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第一部分知识落实篇专题八生物技术实践第一讲微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用核心考点归纳整合微生物的培养和应用1．培养基制备与微生物纯化技术核心考点归纳整合归纳提炼(1)分离微生物所用的选择培养基一定是固体培养基，因为菌落只能在固体培养基上形成。(2)平板划线法只适用于微生物的提纯，不适合进行计数，并且在最后一次划线的末端处的菌种最纯，进行平板划线应注意如下操作：①每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌。②灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。③划线时最后一区域不要与第一区域相连。核心考点归纳整合(3)倒平板的温度一般在50℃左右适宜，温度过高会烫手，过低培养基又会凝固。(4)平板需倒置，这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又防止皿盖上的水珠落入培养基，造成培养基污染。核心考点归纳整合2．微生物的分离和计数(1)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数。①筛选菌株：利用选择培养基筛选菌株。②测定微生物数量的常用方法：统计菌落数目和显微镜直接计数。③过程：土壤取样→样品的稀释→微生物的培养与观察。(2)分解纤维素的微生物的分离。核心考点归纳整合①实验原理：即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。②流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布平板→挑选菌落。核心考点归纳整合3．统计菌落数目的方法——稀释涂布平板法(也叫活菌计数法)(1)原理。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品大约含有多少个活菌。核心考点归纳整合(2)操作。①设置重复组，增强实验的说服力与准确性。将待测样品经一系列10倍稀释，然后选择三个稀释度的菌液，分别取0.1mL接种到已制备好的平板上，然后用无菌涂布棒将菌液涂布整个平板表面，放在适宜的温度下培养，计算菌落数。为使结果接近真实值，可将同一稀释度加到三个或三个以上的平板上，经涂布、培养，计算出菌落平均数。核心考点归纳整合②为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300个的平板进行计数，若设置的重复组中结果相差太远，意味着操作有误，需重新实验。(3)计算公式。每个样品中的菌落数＝CV×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。核心考点归纳整合4．无菌技术(消毒和灭菌的区别)核心考点归纳整合核心考点归纳整合5.用选择培养基分离微生物的方法(1)在基础培养基中加入抗性物质。举例：①加高浓度食盐分离金黄色葡萄球菌；②加青霉素分离酵母菌和细菌。(2)通过改变培养基的成分。举例：①培养基中缺乏氮源时，可分离自生固氮微生物，非自生固氮微生物因缺乏氮源而无法生存。②培养基中若缺乏有机碳源则异养微生物无法生存，而自养微生物可利用空气中的CO2制造有机物生存。核心考点归纳整合(3)利用培养基的特定成分。举例：①当石油是唯一碳源时，可抑制不能利用石油的微生物的生长，使能够利用石油的微生物生存，从而分离出能消除石油污染的微生物。②当纤维素为唯一碳源时，分离纤维素分解菌。核心考点归纳整合1．中国家电研究院的洗衣机专家指出，洗衣机内部的环境非常潮湿，洗衣机使用时间越长，内部滋生微生物的机会就越大。看似干净的洗衣机，其内部隐藏着一个健康的隐形杀手。某生物兴趣小组的同学，利用内桶背面的污垢进行了相关实验室实验。(1)培养洗衣机内部微生物的培养基中一般含有_________________________________________________________________。核心考点归纳整合(2)鉴定洗衣机污垢中是否有菌落时要制备固体培养基，在制备完毕后要进行倒平板操作，将平板倒置。这样做的目的是_____________________________________________________。(3)有三种材料或用具需要消毒或灭菌：①培养细菌用的培养基与培养皿；②玻棒、试管、烧瓶和吸管；③实验操作者的双手。其中需要消毒的是______，需要灭菌的是______。核心考点归纳整合(4)检验污垢中是否含微生物时，要将污垢制成水样稀释，然后将稀释水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，这种方法称为__________________。下图所示的四种菌落分布情况中，不可能由该方法得到的是________。用该方法统计样本菌落数时是否需要对照组？_____________。为什么？_____________________________________________。(5)判断污垢中微生物的种类可以依据菌落的形状、大小等菌落特征进行初步的________。实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，此目的是_____________________________________________________。核心考点归纳整合解析：(1)微生物培养基中一般需含有水、无机盐、碳源、氮源等成分。(2)倒置平板的目的是防止皿盖上凝结的水珠落入培养皿造成污染，同时还可使培养基表面的水分更好地挥发。(3)实验者的双手需要进行消毒处理，培养皿、培养基及其他实验器材等需要进行灭菌处理。(4)本题中将污垢水样接种在培养基上的方法为稀释涂布平板法。D属于利用平板划线法得到的菌落分布。利用稀释涂布平板法统计菌落数时需要设置对照组，将一个未接种污垢水样的培养基放在相同条件下培养，以此判断培养基是否被杂菌污染。(5)污垢中的微生物种类可以根据菌落的形状、大小等进行初步分类。实验结束后，为防止污染环境，应对用过的培养基进行灭菌处理后再倒掉。核心考点归纳整合传统发酵技术1．果酒、果醋、腐乳、泡菜的制作过程的比较核心考点归纳整合核心考点归纳整合2.传统发酵技术必须控制发酵条件(1)发酵过程都需要器材消毒、灭菌和操作过程无菌操作。(2)加入抑制杂菌繁殖的物质，如酒精、香辛料等。(3)控制发酵温度、pH、氧气浓度和发酵时间。3．有关食品加工制作中的注意事项(1)果酒、果醋的制作。①材料选择与处理。②防止发酵液污染，控制好发酵条件。核心考点归纳整合(2)腐乳的制作。①材料用量。②防止杂菌污染。③控制温度及酒精含量。(3)制作泡菜。①泡菜坛的选择。②腌制条件(无氧)。(4)乳酸菌、乳酸的数量随时间变化的曲线核心考点归纳整合►对位训练2．(2015·河北唐山一中)根据相关知识，回答关于果酒、果醋和腐乳制作的相关问题。(1)当________时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。(2)在____________条件下，重铬酸钾与酒精发生反应呈现______________色。(3)下图为腐乳制作的实验流程示意图，据图回答下列问题。核心考点归纳整合①图中A代表________，其主要目的是__________________，同时还能________________；②在配制卤汤中酒的含量一般控制在________左右，酒精含量过高腐乳成熟时间将会________；酒精含量过低，________，可能导致豆腐腐败。解析：在氧气、糖源都充足的条件下，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。在酸性条件下，重铬酸钾与酒精发生反应呈现灰绿色；在腐乳制作过程中，在豆腐上长出毛霉后需加盐腌制，盐的作用是析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，还能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。卤汤中加酒需适量，酒精含量过高使腐乳成熟时间延长，酒精含量低，不足以抑制微生物的生长。核心考点归纳整合答案：(1)氧气、糖源都充足(2)酸性灰绿(3)①加盐腌制析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质②12%延长不足以抵制微生物的生长