lipofectamine3000-说明书

lipofectamine3000protocol中文版1.接种细胞至70-90%汇合度时转染2.使用Opti-MEM培养基稀释Lipofectamine®3000试剂(2管)，充分混匀3.使用Opti-MEM培养基稀释DNA，制备DNA预混液，然后添加P3000™试剂，充分混匀。4.在每管已稀释的Lipofectamine®3000试剂中加入稀释的DNA(1:1比例)。5.室温孵育5分钟。6.加入DNA-脂质体复合物至细胞中。7.37℃孵育细胞2-4天。然后分析转染细胞。siRNA转染转染siRNA至细胞中时，遵循如上所述的DNA实验方案，但在稀释siRNA时不要加入P3000™试剂(第3步)。表1：使用lipofectamine®3000转染DNA产品参考用量细胞培养容器96-well24-well6-well贴壁细胞1–4×1040.5–2×1050.25–1×106Opti-MEM培养基稀释Lipofectamine®3000试剂（2管）Opti-MEM培养基5μL×225μL×2125μL×2Lipofectamine®30000.15和0.3μL0.75和1.5μL3.75和7.5μLOpti-MEM培养基稀释DNA，制备DNA预混液，然后添加P3000™试剂，充分混匀Opti-MEM培养基10μL50μL250μLDNA(0.5–5μg/μL)0.2μg1μg5μgP3000™试剂(2μL/μgDNA)0.4μL2μL10μLLipofectamine®3000试剂中加入稀释的DNA(1:1比例)稀释的DNA5μL25μL125μL稀释的Lipofectamine®30005μL25μL125μL室温孵育5分钟加入DNA-脂质体复合物至细胞中96-well24-well6-wellDNA-脂质体复合物10μL50μL250μL37°C孵育细胞2–4天。然后分析转染细胞。