i2000SR-HBsAg

AbbottDiagnosticDivision美国雅培诊断产品中国部1雅培标准操作检测程序ARCHITECTi2000SR项目：乙肝表面抗原（HBsAg）方法：化学发光微粒子免疫分析试剂目录号：6C36试剂包装量：100X4,500X4本标准操作检测程序为用户实验室的认可、评审、以及其他行政管理要求，提供所有产品使用的性能标准资料。本性能特性表可以复制。AAbbbboottttLLaabboorraattoorriieessAbbottDiagnosticDivision美国雅培诊断产品中国部21．实验原理和检验目的Architecti2000SRHBsAg是采用化学发光微粒子免疫分析（ChemiluminesentMicroparticleImmunoAssay,CMIA）技术，双抗体夹心两步法对待测样品中的乙肝表面抗原进行定量检测HBsAg定量检测常用来协助对乙肝感染患者的诊断及对感染情况的监测。2．样品准备血清和血浆：血清（包括SST管），血浆（EDTA-K2、肝素锂、肝素钠、枸橼酸钠、ACD、APCD-1、CP2D、CPD、草酸钾），使用玻璃管或塑料管分离样本，无黄疸、无溶血、无脂血，已分离出的样本应立即分析。稳定性：2－8℃可稳定14天，如需存放大于14天时，请于－20℃或更低的温度下保存。3．试剂及标准品3.1.1ARCHITECTHBsAg试剂盒（6C36）MICROPARTICLES磁性微粒鼠单克隆乙肝表面抗体（IgG,IgM）包被的磁性微粒子CONJUQATE结合物吖啶酯标记的山羊单克隆乙肝表面抗体（IgG）3.1.2ARCHITECTHBsAg手工稀释液LISTNO.:6C36-40（需另行配置）MANUALDILUENT手工稀释液3.1.3其他试剂：激发液、预激发液、清洗缓冲液（需另行配置）3.2校准品：名称:美国雅培i2000SRHBsAg校准品LISTNO.:3M61-01规格：CAL1：0.5IU/ML1LX4mlCAL2：250IU/ML1LX4ml3.3质控品名称：美国雅培i2000SRHBsAg质控品LISTNO：6C36-10AbbottDiagnosticDivision美国雅培诊断产品中国部3水平颜色浓度范围体积阴性－自然色0.00IU/ML0.00~0.04IU/ML8ml阳性1蓝色0.25IU/ML0.16~0.34IU/ML8ml阳性2红色175.00IU/ML113.75~236.25IU/ML8ml4．校准校准后的稳定期30天，每次更换批次时都应进行校准。按照您的实验室所建立的质控要求，使用至少三个水平的质控品进行校准曲线验证。如果质控结果不在可接受范围值内，则需要进行重新校准。有关如何对检测进行校准的说明，见仪器特定操作手册第4单元。5．操作步骤按照要求准备标本，离心分离血清后，放入i2000sr标本位进行检测（具体操作详见相关仪器操作手册）6．质量控制1.每隔24小时运行三个质控水平（正常值和异常值）。2.如果质控结果不在实验室所规定的可接受范围值内，则患者值可疑。需使用新鲜质控品重复质控。3.如果质控结果仍不在可接受标准范围内，则需重新校准。4.每次更换试剂批次后，都要检查质控结果和可接受标准。7．参考值范围0.05IU/ml8．技术性能8.1线性HBsAg的线性最高可达250IU/ml8.2精密度使用5个值不等的检测样本，每天在3个测定点用3个不同批号试剂重复测定4次，连续测定5天。每天在测定前和测定结束后重复测定ARCHITECT阳性质控。见表（一）见表（一）ArchitectHBsAg精密度样本数量平均值批内运行批间运行总体(IU/ml)标准差%变异系数标准差%变异系数标准差%变异系数11800.230.0114.60.0166.70.0187.7AbbottDiagnosticDivision美国雅培诊断产品中国部421804.690.1914.10.2906.20.3397.2318023.761.2055.12.1799.22.2689.5418096.614.6174.87.5877.98.9139.25180182.079.4485.214.3527.921.70511.9阳性质控11800.230.0187.80.0208.80.0229.7阳性质控2180177.3611.8896.712.9697.316.1269.18.3特异性和灵敏度特异性共5043份血清和血浆样本，来自于乙肝低流行性的全血献血志愿者，于3个临床测定点测定。初次和重复测定阳性率分别为0.46%（23/5043）和0.16%(8/5043)。8个重复测定阳性的样本中有一个经过特异的乙肝表面抗体中和试验确认了乙型肝炎病毒的存在。500个来自于医院病人的样本，有3个样本是重复反应阳性，并经中和试验确认都为阳性。50个匹配的血清和血浆样本，无重复测定阳性，其中只有匹配的血浆样本参与了特异性的计算。333份样本来自于与乙肝感染无关处于其他疾病状态的人群，这些样本包含着潜在的干扰物质，7个样本重复测定阳性，其中6个样本确认为阳性。见表（二）。表（二）ArchitectHBsAg在下述样本中的反应性分类数量初次测定阳性(％总数)重测定阳性(％总数)确认试验阳性(％重测定阳性)志愿者血清25377(0.28%)4(0.16%)1(25.00%)血浆250616（0.64%)4(0.16%)0(0.00%)志愿者总计504323(0.46%)8(0.16%)1(12.50%)病人标本5003(0.60%)3(0.60%)3(100%)匹配的血浆/血清对500(0.00%)0(0.00%)0(0.00%)处于其他疾病状态，含潜在干扰物的血清标本3308（2.40%)7(2.10%)6(85.71%)灵敏度ArchitectHBsAg灵敏度≤0.05IU/ml.注：雅培实验室使用HBsAgad/ay参考品，通过线性递减的方法得到ArchitectHBsAg灵敏度为0.15到0.29ng/ml。共503份血清和血浆样本，分别来自于343个已知乙型肝炎病毒感染的人群，10个急性乙型肝炎病毒感染者，50个慢性乙型肝炎病毒感染者，100个乙型肝炎感染高危人群。在这503个样本中，408（81.11%)个样本重复测定阳性并经特异性抗体中和试验确认为阳性。见表（三）。表（三）ArchitectHBsAg在HBV感染和高危人群中的反应性AbbottDiagnosticDivision美国雅培诊断产品中国部5分类数量重测定阳性(％总数)确诊试验阳性(％重测定阳性)预选的HBsAg阳性标本343343(100.00%)343(100.00%)急性HBV感染1010(100.00%)10(100.00%)慢性HBV感染5050(100.00%)50(100.00%)HBV感染高危人群1005（5.00%)5(100.00%)总计503408(81.11%)408(100.00%)根据对6429份血清/血浆样本的结果（表二、三），ArchitectHBsAg的特异性为99.87%（6,001/6,009），在95%的可信区间为99.74至99.94。8.4HBV变异株的检测ARCHITECTHBsAg对乙肝表面抗原变异株检出率的评价：最常见的乙肝表面抗原145号位置甘氨酸－精氨酸变异株（抗原决定族145号位置，氨基酸由甘氨酸突变为精氨酸），在ARCHITECT上，具有同野生型HBsAg一样的灵敏度。9．异常情况处理异常报告当结果超出检测范围或出现异常报告时，请根据操作手册查询错误原因及解决方案。如无法解决问题，可联络雅培公司工程技术人员。10．方法局限性1．曾接受过鼠单克隆抗体制剂治疗和诊断者，血清、血浆中可能含有人抗鼠单克隆抗体。这样的样本可对使用鼠单克隆抗体的检测项目引起假性升高或降低。需更多的其他诊断检查或临床症状对病人状况进行正确评价。2．如检测结果与临床症状不符，建议复查以确认结果。3．上机检测前，请先离心分离红细胞和颗粒物质。4.本检测所示性能未用尸体或其他动物的血清和血浆样本建立和证实。5.来自肝素化病人的样本可能会有部分凝结，由于纤维的存在可能会导致出现错误结果。为了防止这种现象，请于肝素治疗前抽取样本。11．参考文献1.EngvallE,PerlmannP.Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay(ELISA)QuantitativeAssayofImmunoglobulinG.Immunochem1971;8:871-4.2.EngvallE,PerlmannP.Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay(ELISA).In:PeetersH,editor.ProtidesoftheBiologicalFluids.ProceedingsoftheNineteenthColloquium,Bruges.Oxford:PergamonPress,1971;553-6.AbbottDiagnosticDivision美国雅培诊断产品中国部63.EngvallE,JonssonK,PerlmannP.Enzyme-LinkedImmunosorbentAssayII.QuantitativeAssayofProteinAntigen,ImmunoglobulinG,ByMeansofEnzyme-LabelledAntigenandAntibody-CoatedTubes.BiochemBiophysActa1971;251:427-34.4.VanWeemenBKandSchuursAHWM.ImmunoassayUsingAntigen-EnzymeConjugates.FEBSLetters1971;15:232-36.5.WisdomGB.Enzyme-Immunoassay.ClinChem1976;22:1243-55.6.WoltersG,KuijpersL,KacakiJ,etal.Solid-PhaseEnzyme-ImmunoassayforDetectionofHepatitisBSurfaceAntigen.JClinPathol1976;29:873-9.7.WeiR,KnightGJ,ZimmermanDH,etal.Solid-PhaseEnzymeImmunoassayforHepatitisBSurfaceAntigen.ClinChem1977;23:813-5.8.DavidGS,PresentW,MartinisJ,etal.MonoclonalAntibodiesintheDetectionofHepatitisInfection.MedLabSci1981;38:341-8.9.DrouetJ,CourouceAM,KalilJ,etal.MonoclonalAntibodiestoHBsAgProducedbyMurineHybridomas.In:SzmunessW,AlterHJ,MaynardJE,editors.ViralHepatitis.Philadelphia:FranklinInstitutePress,1982:706-7.10.GoodallAH,MiescherG,MeekFM,etal.MonoclonalAntibodiesinaSolid-PhaseRadiometricAssayforHBsAg.MedLabSci1981;38:349-354.11.KennedyRC,Ionescu-MatiuI,Alder-StorthzK,etal.CharacterizationofAnti-HepatitisBSurfaceAntigenMonoclonalAntibodies.Intervirology1983;19:176-80.12.ShihJW-K,CotePJ,DapolitoGM,etal.ProductionofMonoclonalAntibodiesAgain