药物分析课件第10章B-甾体激素类药物的分析

（三）有机溶剂残留量的检查（灵敏度法）甲醇不得出峰检测限=3.1ng丙酮≤5.0%内标法+校正因子以地塞米松磷酸钠为例GC法地塞米松磷酸钠检查甲醇和丙酮精密称取本品0.16g，置10ml量瓶中，精密加内标溶液2ml，加水稀释至刻度，作为供试液；另精密量取甲醇10μl(≈7.9mg)与丙酮100μl(≈79mg)置100ml量瓶中，精密加内标溶液20ml，加水至刻度，作为对照液。照气相色谱法测定，含丙酮不得过5.0%，并不得出现甲醇峰。（二）游离磷酸盐的检查地塞米松磷酸钠对照品比色法供试液+钼酸铵+1-氨基-2-萘酚-4-磺酸钼蓝：740nm对照液：同上（对照液0.0035%KH2PO4）POKHPOH%.%..L%.返回（一）HPLC法USP、BP、JP均采用RP－HPLC（大多内标法）（甾体激素类药物常含有结构相似的其他甾体杂质，对利用结构特征设计的比色法有干扰）四、含量测定测定对象：甾体激素类药物的原料和制剂。示例：黄体酮的含量测定色谱条件：固定相ODS，流动相甲醇-水（65:35），检测波长254nm，内标物己烯雌酚系统适用性试验：n1000，R符合规定。测定样品：黄体酮原料、注射液。定量方法：内标法（二）UV法△４-3-酮240nm（±）肾上腺皮质激素雄性激素和蛋白同化激素孕激素、口服避孕药苯环280nm（±）雌激素示例：醋酸地塞米松片的含量测定（1）配制供试液（2）测定：240nm（3）计算肾上腺皮质激素、雄性激素和蛋白同化激素、孕激素C3－酮基（1）原理异烟腙（黄）酮基异烟肼-CHCl（缩合）1.异烟肼比色法（三）比色法CONHNOHN异烟腙（黄色）（2）方法对照品法℃异烟肼挥去乙醇对照液供试液ACHCl暗45′（3）讨论反应速度（反应专属性）A.C3=O＞C17=O、C20=OC11=O不反应反应专属性C3－酮基B.溶剂的选择异烟肼盐酸盐→甲醇、乙醇无水甲醇无水乙醇C.水分、温度、O2与光线的影响含水量↑→腙水解↑→A↓→%↓不挥发溶剂、不吸收水分时→O2与光线无影响t℃↑→ν↑D.酸的种类和浓度及异烟肼的浓度酸:异烟肼=2:1盐酸浓度0.0074mol/L异烟肼浓度0.00365mol/L最大A肾上腺皮质激素类C17-α－醇酮基强还原性（1）原理2.四氮唑比色法有色甲瓒四氮唑盐醇酮基-a-7COH-[还原]CNNNNH三苯甲瓒↓深红CNNNN+Cl-氯化三苯四氮唑（TTC）红四氮唑（RT）nm~max490480e2[H]Cl-+CNNNNOCH3+-ClCNNNNOCH3蓝四氮唑（BT）（2）方法对照品法℃氢氧化四甲基铵对照液供试液ATTC40～45′暗（3）讨论A.基团对反应速度的影响C11=O＞C11－OHC21－OH＞C21-酯B.溶剂、水分的影响以无醛乙醇为溶剂C.O2与光线的影响避光隔绝空气、快速、充N2D.碱的种类及加入顺序以氢氧化四甲基铵的结果最佳加入顺序：碱试液四氮唑盐皮质激素溶液E.温度与时间（1）原理λmax=465λmax=515雌激素3.Kober反应比色法△△桃红黄色雌激素OH乙醇-SOHOHCH3O雌二醇-3-甲醚CH3CH3OCH3CH3Oλmax=465λmax=515SOHSOHOH铁－酚试剂[(NH4)2Fe(SO4)2+H2SO4+H2O2+苯酚]*铁盐的作用加快黄色产物的形成、转化加强红色产物的稳定性*酚的作用加快红色产物的形成消除反应产生的荧光Iron-phenolReagent返回练习与思考[A型题]1.醋酸地塞米松的鉴别方法是A.三氯化铁反应B.水解反应C.柯柏反应D.与碱性酒石酸铜试液反应E.双缩脲反应2.丙酸睾酮《中国药典》规定的含量测定方法为A.非水溶液滴定法B.溴酸钾法C.HPLC法D.紫外分光法E.旋光法[B型题]A.亚消基铁氰化钠反应B.Vitali反应C.Kedde反应D.绿奎宁(thalleiaqllin)反应E.碱试酒石酸铜试液的反应1.黄体酮2.醋酸地塞米松3.地高辛4.硫酸奎宁AECD[X型题]1.用HPLC法测定的药物有A.醋酸地塞米松B.丙酸睾酮C.炔雌醇D.硫酸阿托品E.黄体酮2.可用紫外分光光度法测定含量的药物有A.尼可刹米注射剂B.醋酸地塞米松片C.洋地黄毒苷片D.地高辛片E.硝酸士的宁注射剂