仙鹤草中化学成分的研究进展

2014年度本科生毕业论文（设计）仙鹤草中化学成分的研究进展院－系：理学院化学系专业：化学年级：2011级学生姓名：何宣鹏学号：201101020132导师及职称：王泽锋2014年4月2014AnnualGraduationThesis(Project)oftheCollegeUndergraduateResearchprogressinchemicalconstituentsofAgrimoniapilosaDepartment:DpartmentofChemistry,SchoolofScienceMajor:ChemistryGrade:2011Student’sName:HeXuanpengStudentNo.:201101020132Tutor:WangZefengApril,2014仙鹤草中化学成分的研究进展何宣鹏红河学院理学院化学系2011级蒙自661100摘要本人在查阅了大量文献之后，对仙鹤草中化学成分的研究进展进行总结，化学成分分为十二类概述，其成分主要为酚类、黄酮类、糖苷类、三萜类及皂苷类、有机酸、酯类、挥发油、甾体类、鞣质类、多糖、微量元素成分等化合物以及新发现的化合物。关键词：仙鹤草；化学成分；研究ResearchprogressinchemicalconstituentsofAgrimoniapilosaHeXuanpengDpartmentofChemistry2011,SchoolofScience,HongheUniversity,Mengzi661100ABSTRACTI'mreadingalotofliteratures,theresearchprogressonchemicalconstituentsinAgrimoniapilosaweresummarized,thechemicalcompositionisdividedintotwelvecategories,themaincomponentofphenols,flavonoids,glycosides,threeterpenoidsandsaponins,organicacids,esters,volatileoil,steroidal,tannins,multisugar,traceelementsandothercompoundsaswellasnewlydiscoveredcompounds.Keywords:Hairyveinagrimony，Chemicalcomposition，Research红河学院本科毕业论文(设计)鹤草为双子叶植物蔷薇科龙芽草属植物龙芽草Agrimo-niaPilosaLedebVar.japonica(Miq.)Nakai的全草。常用名为瓜香草、脱力草、马鞭草、龙芽草、石打穿、狼牙草、毛将军、黄龙尾等。始载于1062年苏颂的《图经本草》，夏、秋一季茎叶茂盛时采割。主要分布在中国、朝鲜、蒙占、日本，我国的黑龙江、吉林、辽宁、内蒙占等地区分布广泛。仙鹤草性平,味苦涩,归心、肝经，含有多种生理活性成分，主治收敛止血、截虐、止痢、解毒。用于咳血，吐血，崩漏下血，疟疾，血痢，脱力劳伤，痈肿疮毒，阴痒带下[1]。民间多用其止消炎。近年来研究发现，以仙鹤草为卞的复方制剂有抑癌作用。如仙鹤草和败酱草水提取物对直肠癌、膀肤癌、宫颈癌细胞有抑制增强的作用，并有显著止加镇静效果。现代医药学研究证明,仙鹤草中含有酚、酯、黄酮、鞣质、糖苷、有机酸、挥发油、三萜皂苷、维生素C、K等极其复杂的化学成分,并具有抗肿瘤、降血糖、镇痛抗炎、止血、抗疟、抗心律失常等多方面的药理作用[2]。由于仙鹤草具有较强的生物活性,多年来国内外学者对其化学成分和药理作用进行了深入研究,本文对化学成分研究进展进行综述。仙鹤草含有多种化学成分，如仙鹤草素（Agrimonin）,鞣酸、挥发油、甾醇,有机酸、酚类、黄酮类和糖苷类等化合物。目前，人们通过不同的技术手段对其化学成分进行了分离和鉴定。1酚类化合物仙鹤草中酚类化合物主要含有仙鹤草酚A(AgrimolA)、仙鹤草酚B(AgrimolB)、仙鹤草酚C(AgrimolC)、仙鹤草酚D(AgrimolD)、仙鹤草酚E(AgrimolE)、鹤草酚(Agrimpopho)、伪绵马素(Pseudoaspidin)等[3]。1.1均苯三酚衍生物1977年沈阳药学院等从仙鹤草根芽石油醚提取物中分离出均苯三酚衍生物鹤草酚(aglimopho1)，1989年裴月湖等从仙鹤草根芽中分得仙鹤草酚的同类化合物伪绵马素[4]。1.2间苯三酚三缩合体的衍生物7O年代中国科学院上海药物研究所从仙鹤草中提取分离出五种间苯三酚三缩合体的衍生物，命名为仙鹤草酚A、B、C、D、E。8O年代沈阳药学院从仙鹤草根芽石油醚的提出物中得到(R)-(-)-仙鹤草酚(agdmo1)B，并合成了(s)-(+)-仙鹤草酚B[4]。1.3仙鹤草的酚类化学成分近来研究情况2010年，刘红霞等[5]对仙鹤草的化学成分进行研究。方法：利用硅胶柱色谱、SephadexLH-20柱色谱、高效液相色谱、制备薄层色谱等各种色谱手段对化学成分进行分离纯化,并通过理化性质和波谱数据分析对化合物进行结构鉴定。结果从仙鹤草乙酸乙酯萃取部分分离得到8个酚类化合物,分别鉴定为龙牙草酚C（pilosanolC，1）、去氢双儿茶素A(dehydrodicatechinA,2)、(+)-儿茶素[(+)-catechin,3]、(2S,3S)-(-)-花旗松素[(2S,3S)-(-)-taxifolin,4]、异香草酸(isovanillicacid,5)、反式对香豆酸(trans-p-coumaricacid,6)、原儿茶酸(protocatechuicacid,7)、原儿茶醛(protocatechuicaldehyde,8)。结论：化合物2、5-8均为首次从龙牙草属植物中分离得到。化合物1-8的结构式见图1。红河学院本科毕业论文(设计)1.4仙鹤草中酚类成分检测仙鹤草中的酚类主要是鹤草酚，目前对其含量测定研究较深入。对鹤草酚的含量研究较早的是周荣汗和李铣[6]，通过薄层扫描法测定了仙鹤草、朝鲜龙芽草、大花龙芽草、小花龙芽草4种植物的根芽中鹤草酚的含量，朝鲜龙芽草的含量较高为2.45%，而大花龙芽草的含量较低仅为0.103%。杜彦梅等[7]采用HPLC对仙鹤草中的鹤草酚进行了含量测定，流动相组成为甲醇-水（75：25），检测波长292nm，控制流动相pH=6.5，色谱信号分离较好。结果：鹤草酚在0.8～4.0μg范围内呈良好的线性关系，平均回收率为97.15%，相对标准偏差为0.96%（n=6），计算鹤草酚含量为0.022%。此条件适用于测定各采收期及不同部位仙鹤草的含量。杜超[8]采用超声提取法和HPLC法测定仙鹤草秋芽、地下和地上部分鹤草酚的含量。流动相为甲醇-水-三乙胺（58：42：0.2），检测波长为325nm。结果：鹤草酚在0.01197～0.1125mg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系，平均回收率为101.1%、101.4%和101.4%，RSD为1.05%、1.08%和1.12%（n=9），计算鹤草酚在芽中为0.30%、在地下部分为0.20%、在地上部分为0.01%。陈晓辉等[9]采用氯仿加热提取法和RP-HPLC法测定鹤草芽栓中鹤草酚的含量，以甲醇-水-三乙胺（80：20：0.2）为流动相，检测波长292nm，结果：鹤草酚在12.5～125mg/L与峰面积呈良好的线性关系，平均回收率为98.2%，RSD为1.5%（n=9），计算鹤草酚的含量在50mg/粒左右。周大祥等[10]采用超声提取法和HPLC法测定抗胆管癌中成药平消胶囊的有效成分仙鹤草酚的含量，流动相为甲醇-水-三乙胺（58：42：0.2），检测波长325nm，结果：仙鹤草酚在0.01196～0.1125μg范围线性关系良好（r=0.9998）；平均回收率分别为101.04%（RSD=1.37%），平消胶囊中仙鹤草酚的含量为1.372mg/g。1.5仙鹤草中总多酚的提取2012年，在单因素实验的基础上，徐秀泉等采用响应面分析法对影响超声辅助提取仙鹤草总多酚得率的主要因素(超声温度、料液比和乙醇浓度)进行优化，建立了影响因素与总多酚之间的函数关系。获得最佳工艺条件为:71%乙醇，料液比1∶24，超声提取温度60℃，提取时间20min。在此最佳条件下，总多酚得率为3．56%，试验结果与模型预测值相符。结论：超声提取方法简单，具有提取效率高、时间短、无需加热等优点，是一种较理想的提取仙鹤草多酚的方法[11]。2黄酮类化合物2.1黄酮类化合物的发现沈阳药学院从仙鹤草根芽的苯提取物和丙酮提取物中得到(2R,3R)-(+)-花旗松素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖甙。1995年李霞等首次从仙鹤草的地上部分分离出一对旋光异构体(2S,3S)-((2R,3R)-(+)-花旗松素-3-葡萄糖苷)-花旗松素-3-葡萄糖苷(2S,3S)-(-)-花旗松素-3-葡萄糖苷和(2R,3R)-(+)-花旗松不素-3-葡萄糖甙以及金丝桃甙等[4]。2.2黄酮类化合物的检测刘磊等[12]采用RP-HPLC法测定仙鹤草药材中槲皮素的含量，流动相为乙腈-甲醇-0.2%磷酸（10：45：60），检测波长为368nm。结果：槲皮素在0.098~1.746μg范围内线性良好（r=0.9999）；平均加样回收率（n=6）为99.9%，RSD为1.4%；不同批号的仙鹤草药材中槲皮素的含量为10.6~12.5μg/g。范尚坦等[13]采用正交试验法，以总黄酮为指标寻找仙鹤草最佳的提取工艺；采用紫外分光光度法在波长为510nm处测定仙鹤草中总黄酮含量，结果：总黄酮质量关系浓度在20~100μg/mL范围内与吸光度线性良好，平均加样回收率（n=6）为99.2%，RSD为1.3%；仙鹤草中总黄酮含量为2.5%左右。2.3黄酮类化合物的提取2011年，蒋志华等[14]优化了仙鹤草总黄酮的最佳超声提取工艺。方法:以总黄酮得率为指标，采用响应面设计方法对影响总黄酮得率的乙醇体积分数、超声温度及料液比进行优化。结果:各因素对总黄酮提取率的影响大小依次为料液比-超声温度-乙醇体积分数。最佳工艺条件为72%乙醇，料液比1∶25，60℃下超声提取20min。结论:利用超声提取仙鹤草总黄酮工艺稳定可靠。3糖苷类化合物沈阳药学院从仙鹤草根芽丙酮提取物中分离出仙鹤草内酯-6-O-β-D-吡葡萄糖和胡萝卜甙等化合物。4三萜类以及皂苷类化合物三萜类化合物主要有熊果酸(Ursolicacid)。仙鹤草中还含有其苷类成分,如1红河学院本科毕业论文(设计)β,2α,3β,19α-四羟基-12-烯-28-熊果酸(1β,2α,3β,19α-fourhydroxy-12-akene-28-ur2sone)、1β,2β,3β,19α-四羟基-12-烯-28-熊果酸(1β,2β,3β,19α-fourhydroxy-12-akene-28-ursone)、2α,19α-二羟基-熊果酸-(28-1)-β-D-吡喃葡萄糖苷(2α,19α-dihydroxy-ursone-(28-1)-β-D-glucopyranoside)等成分[3]。据国外报导，从仙鹤草全草中分离出两种新的三萜皂甙类化合物1β,2α,3β,19α-四羟基-12-烯-28-熊果酸和1β,2β,3β,19α-四羟基-12-烯-28-熊果酸；从仙鹤草根芽中分离出2α,19α-二羟基-熊果酸-(28-1)-β-D-吡喃葡萄糖苷[4]。5有机酸沈阳药学院从仙鹤草的苯提取物中提取分离出软脂酸[15]，丙酮提取物中分离出委陵菜酸(Tormenticacid)[16]。国外Shizuokasai等从仙鹤草中分离出仙鹤草酚酸A、B(agrimonicacidsA、B)[17]。6酯类化合物国外在1976年从仙鹤草根芽中分离出仙鹤草内酯。国内裴月湖等[18]从仙鹤草根芽的苯提取物中分离出反式对羟基肉桂酸C22、C24-32、C34(p-co