Septin9基因甲基化检测操作说明

整理文档很辛苦,赏杯茶钱您下走!

免费阅读已结束,点击下载阅读编辑剩下 ...

阅读已结束,您可以下载文档离线阅读编辑

资源描述

Septin9基因甲基化检测1.3.5ml血浆+3.5ml裂解液,涡旋混匀,RT静置10min。2.加入90ul混匀磁珠、2.5ml无水乙醇,颠倒混匀5-6次,10-20rpm旋转混匀40-50min。3.取下15ml离心管,置于磁力吸附架,弃上清。4.加入1.5ml洗液A,涡旋重悬磁珠,转移到2.0ml离心管,置于磁力吸附架上。5.吸附磁珠,弃上清;短暂离心,再次吸弃上清。6.加入100ul洗脱液,涡旋混匀,80℃1000rpm震荡10min。7.短暂离心,置于磁力吸附架,收集洗脱液至新的2.0ml离心管。(4℃可保存24h,不可冷冻)8.加入150ul亚硫酸盐溶液、25ul保护液,涡旋混匀,80℃静置孵育40-50min。9.降温震荡仪至23℃;离心管中加入1000ul洗液A,20ul磁珠,涡旋混匀,23℃1000rpm震荡40-50min。10.短暂离心,置于磁力吸附架,弃上清。11.加入800ul洗液A,涡旋洗涤磁珠,离心吸附弃上清;12.加入800ul洗液B,涡旋洗涤磁珠,离心吸附弃上清;13.加入400ul洗液B,涡旋洗涤磁珠,离心吸附弃上清;14.再次离心吸附弃上清x2。15.室温干燥10min。16.加入60ul洗脱液,涡旋混匀,23℃1000rpm震荡10min。17.短暂离心,吸附。PCR反应液:每个反应配置32ulPCR反应液+1.6ulTaq酶。

1 / 1
下载文档,编辑使用

©2015-2020 m.777doc.com 三七文档.

备案号:鲁ICP备2024069028号-1 客服联系 QQ:2149211541

×
保存成功