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选修1生物技术实践填空第1页共11页选修1生物技术实践☆果酒和果醋和制作广义发酵→有氧发酵和无氧发酵；狭义发酵→微生物的无氧呼吸。发酵≠无氧呼吸（一）果酒制作1．原理：菌种，属于核生物，新陈代谢类型，生殖，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖。呼吸的反应式为：；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。呼吸的反应式为：。2．条件：繁殖最适温度，酒精发酵一般控制在。3．菌种来源：。：。：菌菌种分离获得得纯净的酵母人工培养型酵母菌附着于葡萄皮上的野生自然发酵4．实验设计流程图挑选葡萄冲洗____________________________________________果酒果醋5．实验结果分析与评价：可通过嗅觉和品尝初步鉴定，并用______________检验酒精存在。可观察到的现象为6.葡萄酒呈红色：（二）果醋的制作：1．原理：菌种：______________，属于______________核生物，新陈代谢类型为_________生殖,当、都充足时，醋酸菌将分解成醋酸；当缺少时，醋酸菌将变为，再将变为醋酸。反应式：____________________________。2．条件：最适合温度为__________，需要充足的______________。3．菌种来源：可以从食醋中分离醋酸菌，也可以购买。4．设计实验流程及操作步骤：果酒制成以后，在发酵液中加入______________或醋曲，然后将装置转移至______________0C条件下发酵，适时向发酵液中______________。如果没有充气装置，可以将瓶盖打开，在瓶盖上纱布，以减少空气中尘土污染。8．利用微生物发酵制作果酒，该过程利用的微生物是______________，其代谢类型是______________，与生产实际相关的反应式是__________________________________________,在不灭菌的情况下，如何使酵母菌成为优势菌种?________________________________________________________9．酵母菌是自然界中常见的一类真菌．(1)从细胞核的结构看，酵母菌属于______________．(2)酵母菌常进行______________生殖，在基因工程中，也常用酵母菌作为转入基因的受体细胞，是因为酵母菌繁殖快，遗传物质相对少。(3)在自然环境中，酵母菌属于生态系统中的______________成分．(4)酵母菌体内遗传物质主要在______________上，而醋酸菌的遗传物质主要在_____________上．（5）传统发酵技术所使用的酵母菌的来源是：________________________________________10.选择新鲜葡萄先冲洗后去枝梗防止杂菌感染，注意不要反复冲洗，否则酵母菌数量减少，影响发酵。发酵液装瓶后保留1/3的空间。装置各部件作用①出料口：___________；②___________：醋酸发酵选修1生物技术实践填空第2页共11页时连接充气泵；③___________：排出酒精发酵时产生的CO2。④排气口连接一个长而弯曲的胶管作用___________。使用该装置制酒时，应该______充气口；制醋时，应该充气口连接____________。11.控制发酵条件的作用①醋酸菌对_________的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通入氧气，也会引起醋酸菌死亡。②醋酸菌最适生长温度为_________℃，控制好发酵温度，使发酵时间缩短，又减少杂菌污染的机会。③有两条途径生成醋酸：直接氧化和以酒精为底物的氧化。（1）你认为应该先冲洗葡萄还是先除去枝梗？为什么？（2）你认为应该从哪些方面防止发酵液被污染？（3）制葡萄酒时，为什么要将温度控制在18～25℃？制葡萄醋时，为什么要将温度控制在30～35℃？微生物的实验室培养1、培养基：人们按照微生物对_______的不同需求，配制出供其生长繁殖的营_______，是进行微生物培养的物质基础。2、培养基按照物理性质可分为_______培养基、_______培养基和_______培养基。在液体培养基中加入凝固剂_______后，制成琼脂固体培养基。微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的_______。液体培养基应用于工业或生活生产，固体培养基应用于微生物的分离和鉴定，半固体培养基则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等。3、按照成分培养基可分为合成培养基和天然培养基。4、按照培养基的用途，可将培养基分为_______和_______。选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物的生长。鉴别培养基是根据微生物的特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同类别的微生物。5、培养基的化学成分包括_______、_______、_______、_______等。碳源：能为微生物的代谢提供碳元素的物质。如CO2、NaHCO3等无机碳源；糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。异养微生物只能利用_______。单质碳不能作为碳源。氮源：能为微生物的代谢提供氮元素的物质。如N2、NH3、NO3-、NH4+（无机氮源）蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等。只有_______微生物才能利用N2。培养基还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加_______，培养_______时须将培养基的pH调至酸性，培养_______是需要将pH调至中性或微碱性，培养厌氧型微生物是则需要提供_______的条件6、无菌技术：获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，要注意以下几个方面：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和_______。②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行_______。③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在_______附近进行。④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。7、消毒与灭菌的区别消毒指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。消毒方法常用煮沸消毒法，巴氏消毒法（对于一些不耐高温的液体）还有化学药剂（如酒精、氯气、石炭酸等）消毒、紫外线消毒。灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。灭菌方法：①接种环、接种针、试管口等使用_______法；②玻璃器皿、金属用具等使用_______法，所用器械是_______；③培养基、无菌水等使用______________法，所用器械是_____________。④表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯。8、培养基分装前要_______，培养基_______后，需要冷却到50℃左右时（用手触摸刚刚不烫手时），才能用来倒平板。选修1生物技术实践填空第3页共11页9、平板冷凝后，要将平板_______置，目的是_____________________________________________________________________________10、微生物接种的方法最常用的是______________法和______________法。用平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的是：使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落，以便于纯化菌种。11、灼烧接种环的目的是：操作的第一步灼烧接种环是为了____________________________；每次划线前灼烧接种环是为了____________________________，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于____________________________。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，____________________________12、在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线，____________________________。13、菌种的保存对于频繁使用的菌种，可以采用__________的方法。将菌种接种到试管的__________培养基上，在合适的温度下培养。当菌落长成后，将试管放入4℃的冰箱中保藏。以后每3～6个月，都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上。缺点：这种方法保存的时间不长，菌种容易被__________或产生__________。对于需要长期保存的菌种，可以采用__________的方法。放在－20℃的冷冻箱中保存。14、确定培养基制作是否合格的方法将__________的培养基在__________中保温1～2天，无__________，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。五、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1、实验室中微生物的筛选应用的原理人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH），同时抑制或阻止其他微生物生长。2、选择培养基在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。4、统计菌落数目（1）测定微生物数量的常用方法有__________法和__________直接计数。（2）稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理一般设置3～5个平板，选择菌落数在__________的平板进行计数，并取__________。统计的菌落数往往比活菌的实际数目__________，因此，统计结果一般用菌落数而不是活菌数来表示。5、从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数统计某一稀释度下平板上的菌落数，最好能统计3个平板，计算出平板菌落数的平均值每克样品中的菌落数=（C/V）*M其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（ml），M代表稀释倍数☆课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数一、理论基础1．筛选菌株(1)实验室中微生物筛选的原理：人为提供有利于生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时或其他微生物生长。(2)选择培养基：在微生物学中，将允许种类的微生物生长，同时和其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。（3）配制选择培养基的依据根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的。例如，培养基中不加入有机物可以选择培养微生物；培养基中不加入氮元素，可以选择培养；的微生物.加入高浓度的食盐可选择培养金黄色葡萄球菌等。[来源:学科网ZXXK]2．统计菌落数目（1）测定微生物数量的常用方法有和。选修1生物技术实践填空第4页共11页（2）稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理当样品的足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在的平板进行计数。此外，测定微生物数量的常用方法还有直接计数。3．设置对照设置对照的主要目的是排除实验组中对实验结果的影响，提高实验结果的。例如为了排除培养基是否被杂菌污染了，需以培养的培养基作为空白对照。一、研究思路（一）筛选菌株1．实验室中微生物的筛选主要是指人为提供有利于目的菌株生长的，同时抑制或阻止其他微生物的生长。2．分解尿素的细菌主要有，，。3．选择培养基是指。加入可以分离出，。加入可以分离出。（二）统计菌落数目4．统计菌落数目的方法主要有，，。5．统计菌落数目的理论依据是当样品度足够高时，。6．为保证统计结果准确，通常将涂布在平板上，培养后再选择的平板进行计数。7．在设计实验时，一定要涂布至少个平板作为重复组，才能增强实验的说服力和准确性。（三）设置对照[来源:学科网]8．设置对照的主要目的是，。9．土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的研究思路是，。二、实验设计关于土壤中某样品细菌的分离与计数实验操作步骤如下：1．取样：从肥沃、湿润的土壤中取样。应先3cm左右，再取样，将样品装