标本采集的方法及注意事项一病区王红霞主要内容血培养痰培养血培养(需氧+厌氧)——血培养是微生物实验室最有价值的的检测项目证实有感染性的病原体鉴定病原体指导抗菌药物使用血培养的目的血培养适应症主要适应症-菌血症-感染性心内膜炎-临床不明原因感染(发烧待查)-假体植入后感染(人工关节、人工瓣膜等)-静脉导管相关性菌血症-脓毒症关节炎-肺炎、流行性脑膜炎、肾盂肾炎及腹部术后等严重局部感染临床适用科室凡是有住院部的科室都适用。儿科、内科、外科、妇产科等。需氧瓶厌氧瓶采血指征对入院的危重病人未进行系统性抗生素治疗时,应及时进行血液培养,病人出现以下临床表现时可作为采集血培养的重要指征。1.发热(38℃)或低温(36℃)2.寒战3.白细胞增多(10×10^9/L,特别有“核左移”未成熟的或带状的白细胞增多)4.粒细胞减少(成熟的多核白细胞1×10^9/L)5.血小板减少6.皮肤、粘膜出血7.昏迷8.多器官衰竭9.血压降低10.呼吸加快或同时具备上述几种临床表现时应采集血培养。另:在评估可疑新生儿败血症时,除发热或低温外,很少培养出细菌,应该增加尿液和脑脊液培养。肺炎链球菌与流感嗜血杆菌菌血症患儿(特别是2岁或2岁以下的幼儿)一般在门诊就诊,常伴有明显发热(38.5℃)和白细胞增多(20×109/L)。老年菌血症病人可能不发热或不低温,如伴有身体不适、肌痛或中风,可能是感染性心内膜炎的重要指征。最佳采血时机:发热早期、抗生素治疗前、停用抗生素后24小时。采血部位:通常为肘静脉,疑为细菌性心内膜炎时,可选择肘动脉或股动脉;不应使用静脉输液途径或静脉、动脉导管取血。同时多部位采血:有助于判断假阳性,但意见不统一。采血量:成人,5-10mL/瓶;儿童,1-3mL/瓶。采血时间间隔:依病症而不同,30-60分钟不等。送检前暂存:不能立即送检时,室温暂存,勿置冷藏。血培养规范:标本采集小时后或下次用药前血培养的采集?成人每瓶5ml~10ml,儿童3~5ml,婴幼儿1~2ml;研究表明,采血量在3-10ml范围内,采血量与培养阳性率成正比,血量每增加1ml,阳性率约提高3%。增加血量是从血流感染(BSI)的患者血液中培养出微生物最显著的方法。采集的标本量酒精消毒血培养瓶塞,作用60S,待干血培养检测消毒程序皮肤消毒程序为防止皮肤寄生菌污染,可使用消毒剂对皮肤进行严格仔细的消毒处理,最大限度地减低皮肤污染。用70%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上。然后用棉签(1~2%碘酊或10%碘伏)消毒皮肤,从穿刺点向外以1.5~2cm直径画圈进行消毒。最后用70%酒精脱碘。对碘过敏的患者,只能用70%酒精消毒,消毒60s,待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血。不允许在消毒后按压静脉,除非带有无菌手套。培养瓶消毒程序1.用70%酒精消毒血培养瓶橡皮塞,作用60s。2.用无菌纱布或无菌棉签清除橡皮塞表面剩余的酒精,然后注入血液。儿童血培养不同于成人血培养,由于厌氧菌感染极少发生在儿童病人,因此建议只采用需氧瓶。厌氧培养只考虑针对特殊的高危群体。皮肤消毒参照成人的方法,除新生儿以外。抽取血标本采血针:持穿刺针按常规方法刺入静脉,另一头刺入相应血培养瓶内,利用瓶内真空抽取血标本注射器抽取:用注射器无菌穿刺取血后,勿换针头直接注入组培养瓶。轻轻混匀以防凝固!抽取血标本标本运送置于防漏、防渗、相对密封的容器中收集、存储与转运如不能及时送检,应放在室温,切勿放入冰箱内冷藏或冷冻已采集的标本应视为潜在性生物危险品立即送检,一般不得超过2小时讨论假阳性:污染率3-5%严格无菌技术操作存在问题假阴性:可以避免输液处采血采血量不够血液凝固大剂量使用抗生素后大剂量使用激素后结果——假阴性血培养的送检:成人“一套”血培养,包括需氧和厌氧各一瓶,也称为“一份”;儿童一般只做需氧培养,必要时进行厌氧培养。采血规则:一次穿刺只取一套血培养,下一套血培养,应使用另一穿刺点。多套送检:每位患者每次至少送检两套,三套最好;初次血培养,决不能只送检“一套”。7血培养规范:送检方式采血套数及血量1套(20ml)2套(40ml)3套(60ml)检出率65%80%96%PCT联合血培养的意义?所以,血培养+PCT联合应用,互相补充,更好指导临床。优点缺点血培养能鉴别出细菌种类出报告时间长、阳性率低、易受污染PCT早期指标(2h开始升高)、细菌感染特异性高、阴性预测值高(90%)不能鉴别出细菌种类血培养PCT(ng/mL)处置方案阳性2真阳性,按培养和药敏结果维持或修改抗生素处方阴性0.5真阴性,不使用抗生素,注意病情变化阳性0.5可能为假阳性,实验室与临床沟通阴性2可能为假阴性,重复血培养,注意规范送检分级报告(阳性结果三级报告)①报告涂片结果,并做初步药敏。(培养24h后)——革兰氏阳性/阴性,杆菌/球菌。②报告初步药敏结果,及第二次涂片结果,并进行规范的鉴定和药敏试验。(培养48h后)③电话报告正式鉴定和药敏结果,再按正常程序报告纸质报告。(5-7天)分级报告(阳性结果三级报告)痰培养采集注意事项下呼吸道标本一采集指南1.呼吸系统疾病外加咳嗽、咯血、呼吸困难、发热。2.怀疑属于通风设备相关性肺炎,应培养与气管、肺泡灌洗液及支气管刷。下呼吸道标本二采集方法1自然咳痰法:以清晨为最好,此时病人痰量较多,反应真实情况。采集前,应清水漱口,除去大部分口腔内杂菌,用力从气管深部咳出痰液。2诱导性痰:涮完牙龈和舌头后,让患者用水漱口,借助喷雾器,使患者吸入约25mL3%--10%无菌盐水诱导痰。3下呼吸道肺泡灌洗、支气管刷灌洗,气管抽吸物或洗出物放入痰杯内,刷出物放入1mL无菌盐水的无菌容器内。4注意:对不能产生标本的患者,医生可以抽吸获得标本。最好的标本鳞状细胞=10个/LPH,=25个/LPH为合格的标本下呼吸道标本三采集量:=1mL四容器:无菌密闭五标本转运(冷藏保存,24h内送检)敬请指导!Thanks