饲料分析及饲料质量检测技术实验讲义

饲料分析及饲料质量检测技术实验讲义四川农业大学动物营养研究所二00000000九年四月I目录实验一样本的采集和样本的制备以及初水的测定………………………………………………………1111实验二饲料中干物质的测定………………………………………………………………………………3实验三饲料中粗脂肪（醚浸出物）的测定………………………………………………………………4实验四饲料中钙的测定（高锰酸钾法）…………………………………………………………………5实验五饲料中蛋白质的测定………………………………………………………………………………7实验六饲料中粗纤维的测定………………………………………………………………………………9实验七饲料中磷的测定……………………………………………………………………………………11实验八饲料中粗灰分（矿物质）的测定…………………………………………………………………13实验九饲料中水溶性氯化物的测定………………………………………………………………………14实验十微量元素的测定(Fe、Cu、Mn、Zn)—原子吸收分光光度法……………………………………16实验十一显微镜检技术实验………………………………………………………………………………18181818实验十二饲料中热能的测定………………………………………………………………………………21212121实验十三高效液相色谱法测定饲料中喹乙醇的含量………………………………………………………28282828实验十四饲料混合均匀度的测定…………………………………………………………………………31实验十五颗粒饲料粉化率的测定…………………………………………………………………………32综合实验一鱼粉的掺假鉴定………………………………………………………………………………33综合实验二三聚氰胺的测定……………………………………………………………………………361实验一样本的采集和样本的制备一、新鲜样本和风干样本（半干样本）1.新鲜样本：含有大量的游离水（自由水）的样品称为新鲜样本。含水量为70-90%。游离水（自由水）存在于动植物中细胞外，毛细管及腔体中的水。在常压常温下或60-65℃中蒸发，0℃结冰。2.风干样本：含有少量自由水，吸附水的样品称风干样本。含水量为15%以内。3.半干样本：不含游离水只含吸附水，通常指在60-65℃中烘干后的样品。（常温下因要吸收空气中的水分。）吸附水（结晶水）——吸附于动植物中的蛋白、淀粉中，以氢键相结合（水分子）。常压下，在100℃以上蒸发，在-40℃以下结冰。下面再介绍几个概念：采样——从某一物品中采集供给分析测定的样本。采样应具有足够的代表性及普遍性。因为采样的目的是供给分析测定用的样本，所得的分析测定结果要指导生产和应用实际，它左右着生产实际的决择，如果不遵守采样的方法技术，将会给生产实际和应用带来严重后果。四分法——将一张干净的正方形纸或塑料布等，将粉末置于它的上面，提起塑料布一角，使粉末流向对角，反复将四角提起，使粉末移动混合均匀，划一“+”字，分成四份，去掉对角两份，收取另外对角两份。几何法——把整个一堆物品看成为一种有规则的几何立方体（正方形、圆柱形、圆锥形、圆台形等），取样时首先把这个几何分为若干体积相等的部分（想象这些部份必须在全体中分布得均匀，即不只是在表面或只在一面。从这些部份中取出体积相等的样本，这些样本称为支样，再把这些支样混合，即得到初级样本。二、取样方法在各类不同物品上的应用：1、谷实类、糠麸、油粕、混合饲料类（均匀）①“几何法”②“四分法”2、单相液体或搅拌均匀的籽实或粉末。（均匀）如：玉米粉、玉米、碗豆、血粉、鱼粉、清油等。象上述这样一类物品可以采取何一部分作为分析样本。如果是袋装样品；10袋以下每袋取；10-100袋，随机选取10袋；100袋以上，从10个包装单位取样，每增加100个包装单位，需补采3个单位。2采回的样品再“四分法”缩减。3、青饲料、青贮、干草藁秆（不均匀）①“几何法”、②“四分法”4、块根、块茎和瓜类饲料（不均匀）一般的块根、块茎饲料10-20个马铃薯（土豆）50个胡萝卜（红萝卜）20个南瓜10个洗净后，用布擦去表面水分，切碎后，用“四分法”再进行分析用的样本的制备手续。5、肉类：根据则试要求和目的不同可分为（不均匀）①分析整体的成分：除去污物，精确地对剖为两片，在1-1.25个大气压下，蒸煮2-8小时（内脏、血液2-3小时），猪屠体7-8小时，趁热切碎磨成浆，以免脂肪分离，不能损失，以免影响分样结果。②分析某一组分的含量（如肌肉、脂肪）可局部采样。此外还应对样品进行较详细的描述。（1）样品名称（包括一般名称，学名，俗我）；（2）生长期；（3）收获期；（4）贮存条件；（5）外观性状；（6）混杂度；（7）采集部位；（8）原料或辅料的比例；（9）加工方法；（10）出厂时间；（11）等级及容量；（12）成熟程度；（13）分析人和采样人。三、实验目的：掌握新鲜样本的采集及初水份的测定，风干样本的采集与制备。样本名称、采样地点、采样日期、制样日期等。四、操作步骤：①初水的测定：将搪瓷盘洗净用蒸馏水冲洗2-3次，编号，放入65℃烘箱中烘干，冷却至室温，在电子天平上称重，作记录，一般要求空搪瓷盘称恒重，即两次相差小于0.2克，备用。采集新鲜菜叶（随机取样，要做到各个部位尽量采集到）约3斤，放入塑料布上，用剪刀剪成2-3厘长，用竹筷混合均匀，再采用“四分法”混合，用竹筷采集100克左右新鲜样品（不超过搪瓷盘表面为准），再放在电子天平上称重，并作记录，放入105℃烘箱中灭菌30分钟，再降至65℃烘烤8-12小时。取出冷却24小时（或移入CaCl2为干燥剂的干燥器内冷却30分钟后称重）、称重，作记录，再放入65℃烘箱中烘烤1小时，再冷却24小时，称重，作记录。两次相差小于0.5克为恒重。否则再烘烤再称重，直至恒重。100)()65()(%×°−=gCgg新鲜样本重半干样本重新鲜样本重初水32、风干样品的采集与制备：将样品（混合料），放入塑料布上，用不锈钢铲将混合料，依次从顶部堆成圆锥形，反复2-3次，然后平整成圆台，采用“几何法”用采样器采集各个部位，采集约1kg左右，放入塑料布中，再用“四分法”采样，收集约250克作为分析样本，粉碎（通过40目），混匀，备用，同时作记录（时间、地点、名称、采样人等）。备注：40目：即孔径为0.42毫米；（用作常规分析）网线直径为0.249毫米60目：孔径0.250mm网线直径0.163mm80目：孔径0.177mm网线直径0.119mm（用作微量元素分析）100目：孔径0.149mm网线直径0.102mm（用作微量元素分析）实验二饲料中干物质的测定一、实验目的：测定配合饲料及单一饲料中干物质量。二、实验原理：饲料中营养物质，包括有机物质与无机物质均存在于饲料的干物质中。饲料中干物质含量的多少与饲料的营养价值及家畜的采食量均有密切的关系，风干饲料例如各种籽实饲料、油饼、糠、麸、藁秕、青干草、鱼粉、血粉等可能直接在100-105℃温度下烘干，烘去饲料中蛋白质、淀粉及细胞膜上的吸附水，得到风干饲料的干物质量。含水分多的新鲜饲料如青饲料、青贮饲料、多汁饲料以及畜粪和鲜肉等均可先测定初水分后制成半干样本；再在100-105℃温下烘干，测定半干样本的干物质量，而后计算新鲜饲料或鲜粪或鲜肉中干物质量%。测定尿中干物质法，系将定量的尿液吸收于已知重量的滤纸上，烘干滤纸，再吸收一定量的尿，再烘干，重复数次。吸收尿液的烘干滤纸重量减去原滤纸重量即为吸收尿液总量的干物质量。三、实验步骤：将称量瓶洗净用蒸馏水冲洗2-3次，放在100-105℃的烘箱中，开盖烘烤1小时，用坩埚钳取出称量瓶，并移入有变色硅胶（变色硅胶变红时需在105℃烘箱中烘干成兰色）的干燥器中冷却30分钟后，在电子分析天平上称重（称量瓶放入烘箱时须启盖，冷却和称重时须严盖），作记录；再放入105℃烘箱中烘烤1小时，用坩埚钳取出称量瓶，并移入干燥器中，冷却30分钟后再称重，两次相差小于0.0005克为恒重，否则再烘直到恒重。用差减法在电子分析天平上称取2克（准确至0.1毫克）风干样本于已知重量的称量瓶中，将称量瓶和风干样本一并放入105℃烘箱中，并将称量瓶盖揭开少量，烘5-6小时后，移入干燥器中，并盖紧瓶盖，冷却30分钟，在电子分析天平中称重；再将盛有样品的称量瓶4放入105℃烘箱中烘1小时，用坩埚钳取出，放入干燥器中并盖紧称量瓶，冷却30分钟，称重，作记录。直至前后两次称重量的差数小于0.002克为恒重，进行计算。计算时，采用两次称重中的最低值，参加计算。四结果计算：风干样本中105℃干物质%=%100)()(105×°克风干样本重克干物质重C注：如果用已测定过65℃烘箱中烘干的半干样本，则在测半物质中的干物质时，须在65℃烘箱中烘1小时，而后移入干燥器中冷却30分钟再称重，这样可减少半样本在磨碎制样过程中由于吸收空气中水份而引起的误差。新鲜样本中干物质%=新鲜样本65℃干物质%×半干样本105℃干物质%（或新鲜样本中空气干燥干物质%）原试样总水分（%）=预干燥减重（%）+[100-预干燥减重（%）]×风干试样水重（%）实验三饲料中粗脂肪（醚浸出物）的测定一、实验目的：掌握饲料及畜体、畜产品及粪中粗脂肪测定方法，并能够测定各类饲料中粗脂肪含量。二、实验原理：饲料的油脂均可溶解于乙醚中，用乙醚反复浸提饲料中的脂肪，并使溶有脂肪的乙醚流集于盛醚瓶，而后将乙醚蒸发，瓶中所剩残渣的重量为饲料的脂肪量。此为索氏测定脂肪法的原理。饲料被乙醚所溶解的物质中，除真脂肪外，尚有麦角固醇、胆固醇、脂溶性维生素、叶绿素等。由于所得油脂残渣不纯，故称为粗脂肪。因此法测定是一种概略测定法，准确度不高。如植物种子的乙醚提取物中真脂肪有86%，青绿饲料的乙醚提取物中真脂肪量极少（小于20%，大部分为叶绿素）。测定脂肪所用饲料样品必须烘干，因样品中水份可影响乙醚的浸提和蒸发过程。实际测定脂肪时，不是测定胆肪的重量，而采用间接测定法——通过测定脂肪包的重量，来间接计算出脂肪的含量。（鲁氏残留法或间接法）三、实验步骤：索氏脂肪抽出器由三个部分组成，下部为盛醚瓶，中间为浸提管，上部为冷凝。管冷凝管上端加棉花塞，以防乙醚逸失。抽脂前将盛醚瓶和浸提管洗净烘干。（如要采用直接测定，则要放入干燥器中冷却后，在电子天平上称恒重）。5将称量瓶编号洗净烘干，将滤纸包折好，准确称取风干样本2克左右（准至0.0001克）于滤纸包中，折好，编号（与称量瓶同号），滤纸包长度不能高于虹吸管高度的2/3为宜，将称量瓶及样本滤纸包放入105℃烘箱中烘6小时除去水分，将称量瓶及滤纸包放入干燥中冷却30分钟，在电子分析天平上称重，再放入105℃烘箱中烘1小时，取出放入干燥器中冷却30分钟，再称重，直至恒重。恒重后，将滤纸包放入索氏抽脂器中，倒入乙醚，浸泡2小时左右、抽脂4小时（乙醚冷却速度5-6滴/秒）至16小时（2-3滴/秒），加热水浴锅，使水温保持60℃左右，乙醚在盛醚瓶中蒸发，乙醚蒸气至冷凝管处冷凝为液体，仍流回浸提管中，再经虹吸管回流到盛醚瓶中，如此反复循环。直至将脂肪浸提干净（用一张10×10cm2的滤纸，将滤纸包放在滤纸上，待乙醚挥发完后，滤纸上无痕迹就以为脂肪浸提干净。提取完毕后，移去上部的冷凝管，取出样本包，放入称量瓶中，将称量瓶及样本包移入105℃烘箱中，瓶盖、半开以免醚气燃烧起火。初烘时烘箱门半开，烘3小时，取出放入干燥器中冷却30分钟称重、记录，直至恒重（小于0.002克），称量瓶及样本包抽脂后失去的重即为脂肪重。四结果计算：脂肪%=×100%)(105105克风干样本重后重样本滤纸包及称量抽脂脂前重样本滤纸包及称量瓶抽CC°−°=%100)()(×gg风干样本重脂肪重实验四饲料中钙的测定（高锰酸钾法）一实验目的：掌握应用容量法测定饲料中钙含量，并用以测定各种样本的钙含量。二、实验原理：样本中有机物质经硝酸和高氯酸消化（或用硝酸、高氯酸和浓硫酸消化）或样本经灰化后用酸处