血液制品的生产工艺及产品安全性-1

1血浆制品的生产工艺及产品安全性UweE.Jocham药剂师制药工程药剂师2血浆分离置换法生产血浆PCS2生理盐水回流一次性装置生理盐水接口收集容器吹塑筒血液过滤器DPM过滤器针头适配器AC接口全血入去除部分血浆富含血小板血浆白细胞红细胞3关于冻存条件的特殊规定指南：•欧洲药典“用于分馏的血浆”（0853）•美国食品药品监督管理局联邦法规第21篇第640部分“血液和血液制品的其他标准”，§640.34,640.69冷冻条件取决于预制备的血浆制品血浆冷冻及储存条件4新鲜冷冻血浆(从全血捐献或血浆分馏置换法制得，用于静脉输注)与红细胞分离后8小时内置于冰箱内，储存在-18°C或更低温度保存期限:自采集之日起1年美国联邦法规单采血浆(通过血浆分离置换法采集，用作生产注射产品的原材料)灌装后立刻储存于-20°C或更低温度保存期限:10年美国联邦法规•没有明确指定运输温度；在储存或运输期间，若不慎暴露于一定范围内的高温，可被接受。血浆冷冻及储存条件5捐献者筛查血液/血浆采集捐献物测试血浆放行运输到生产厂采集机构的责任从捐献者到生产厂物质流程图6原材料放行生产质量控制测试产品放行运输到市场生产厂的责任从生产厂到经销商的物质流程图7分销至客户分销至患者销售渠道的责任经销商到患者的物质流程图8捐献者身份识别将捐献者和捐献物相关联捐献列表批次追踪运输分销患者资料捐献者患者通过文档记录追踪每一份产品流向可溯源性9生产过程普通血浆特定血浆制备血浆基础分馏批量生产无菌灌装灯检包装10生产过程普通血浆特定血浆制备血浆基础分馏批量生产无菌灌装灯检包装11•基础分馏•血浆到中间产品分馏制备血浆融化离心分离冰冻沉淀物VIII因子过滤沉淀物A沉淀物IV过滤过滤沉淀物B沉淀物C过滤过滤沉淀物GG白蛋白IVIG（免疫球蛋白）12血浆鉴定混合分馏:-沉淀-过滤基础分馏13血浆蛋白醋酸薄膜电泳基础分馏白蛋白Α1球蛋白Α2球蛋白Β球蛋白γ球蛋白14蛋白质溶解度参数:pH7.4到4.0温度0°C到-7°C乙醇浓度0到40%离子强度0.14到0.005蛋白浓度5.7到1.0%P.Kistler,H.Nitschmann;人血浆成分的大规模生产；血液之声7,414-424(1962)E.J.Cohn,L.E.Strong,W.L.Hughes,D.J.Mulford,J.N.Ashworth,M.Melin,H.L.Thaylor；血清和血浆蛋白的制备和特性。一个将生物组织和液体分成蛋白和脂蛋白两部分的分离系统。；美国化学学会杂志68,459-475(1946)基础分馏15•白蛋白溶解度基础分馏乙醇浓度16生产设备初始血浆容量4000L最终沉淀容量8000L过滤面积40–60m2沉淀物重量250–350kg中间产品(沉淀物)冷冻,-20°C储存,1到2年基础分馏17生产过程普通血浆特定血浆制备血浆基础分馏批量生产无菌灌装灯检包装18中间产物到最终剂型•减少杂质(蛋白)•减少沉淀剂(乙醇)•浓缩•病原体安全性•稳定性批量生产19减少杂质(蛋白、脂类、IgA等)•进行沉淀减少沉淀剂(乙醇)•超滤/渗析浓缩(2%到25%)•超滤病原体安全性•巴氏灭菌60°C加热，10小时•病毒灭活稳定性•辛酸、色氨酸批量生产20沉淀物C再悬浮过滤中和超滤/透滤最终剂型批量生产21生产过程普通血浆特定血浆制备血浆基础分馏批量生产无菌灌装灯检包装22灌装过程洁净等级C级房间批量储存无菌过滤洁净等级A/B级房间无菌灌装无菌塞子清洗和消毒瓶子配塞A级空气供应轧盖E级房间巴氏灭菌（60°C，10小时）恒温室保持温度30-32°C23生产过程普通血浆特定血浆制备血浆基础分馏批量生产无菌灌装灯检包装24在灌装前，对所有空瓶进行100%的控制对介质灌装进行100%控制例子:在包装前，对所有已灌装的瓶子进行100%的控制对所有溶剂进行100%控制例子:灯检25生产过程普通血浆特定血浆制备血浆基础分离批量生产无菌灌装灯检包装26预印贴标单件包装货盘装运运输包装包装27•白蛋白适用于因失血或烧伤导致休克的病人，也适用于危急情况，如ARDS、心肺分流术、急性肝衰竭、肾病、和新生儿的溶血性疾病。•人血清白蛋白作为一种赋形剂，同时在医疗发展和生产多个领域具有良好的使用价值。白蛋白28确保质量和安全性的措施上市后药物监测(药物警戒)符合药品生产质量管理规范(GMPs)企业自愿采取的措施(例如，血浆编目保存、核酸检测)捐献后信息29强化安全观念降低风险群体相关风险捐献者筛查血液测试PCR测试病毒消除不同批次隔离患者收集&生产过程30筛查过程可确保排除高风险行为捐献者：捐献者教育捐献者问卷调查体格检查隐私自我排除排除有风险的捐献者捐献者筛查31•对每一份捐献物进行血清学检验:HIV-1/2抗体丙肝抗体乙肝表面抗原•小样本核酸检测（NAT）:HIV-1RNAHCVRNAHBVDNAHAVRNAB19病毒DNA排除反应呈阳性的捐献者捐献物测试32•对所有生产混合血浆样品进行血清学/核酸检测:HIV-1/2抗体丙肝抗体乙肝表面抗原HCVRNAHBVDNAHIV-1RNA对混合血浆样本原料进行病毒标志物和病毒遗传物质检测血浆样品过程控制（生产过程）33任何有关捐献者或捐献物的信息，都将作为捐献后信息，可影响血浆产品的质量和/或安全：-延缓出现的症状-错误放行-反馈通知（捐献者血清转化、可疑的输血后感染）-CJD/vCJD捐献后信息（PDI）评估所有受影响中间产品和成品的风险，如有需要，采取适当的措施确保质量和安全性的措施34有三种不同的机制来消除生产过程中潜在病毒，即隔离灭活根据大小进行消除生产期间的安全措施35起始材料中间产物废料和病原体层析法分馏离心分离深层过滤等……通过隔离减少病原体36病原体灭活的主要目标是目标物质中所含有的、同一级别的分子，即:是蛋白质！因此，病原体灭活就像走钢丝，总有一定的风险！怎样在不影响产品“生物体”成分的前提下灭活病原体？病原体灭活37可采用以下方法：•溶剂/清洁剂处理•低pH值培养•巴氏灭菌•UV/γ照射•化学修饰低pH值灭活HIV01002003004000.02.55.07.5LogTCID50病原体灭活分钟38溶剂/清洁剂:S/D介导破坏包膜仅对有包膜的病毒有效!例如-Triton-X100/磷酸三丁酯-胆酸盐/磷酸三丁酯胆酸盐TNBPTX-100病原体灭活39小核糖核酸病毒科~30甲肝，脊髓灰质炎细小病毒科18-25B19V,鼠微小病毒（MVM）黄病毒科40-60牛病毒性腹泻(BVDV),丙肝，西尼罗病毒疱疹病毒科100-1801型和2型疱疹，HHV-8,伪狂犬病痘病毒科~250x350牛痘、天花病毒大小病毒大小40某些病毒具有和蛋白相似的“大小”(流体直径)病毒大小分子量[log]直径2Rs[nm]41规模缩小生产和实验室规模的关键参数必须相同：压力、蛋白浓度、pH值、每平方米过滤面积的容量。病毒过滤研究的挑战20m214cm242感谢您的关注!