药物分析第十二章-喹啉与青蒿素类抗疟药物的分析

复习：吩噻嗪类药物的分析基本结构基本性质鉴别硫氮杂蒽母核10-碱性侧链2-卤素碱性;易氧化;与金属离子络合；紫外吸收生物碱沉淀剂氧化与鈀离子络合卤素取代基氯化物SNRR'12345678910含量测定酸碱滴定法UV鈀离子比色法HPLC第十二章喹啉与青蒿素类抗疟药物的分析NH3CONHCHHOHCH2·H2SO4·2H2OH第一节喹啉类药物的分析一、基本结构与主要化学性质1.结构：本类药物均有吡啶与苯稠合而成的喹啉杂环硫酸奎宁难溶于水2二盐酸奎宁—易溶于水NH3CONHHCHHOHCH2·2HClNNH3COHHHCH=CH2,H2SO4,2H2OHOHO,H2SO4,2H2OCH=CH2HHHH3CONN22硫酸奎宁硫酸奎尼丁奎宁和奎尼丁的分子式相同，但立体结构不同，因此旋光性、碱性、溶解度也不同。NNH3COHHHCH=CH2,H2SO4,2H2OHOHO,H2SO4,2H2OCH=CH2HHHH3CONN22NNNNNNClCl·4H3PO4·4H2O磷酸哌喹NHNCH3NCH3CH3Cl·2H3PO4磷酸氯喹2.主要化学性质（1）碱性奎宁碱性：脂环氮(pKa8.8)喹啉环系芳香氮(pKa4.2，不能与硫酸成盐)（2）旋光性硫酸奎宁（左旋体）硫酸奎尼丁（右旋体）二盐酸奎宁（左旋体）（3）紫外吸收光谱喹啉环（4）荧光特性硫酸奎宁和二盐酸奎宁在稀硫酸中显蓝色荧光二、鉴别试验（一）绿奎宁反应奎宁为6位含氧喹啉衍生物，可以发生绿奎宁反应。6－含氧喹啉＋氯水＋氨水二醌基亚胺的铵盐ChP采用此法鉴别硫酸奎宁和二盐酸奎宁（溴水）NNNNNHOHOCl2ClClCl2NH3ONH4OClN二醌亚胺盐绿/翠绿色产物CH3O—（二）光谱特征1.紫外吸收光谱磷酸氯喹盐酸溶液（0.01mol/L）λmax：222nm、257nm、329nm、343nm2.荧光光谱特征硫酸奎宁和二盐酸奎宁在稀硫酸中显蓝色荧光3.红外吸收光谱特征（三）无机酸盐SO42-+Ba2-BaSO4↓Cl-+Ag-AgCl↓硫酸奎宁三、有关物质检查（一）硫酸奎宁中有关物质检查1.酸度控制药物中的酸性杂质用pH计测定,pH为5.7～6.6。2.氯仿－乙醇中的不溶物控制药物在制备过程中引入的醇中不溶性杂质或无机盐类3.其他金鸡钠碱控制其他的生物碱TLC（ChP）：主成分自身对照法HPLC（BP）：峰面积归一化法（二）磷酸咯萘啶中有关物质的检查1.酸度2.水中不溶物3.氯化物：生产工艺带入4.甲醛5.四氢吡咯四、含量测定（一）硫酸奎宁•非水滴定法测定硫酸奎宁的含量（ChP、USP）•HPLC测定硫酸奎宁片的含量（USP）a.硫酸奎宁奎宁为二元碱，其中喹核氮的碱性较强，可与硫酸生成盐；而喹啉环的碱性极弱，不能与硫酸成盐，而保持游离状态。硫酸是二元酸，但在非水介质中，只显示一元酸解离为HSO4-，即只供给一个H+，所以硫酸盐类药物在冰醋酸中，只能滴定至硫酸氢盐，因此可以用高氯酸滴定液直接滴定。反应的摩尔比？SO42-H+H+H+H+HSO4-H+H+H+H+ClO4-ClO4-ClO4-+3HClO4牢记：lmol的硫酸奎宁消耗3mol的高氯酸(C20H24N2O2·H+)2SO4+3HClO4→(C20H24N2O2·2H+)·2ClO4-+(C20H24N2O2·2H+)·HSO4-·ClO4-ChP和USP都采用此法测定硫酸奎宁的含量。b.硫酸奎宁片硫酸奎宁片剂碱化处理，生成奎宁游离碱，然后再用高氯酸标准溶液直接滴定。ClO4-ClO4-ClO4-ClO4-H+H+H+H+2分子游离奎宁1mol硫酸奎宁生成2mol奎宁1mol奎宁消耗2mol高氯酸1mol的硫酸奎宁消耗4mol的高氯酸片剂分析的滴定度与原料药分析的滴定度不同。五、体内药物分析-自学HPLC法测定人体血液中的氯喹P322重点内容基本结构基本性质鉴别喹啉环碱性侧链碱性;荧光特性旋光性；共轭绿奎宁反应紫外荧光无机酸盐含量测定酸碱滴定1:31:4NH3CONHCHHOHCH2·H2SO4·2H2OH第二节青蒿素类药物的分析2011年9月，中国女药学家屠呦呦因创制新型抗疟药-青蒿素和双氢青蒿素的贡献，获得被誉为诺贝尔奖“风向标”的拉斯克奖。这是中国生物医学界迄今为止获得的世界级最高级大奖。含过氧基团的新型倍半萜内酯一、结构与理化性质1.结构青蒿素双氢青蒿素青蒿琥酯蒿甲醚2.化学性质（1）氧化性（2）旋光性（3）水解性（4）UV：末端吸收青蒿素二、鉴别试验（一）呈色反应1.过氧桥的氧化反应（KI-淀粉）2.羟肟酸铁反应-内酯3.香草醛-硫酸反应：萜类（1)取本品约5mg,加无水乙醇0.5ml溶解后,加碘化钾试液0.4ml，稀硫酸2.5ml与淀粉指示液4滴，立即显紫色。(2)取本品约5mg,加无水乙醇0.5ml溶解后，加盐酸羟胺试液0.5ml与氢氧化钠试液0.25ml,置水浴中微沸，放冷后，加盐酸2滴和三氯化铁试液1滴，立即显深紫红色。取本品约50mg，加三氯甲烷lml使溶解，取3~4滴置白瓷板上，待三氯甲烷挥发后，加2%香草醛硫酸溶液1滴，显红色。青蒿素青蒿琥酯（二）光谱法IR（三）色谱法TLCHPLC：210nm三、杂质检查青蒿素有关物质检查（TLC，ChP2010）取出，晾干，喷以含2%香草醛的20%硫酸乙醇溶液，在85℃加热10～20分钟至斑点清晰，要求：•对照品溶液应显青蒿素与双氢青蒿素各自的清晰斑点。•供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液（1）主斑点比较，不得更深；与对照溶液（2）的主斑点比较，深于对照溶液（2）主斑点的斑点不得多于1个。四、含量测定双氢青蒿素片的含量测定—分解后的UV法测定法精密量取对照品溶液与供试品溶液各1ml，分别置10ml量瓶中，各精密加入乙醇1ml，摇匀，加2%氢氧化钠溶液至刻度，摇匀，置60℃恒温水浴中反应30分钟，取出冷至室温，以2%氢氧化钠溶液-乙醇（4:1）为空白，照分光光度法（附录ⅣA），在238nm的波长处分别测定吸收度，计算，即得。分解后的紫外吸收图谱HPLC法测定青蒿琥酯的含量用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾1.36g，加水1000ml使溶解，用磷酸调pH值至3.0（42:58)为流动相；柱温30℃；检测波长为210nm。取双氢青蒿素对照品4mg，置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，作为双氢青蒿素对照品溶液；另取本品40mg，置10ml量瓶中，加双氢青蒿素对照品溶液lml,加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，取40μ1注人液相色谱仪，双氢青蒿素呈现两个色谱峰，青蒿琥酯峰与相邻的双氢青蒿素峰的分离度应符合要求。测定法取本品约25mg,精密称定，置25ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取20μ1，注人液相色谱仪，记录色谱图。另取青蒿琥酯对照品同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。重点内容基本结构基本性质鉴别倍半萜过氧桥内酯氧化性;易水解旋光性；无共轭碘化钾-淀粉羟肟酸铁反应香草醛-硫酸含量测定水解后UV法HPLCOOH3COOHCH3HHOCH3习题用溶剂提取后非水溶液滴定法测定硫酸奎宁片的含量时，Imol的硫酸奎宁可消耗高氯酸的摩尔数是A.l/2molB.1molC.2molD.3molE.4mol答案：[E]非水溶液滴定法测定硫酸奎宁原料药的含量时，Imol的硫酸奎宁可消耗高氯酸的摩尔数是A.1/2molB.1molC.2molD.3molE.4mol答案：[D]具有绿奎宁反应的药物是A．硫酸奎宁B．盐酸吗啡C．磷酸可待因D．盐酸麻黄碱E．硫酸阿托品答案：[A]青蒿素采用的鉴别方法是A．碘化钾试液·淀粉反应B．硫酸乙醇反应C．UVD．茚三酮反应E．以上均不是•能在稀硫酸溶液中显蓝色荧光的喹啉类的药物有A．硫酸奎宁B．磷酸氯喹C．磷酸哌喹D．磷酸咯萘啶E．二盐酸奎宁答案：[AE]答案：A硫酸奎宁的检查项目有A．其他金鸡纳碱B．三氯甲烷一乙醇中不溶物C．乙醇中不溶物D．酸度E．酸中不溶物答案：[ABD]喹啉类药物的主要理化性质有A．弱碱性B．不能与硫酸成盐C．旋光性D．弱酸性E．紫外吸收特性答案：[ACE]青蒿素类药物共有的化学性质有A．氧化性B．还原性C．能发生水解D．母核中有共轭体系E．旋光性答案：[AE]