过程.....................................................................................................................................47、验证结果记录.............................................................................................................................68、再验证周期.................................................................................................................................69、相关SOP....................................................................................................................................710、QA职责....................................................................................................................................711、修改事项....................................................................................................错误!未定义书签。12、文档............................................................................................................错误!未定义书签。1、概述进入净化车间的零配件或其它物品通过传递窗，进入微生物室的物品通过传递窗，经过紫外消毒后进入微生物室。为了确认传递窗紫外灯的消毒效果，特起草方案对其进行验第3页共7页证。本验证用于生产车间、微生物室、无菌室传递窗紫外灯表面消毒效果检查。2、实施日期及时间安排2007年月日开始进行验证。3、验证小组成员张兴雨负责验证方案的批准王宇负责验证方案、验证报告的审核、组织验证方案的培训和实施高江、张英负责验证方案和验证报告的起草验证方案的实施4、仪器和设备仪器名称型号或规格净化工作台HS-1300-V型菌落计数器紫外线强度测定仪稳压器220V细菌培养箱SHP-150型霉菌培养箱GNP-9270型5、器材5.1灭菌刻度吸管（1ml，10ml）5.2灭菌试管5.3灭菌平皿5.4酒精灯5.5载体：（1.0×1.0cm的玻片）6、材料与试剂6.1纯化水6.2营养琼脂培养基第4页共7页6.3改良马丁琼脂培养基6.4营养肉汤培养基6.5改良马丁培养基6.6金黄色葡萄球菌[CMCC（B）26003]6.7枯草芽孢杆菌[CMCC（B）63501]6.8大肠杆菌[CMCC（B）44102]6.9白色念珠菌[CMCC（F）98001]6.10稀释液（0.1％吐温80，0.1％蛋白胨溶液）7、验证过程7.1试验环境试验在洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内进行，全过程严格遵守无菌操作。单向流空气区、工作台面及环境定期按《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。每次操作开始前，开紫外灯照射1小时。7.2培养基的制备7.2.1营养琼脂培养基配方：营养琼脂培养基粉31.0g纯化水1000ml配制：根据需要量称取营养琼脂培养基粉置适宜容器中，按配方比例加入纯化水，水浴加热使溶解，调pH至7.1±0.2，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌121℃×15分钟。7.2.2改良马丁琼脂培养基配方：改良马丁琼脂培养基粉42.0g纯化水1000ml配制：第5页共7页根据需要量称取改良马丁琼脂培养基粉，按配方比例加入纯化水，水浴加热使溶解，调pH至6.4±0.2，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌115℃×20分钟。7.2.3营养肉汤培养基配方：营养肉汤培养基20g纯化水1000ml配制：称取营养肉汤培养基20克，加1000ml纯化水，加热溶解，加热至沸，冷却至常温，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌121℃×15分钟。7.2.4改良马丁培养基配方：改良马丁培养基粉28.0g纯化水1000ml配制：根据需要量称取改良马丁培养基粉，按配方比例加入纯化水，水浴加热使溶解，调pH至6.4±0.2，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌115℃×20分钟。7.4方法验证试验7.4.1辐照强度测定7.4.1.1开启紫外灯5min后，用中心波长为253.7nm的紫外线强度测定仪在灯管下方垂直1m的中心处测量其辐照度值（uW/cm2）。7.4.1.2测量时，电压应稳定在220V。7.4.1.3普通型或低臭氧型直管紫外线灯（30W），在灯管下方垂直1m的中心处，新灯管的辐照度值应≥90uW/cm2。使用中的灯管的辐照度值应≥70uW/cm2，低于此值者应予更换。7.4.2照射剂量表面消毒接受的照射剂量，应达杀灭目标微生物所需。对大肠杆菌，照射剂量应达到7.5×103uW·s/cm2,对金黄色葡萄球、白色念珠菌、枯草芽孢杆菌应达到2.53×104uW·s/cm2。7.4.2.2照射剂量计算：第6页共7页照射剂量（uW·s/cm2）＝紫外灯管强度（uW/cm2）×时间（s）7.4.3细菌及其芽孢和真菌杀灭效果的测定7.4.3.1菌液的制备接种菌种名称接种培养基培养条件金黄色葡萄球菌新鲜培养物营养肉汤培养基30～35℃培养18～24小时大肠杆菌新鲜培养物枯草芽孢杆菌新鲜培养物白色念珠菌新鲜培养物改良马丁培养基23～28℃培养24～48小时金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、白色念珠菌培养后，将菌液进行活菌计数。7.4.3.2将灭菌载体平放于灭菌平皿内，每个载体滴注定量菌悬液，（载体回收菌量达5×105～5×106cfu/片），涂匀，放37℃培养箱烘干。开启紫外灯5min后，将16个染菌玻片平放于灭菌平皿内，水平放于适当距离照射，于4个不同间隔时间（15min、30min、45min、60min）各取出4个染菌玻片，分别投入4个盛有5ml洗脱液试管中，振打80次。7.4.3.3经适当稀释后，取1ml洗脱液，作平板倾注，每个染菌玻片接种两个，细菌放30～35℃培养48小时作活菌计数，真菌放23～28℃培养72小时作活菌计数。7.4.3.4阳性对照，除不做照射处理外，取4个染菌玻片，分别投入4个盛有5ml洗脱液试管中，振打80次。余按7.4.2.3同样操作。7.4.3.5计算杀灭率阳性对照回收菌数－试验组回收菌数杀灭率（％）＝×100％阳性对照回收菌数7.4.3.6判定标准对指示菌杀灭率≥99.9％判为消毒合格。8、验证结果记录：附件1.试验菌数量测定原始记录8、再验证周期传递窗构造或紫外灯管放置位置发生改变时。第7页共7页9、相关SOP文件编号文件名称CK/ZY-059紫外灯、照明灯管理制度CK/ZY-012物料进入控制区程序和清洁管理规定CK/ZY-049实验室操作制度CK/ZY-068初始污染验证方案020343培养基的配制020344细菌的接种、传代和保存10、文档所有的相关文档都应该保留至少5年，这些文档应包括如下内容：原始方案、修改后的方案（如果有的话）、偏差报告、原始数据、原始报告和最终报告、其中，报告应该包括以下内容：记录的原件（或复印件）、测试项目及条款、实验开始和结束的日期、材料和方法描述、出现的偏差描述（如果有的话）、实验结果。