中空纤维-抗体浓缩澄清

WATERSEP初次培训实验室缓冲液除热源细胞收集洗滤，菌体裂解多糖澄清管道化蛋白无菌浓缩，疫苗浓缩洗滤抗污染PES膜，高回收率、长寿命优化组合产品，不拒绝任何需求中国生物技术发展趋势•改革的核心是科技与经济结合；科技成果尽快转化为生产力。•企业是技术创新的主体，支持企业建设高水平研发中心企业研发中心具备足够能力把握创新机会选择创新方向和技术路线组织技术研发，产品创新推广利用，转化科技成果•2020全社会研发经费占GDP2.5%•大中型企业研发占主营业务收入0.9-1.5%2011年全国科研经费8600亿，2015年达到15000亿全国科技创新大会7-8Jul2012中空纤维膜技术从头到尾贯穿生物工艺连续灌流培养培养基无热源过滤缓冲液无热源过滤细菌裂解澄清，多糖浓缩细胞洗滤，疫苗浓缩蛋白浓缩更换缓冲液竞争技术：死端过滤、囊式滤器、离心机、切向流超滤膜包，国产中空纤维高耗能离心机离心机采购成本大，保养成本高（密封件）耗能大细胞碎片去除不干净，还需过滤不能洗细胞，影响收率大于6L样品，实验室很难离心处理0.1m2中空纤维柱可处理10-20L样品容易堵：死端过滤囊式滤器比细胞洗滤，菌体裂解液澄清，无菌多糖浓缩CellConcentrationvs.CellWashingFromSheehanet.al.1989#2Washingincreasesenzymeyieldandprovidesmoreconsistentyieldsfromruntorun#1切向流膜包：不耐颗粒物、大分子•膜包中有分流网，剪切力大损伤大分子；样品中不能有颗粒；细胞碎片嵌在分流网中•不是开放通道设计，清洗不干净•需要夹具组成膜包，成本高•需要大流速泵透过液透过液液流平行膜表面（切向流），小分子随液体透出膜P2P1循环流切向流中空纤维膜技术(CFF)或交叉流技术中空纤维管中空纤维膜进液回流端抗污染PES中空纤维膜柱，4产品线，11种膜孔径，3高度，4种纤维管直径超滤：5k,10,30,50,100,300,500,750微滤：0.1um，0.2um,0.45um高度：30cm,60cm,110cm样品体积：ml–2000LDiscover:18-108cm2Explorer:154-600cm2Investigator:0.12-0.5m2Producer:1.2-5m2截留比膜大5-6倍的分子保留/浓缩透过/洗滤5k20K蛋白浓缩/缓冲液更换无热源缓冲液10k浓缩人血白蛋白，无嘌呤血清CHO无热源缓冲液，氨基酸透过30kMab浓缩/平衡液更换50kVIII因子、纤维蛋白原浓缩/平衡液更换100kIgM浓缩洗滤杂交瘤培养用少牛IgG血清300k病毒浓缩洗滤500k乙脑疫苗浓缩洗滤细菌&细菌裂解液澄清，蛋白收集750k狂犬、流感、HIV疫苗浓缩洗滤细菌&细菌裂解液澄清，蛋白收集0.1um酵母细胞收集清洗无支原体血清0.2um细胞收集除菌过滤，培养基，缓冲液，多糖疫苗0.45um抗体收集除细胞碎片（细胞培养、腹水）抗污染PES中空纤维：低成本、长寿命WATERSEP其他中空纤维抗污染PES，消除膜表面电荷，疏水基团，不沾污油脂,易清洗低吸附，高回收率；透过速度高，生产效率高，使用小柱导致配套泵系统变小，采购成本降低；易清洗，寿命长，成本低；不沾污可处理含油液体密实孔隙结构，膜孔径分布均一防样品分子泄漏膜结构强韧，耐清洗，寿命长WATERSEP不堵的过滤柱•E.Coli裂解液澄清不堵膜•能用注射器浓缩，洗滤100ml蛋白•10-400ml抗体无菌超滤、脱盐交换缓冲液•捕获清洗细胞，包含体复性•实验室无热源/RNA缓冲液制备澄清，浓缩，洗滤菌体收集澄清：比膜包透过速度快ProcessFeedPermeateConcentrateMembrane最擅长病毒浓缩洗滤ProcessFeedPermeateConcentrateMembrane与GEPS中空纤维比流速/产率抗污染PESvsPS浓缩含油香料比其他PS中空纤维微滤循环流速影响病毒收率FlowvelocityshearrateSec-180001000PermeateflowrateLMH3030Recovery%5080-90orabove0.45mHollowFiber病毒浓缩洗滤除杂蛋白MembranePorosity750KDaViralRecovery80%90%(includingflushcollection)Eggproteinclearance99%UFRetentateViscosityLowConcentrationFactor20-60X鸡胚尿囊液微滤超滤后AllantonicMF60xConcentratedUFWater(orotherbuffer)permeatesthroughthecartridgeastheproteinretentatesolutioncontinuestorecirculate.Thismodelisassumingcompletepassageofmicrosolute(lowmwprotein,salt,etc.)toberemoved.Microsoluteremovalasafunctionofdiafiltrationvolume024681020%40%60%80%100%PercentSoluteRemovedDiafiltrationVolumesVolumesSoluteremoval163.2121%286.4665%395.0213%498.1684%599.3262%1099.9995%5x体积洗滤除去99%小蛋白科学研究客户--DISCOVER方式：注射器演示DISCOVER中空纤维柱100ml,￥2628客户关注点：慢，堵，浓缩替代超滤离心管，超滤浓缩50-100ml蛋白，管道化无菌浓缩，无热源缓冲液制备细胞收集洗滤HF替代离心机细菌/细胞裂解液过滤替代过滤器抗体/重组蛋白封闭系统平台Wave+HF+AKTA工艺研发用户EXPLORER客户关注：拿到无菌样品策略：无菌袋+HFdemo应用：腹水澄清、浓缩细胞/细菌收集洗滤疫苗浓缩洗滤多糖澄清、浓缩样品200-2000mlHF￥6k无菌袋￥200中试放大Investigator•30L反应器小量生产•细胞澄清，蛋白浓缩•速度，替代离心•HF10-20L样品￥9k•先小试再放大灌流培养HF澄清抗体纯化中科院生物物理所临床前无热原抗体生产系统工业生产用户Bioproducer客户关注点：快，收率高，从细胞培养到纯化蛋白策略：介入技改升级项目，新项目启动WAVE+HF+AKTAprimeHF30-200L样品￥30k项目进展•WATERSEP独家代理July2012•测试样品定货•样品测试（肺炎多糖，卡介苗，酵母，E.coli裂解液浓缩洗滤，杂交瘤腹水澄清）•配套国产无菌储液袋定制•生产级HF预订，测试美国出口管制•销售培训•销售+Demo细胞收集•细菌(E.Coli)•酵母•哺乳动物细胞(包括灌流)•昆虫细胞包含体裂解澄清复性重组蛋白浓缩、洗滤病毒浓缩洗滤中空纤维线性平行放大WATERSEP初次培训实验室缓冲液除热源细胞收集洗滤，菌体裂解多糖澄清管道化蛋白无菌浓缩，疫苗浓缩洗滤抗污染PES膜，高回收率、长寿命培养—纯化封闭安全体系WAVE+HF+AKTAprime路演测试