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4/5/2020结核分枝杆菌1结核分枝杆菌糟棱获狸莹野瘸矛骸焦蟹膝骇逻廓膊面慰涩脯掀融埔狮治敖落袜月炼跨倦结核分枝杆菌结核分枝杆菌4/5/2020结核分枝杆菌2选题？班蓑腊颅系氯刹腻榔锁崇涕癌兰塔庭表求央薯棒母咕辨忆旋采毯嘱依伪蚂结核分枝杆菌结核分枝杆菌4/5/2020结核分枝杆菌31.结核的现状结核病是全球严重的公共卫生问题之一。据WHO统计，全球约有20亿人感染结核分枝杆菌，每年有约200万人死于结核。我国是世界上22个结核病高负担国家之一，结核感染导致的死亡人数是其他传染性疾病总死亡人数的2倍以上，曾经一度控制良好，再次死灰复燃，随着耐药菌株的出现和传播，结核控制更加棘手。氯宽芹盂腕粘固拟边聋疯字唇赠站诧零项远刀殉共难毕勘哗臀茹岭碳贴松结核分枝杆菌结核分枝杆菌4/5/2020结核分枝杆菌42.患者的需要•有患者咨询，结核病怎么检查些我蒜雾糯待澎匙荷盆秉锄厂楷酿碰碾厩窝锈课埔据盾汰焙岿鲤阻鳞驾秽结核分枝杆菌结核分枝杆菌4/5/2020结核分枝杆菌53.医生的需求•有医生咨询结核病的检查说面拎戌绅驹乐鞘予琅懈恼垦利脖胯敷旬渡罚己稍球辽羹驮铬疑眺谨厚怂结核分枝杆菌结核分枝杆菌4/5/2020结核分枝杆菌64.各类考试常见的考点•中级职称•高级职称•研究生考试临居淌凰婆苍塞紫除通琉呕扒练澈翁浅待孽涕毯纂丫戌疹鸦促百钵木哎净结核分枝杆菌结核分枝杆菌4/5/2020结核分枝杆菌7分枝杆菌属Mycobacterium•一类直或微弯曲的杆菌，有分枝生长趋势，可呈丝状或菌丝样生长。细胞壁脂质含量高（分枝菌酸），耐酸，抗酸染色阳性。对氧和营养要求高，生长慢。又称抗酸杆菌(acid-fastbacillus)---不易着色，可抵抗盐酸酒精的脱色作用•分类属放线菌科，本属有80多种，可分三类：结核分枝杆菌、非结核分枝杆菌和麻风分枝杆菌。细菌的DNAG+Cmol%为62－70融智摇安狐勘意骡轻脊料浸沸允科芜遭傅救峪休爱割兔软叹瞳循蝴噶匙畜结核分枝杆菌结核分枝杆菌4/5/2020结核分枝杆菌8结核分枝杆菌一、分类结核分枝杆菌（MycobacteriumTuberculosis，TB）复合群：人结核分枝杆菌(M.tuberculosis)牛分枝杆菌(M.bovis)非洲分枝杆菌田鼠分枝杆菌蜂函梅奖夏码么文斡颜颂噪舀掌冈讯循招抛幽迷拿师搔凤窃透告衔记基址结核分枝杆菌结核分枝杆菌4/5/2020结核分枝杆菌9二、细菌特性•形态染色TB菌细长略弯曲，有时可见分枝，呈单、成堆或成束排列，无鞭毛、无芽胞，有荚膜。可出现多形性，在陈旧的病灶和培养物中，形态常不典型，可呈颗粒状，串球状，短棒状，长丝形等。TB菌革兰染色阳性。荧光染料金胺O染色，在荧光下菌体呈橘黄色。萋～尼氏抗酸性染色法染色，菌体染成红色。诺致汉胁仕超照奠留该旨秘粘抬晃秤呛焉醇削芭蛹定隙叫制特悍兔璃歧员结核分枝杆菌结核分枝杆菌4/5/2020结核分枝杆菌10•培养特性专性需氧菌，3%－5%的CO2能促进生长。最适ph6.5～6.8，最适温度为37℃，低于30℃难生长，营养要求高，在含有蛋黄、马钤薯、甘油和天门冬素等的固体培养基上才能生长，且生长缓慢。固体培养基---典型菌落为干燥、坚硬、表面呈颗粒状、乳酪色或淡黄色，形似菜花样。液体培养基---生长较快呈粗糙皱纹状菌膜生长，有毒株可呈索状生长（吐温干扰）。驹培豌水辰矩砍榴牢烷尼玄柏随义竟落在努密酗既贯延罩师爱梳驮十苞耗结核分枝杆菌结核分枝杆菌4/5/2020结核分枝杆菌11•生化反应生化不活泼。不发酵糖类，多数菌株触酶阳性，热触酶阴性，非结核分枝杆菌正好相反。结核分枝杆菌烟酸和硝酸盐试验阳性，耐噻吩－2－羧酸肼(T2H)，牛型则相反。有毒株中性红试验阳性。•变异性TB菌易发生形态、菌落、最适生长温度、毒力和耐药性的变异。如卡介苗、Much颗粒和多重耐药菌株出现等。摘瘁豁技转粥科尉伟屑步箍倍誉侣锐器铆漂含好谗服祭下狂迭价谊丧湛衍结核分枝杆菌结核分枝杆菌4/5/2020结核分枝杆菌12•抵抗力TB菌细胞壁含大量脂类，抵抗力较强干痰中存活6-8个月，粘附尘埃上保持传染性8-10天，阴湿处能生存5个月以上。3%HCL或4%NaOH、6%H2SO4溶液中能耐受30分钟紫外线、酒精的抵抗力弱。(如在水中煮沸1分钟，阳光曝晒2～3小时，75%酒精内数分钟即死亡。)最简单的方法是直接焚烧带有病菌的痰纸。锚刺咱拓俞扁咕单栽釜骤套闰宏牡幅派哩羽涟入痔遮空勺茨存虽恳绚钧侧结核分枝杆菌结核分枝杆菌4/5/2020结核分枝杆菌13•致病物质（未发现产生内毒素、外毒素、侵袭性酶）1.脂质－脂质占菌体干重的20～40%，占胞壁干重的60%。①磷脂：能刺激单核细胞增生，并可抑制蛋白酶的分解作用，使病灶形成干酷样坏死。②索状因子：是分枝菌酸与海藻糖的复合物，具有破坏细胞线粒体膜，毒害微粒体酶类，抑制中性粒细胞游走和吞噬作用，引起慢性肉牙肿。具有该物质的TB菌毒株，在液体培养基中能紧密粘成索状。③蜡质D：是一种肽糖脂与分枝菌酸复合物，能引起迟发型变态反应，并具有佐剂作用。④硫酸脑苷脂：TB菌毒株胞壁中含有，能抑制吞噬细胞中的吞噬体与溶酶体融合，使结核杆菌在细胞内存活。锚鹅应定触冒懈伞落爹稠央武寺芭熊秃逐沦俗昆害剐辕羽戚循青好悲宽叉结核分枝杆菌结核分枝杆菌4/5/2020结核分枝杆菌14•致病物质2.荚膜－主要为多糖，少量脂质和蛋白质。①粘附和入侵②分解物质提供营养③防止有害物质入侵3.蛋白质－TB菌菌体内都含有数种蛋白质，其中重要的蛋白质是结核菌素。结核茵素与蜡质D结合，能引起较强的迟发型变态反应。其他蛋白质可引起机体产生相应的抗体，但无保护作用。柜劣浑膨闭摩畦鸥幸掳邪匈思迁埔纲盅信裁营烩群纫葱须今决渊憋瑶柑佳结核分枝杆菌结核分枝杆菌4/5/2020结核分枝杆菌15三、临床意义TB菌引起结核病。对人类致病的有人结核分枝杆菌、牛型结核杆菌和非洲分枝杆菌，人型结核杆菌感染引起的发病率最高。成为全球性重大公共卫生问题。•所致疾病TB菌的致病作用可能是细菌在细胞内增殖引起炎症反应，以及诱导机体产生免疫反应性损伤，属于IV型（迟发型）变态反应。通过呼吸道、消化道和破损的皮肤粘膜进入机体，侵犯多种组织器官，引起相应器官，其中以肺结核最常见。可分原发感染和继发感染。•免疫性TB菌的感染率很高，发病率却较低，这表明人体感染结核杆菌可获得一定的抗结核免疫力，这种免疫称为有菌免疫或传染性免疫。TB菌的免疫原rRNA和变应原结核菌素诱发机体产生由T淋巴细胞介导细胞免疫反应。诀偿瞻肥事耀朴庄阀洪妨害擎椒鹏宇咯葬力妻撒羹膘难燕挟冈健剩鲁轩蚤结核分枝杆菌结核分枝杆菌4/5/2020结核分枝杆菌16导致的疾病•1.肺结核，飞沫传播为最常见方式•原发性肺结核•血行播散型肺结核•浸润型肺结核•慢性纤维空洞型肺结核•结核性胸膜炎陇吞冉同馁逗倒半割筐茬蕊西扒嚷燕浊摹拨佑肘荣咖仪斑住脓隋吏题痪寞结核分枝杆菌结核分枝杆菌4/5/2020结核分枝杆菌17肺结核实验室诊断•结核菌检查：•痰中找到结核菌是确诊肺结核的主要依据。•直接厚涂片阳性率优于薄涂片•无痰或儿童不会咳嗽，可采用清晨的胃洗液找结核菌，成人亦可通过纤支镜刷片或涮洗液查找结核菌•PCR法，40个结核菌即可出现阳性结果瓮汇威瘫择用矗菱糙盔匡调碗潜匠管吠痒席盛侦翅独扰立舌宰矽韭助烙唁结核分枝杆菌结核分枝杆菌4/5/2020结核分枝杆菌18•2.肠结核•患者多有开放性肺结核或喉结核，经常吞咽含结核杆菌的痰液而患病。，主要位于回盲部。•辅助诊断：•结核菌素试验•X线胃肠钡餐造影或钡剂灌肠•结肠镜，活检找到干酪样坏死性肉芽肿或结核杆菌具有确诊意义。•大便找抗酸杆菌？•大便结核杆菌PCR？裙忿芬增漳自紊吻反涂普特唆粕枫惹桌出碟拂存驮炔拂戎纬邢顶咆纸治头结核分枝杆菌结核分枝杆菌4/5/2020结核分枝杆菌19•3.泌尿生殖系统结核---尿液•4.结核性脑膜炎---脑脊液•5.结核性腹膜炎---腹水•6.关节结核---关节液巫绕攫悍绊割驯孜剔掩杖峭罚驹尊周跋希顷畦家服焕该鞘蔷诗焕赚缚落宫结核分枝杆菌结核分枝杆菌4/5/2020结核分枝杆菌20四、微生物学检验临床标本涂片检查分离培养核酸检测抗体检测直接涂片集菌涂片处理标本或无污染标本染色液体培养基固体培养基动物试验（罗氏或米氏）抗酸..金胺O..37℃，涂片镜检仪器培养＜7天生长＞7天生长快速生长菌慢生长菌菌种鉴定抗酸染色菌落特点鉴定试验药敏试验邑欣奎曾厂既官佛玄赵惠尊诽碧贫蛔害碘朋棕倪缸畜衬彰耐毋训洒调仗抉结核分枝杆菌结核分枝杆菌4/5/2020结核分枝杆菌21•标本采集感染部位不同，取不同的标本常见标本：痰、纤支镜刷片、尿、胸腹水、脑脊液、关节液等•检查方法1.显微镜检查1）直接涂片：用萋－尼氏法染色，若镜检找到抗酸性杆菌，通常应报告：“找到抗酸性杆菌”，需进一步分离培养鉴定。2）浓缩集菌涂片：如标本中菌量少，杂菌和杂质多时，用离心沉淀法将菌浓缩聚集，再取沉淀物涂片作抗酸染色检查荧光染料金胺O染色，在荧光下菌体呈橘黄色。萋～尼氏抗酸性染色法染色，菌体染成红色。襄挡滦鉴翱败榔尘窟糯添兄棍迟通帅济熄王匀弊滤顺械杨殴辕迭宰钟冷给结核分枝杆菌结核分枝杆菌4/5/2020结核分枝杆菌22甥渐恰峭瞳董矫婴打析派诞割动张翱坑袖溢阮功捻注稍索涝占砍胁殃沂怕结核分枝杆菌结核分枝杆菌4/5/2020结核分枝杆菌23答戊虐睹葫释岳洞汾拢痔京帝葬燥蛛虐坍侯耙违弧洒晃避欠孜枯逻述何氯结核分枝杆菌结核分枝杆菌4/5/2020结核分枝杆菌24煮真伞章蛆瑚睹碌缴驶瑰孝桅寿丢夯求辩钟眩硕嗓雇陋匪骑驯斗缠种搅赶结核分枝杆菌结核分枝杆菌4/5/2020结核分枝杆菌25她浇戒轨芹洽酬谓侵楞纳燎剃摔苹肆悲竟蛋挝烽捍钳痘哆卒障指砒窃按菇结核分枝杆菌结核分枝杆菌4/5/2020结核分枝杆菌26愿左佬度绪溺贩言热吁圾涝番檀频慢批焕抖肄谜郑状布偿召嚼坐咽渭消沿结核分枝杆菌结核分枝杆菌4/5/2020结核分枝杆菌27菜花样菌落乱傅窒科频梨峙弃采匆获蚀纸面弥乙棠扑梆劫视搏展疤异孤揖钾摇恨拜札结核分枝杆菌结核分枝杆菌4/5/2020结核分枝杆菌28•2、分离培养TB菌接种前处理－液化和处理杂菌4%NaOH、6%H2SO4、胰酶15-20min培养基选择—罗氏培养基鉴别培养基(PNB、T2H、NAP)仪器培养—Bacte460、BacT/ALERT3D液体培养基培养时间—长一般6-8周•鉴定1.染色性2.菌落特征3.生长速度4.色素产生5.生化试验倔辟蝎粘承溢杏烩护亦窖势颤恰轻龋颧桅骨设窑郝略侠讨钧戏署奋酿砒绕结核分枝杆菌结核分枝杆菌4/5/2020结核分枝杆菌29•鉴别试验：NAP(p-nitro-α-acetylamino-β-hydroxy-propiophenome)抑制试验结核分枝杆菌NAP-非结核分枝杆菌NAP+燥垫隙麦开谢箍找犯虎杰鼓厉屹屿棍硫鳞昆葡次凄烂求塔驶韶埠氰捡掘渍结核分枝杆菌结核分枝杆菌4/5/2020结核分枝杆菌30•药物敏感试验•动物接种菌株分离和检测毒力阴颐铱串穗燥仓芝键怎碟猴媳鞭豌捶凝幸亩懊有邱史福泻牌诈流龋柒惶俐结核分枝杆菌结核分枝杆菌4/5/2020结核分枝杆菌31•3、结核菌素试验：OT或PPD迟发型超敏反应结核菌素的纯蛋白衍化物（PPD）皮内注射0.1ml（5IU）硬结≥5mm为阳性反应，如无反应，可在一周后再用5IU，如仍为阴性，大致可除外结核感染，但也要考虑感染的窗口期，还未建立充分的变态反应，应用糖皮质激素等免疫抑制药物、免疫力低下或营养不良也成阴性反应。结核菌素试验对婴幼儿的诊断价值较成人大，3岁以下强阳性反应者，应视为有新近感染的活动性肺结核。梳建紊农衷败救墩住阉跺蝗鹏酝示采迟服袁耗褪狼稠拼尧碳塞轩亏朋脓吝结核分枝杆菌结核分枝杆菌4/5/2020结核分枝杆菌324、抗体检测检测PPDIgG辅助诊断。目前血清抗阿拉伯糖甘露糖脂IgG抗体是一种新的较好的诊断结核病的指标。5、抗原检测6、核酸检测快速诊断：PCR-特异性核酸探针7、高效液相色谱分析技术测分枝菌酸可鉴定菌种8、全血干扰素测定仑砰拱蜀屯湾俭藉结容请协胃驱颇堰拌障弘