动物生理学实验报告

专业班级：学号：姓名：同组人：实验日期：年月日室温：大气压：实验序号：一实验名称：动物生理学实验基础知识介绍一、实验目的掌握生理学实验的基本方法和技术，了解是生理学实验设计的基本原则，培养科学的思维方法、实事求是的科学态度和严谨的学风，通过书写实验报告，提高分析、归纳问题及文字表达能力。二、实验原理生理学是建立在实验和观察基础上的学科，生理学实验是生理学理论知识的依据与来源。生理学实验方法一般可分为离体实验法和在体实验法两类。在体实验法又可分为急性实验和慢性实验两种。生理学实验仪器一般由刺激系统、探测系统、信号调节系统和记录系统四大部分组成。三、主要仪器、试剂、材料及装置图1、手术器械：手术刀、手术剪、手术镊、眼科剪、眼科镊、毁髓针、止血钳、玻璃分针等2、生理仪器：生物信息采集系统、刺激器、示波器、传感器、肌槽、蛙心夹等3、试剂：任氏液、台氏液、乙酰胆碱、肾上腺素等四、实验步骤、现象及记录1、教师提出生理学实验的要求2、讲解生理学的常规实验方法3、展示生理学仪器和器械，并简单讲解用途五、实验结果及数据处理六、实验讨论及思考题解答1、生理学实验的重要性在于何地？生理学实验有什么具体的要求和规则？答：生理学实验的重要性在于学习生理学的实验方法及科学的思维方法，有助于提高学生的实验能力、分析能力、创新能力和科学素养。生理学实验要求：实验前认真预习实验指导，复习相关理论知识；实验中，认真听讲，按要求进行各项实验操作，仔细认真求实的记录实验数据；实验后，整理实验台面，处理实验废弃物和实验动物，检查实验设备及器械，认真分析实验数据，撰写实验报告。2、生理学实验报告的一般格式、内容和要求是什么？答：格式与内容参照楚雄师院化生系化学与生命科学实验室实验报告的标准格式内容。填写实验报告要求数据真实，不允许编造数据，认真分析总结实验中的问题。3、举例5种常用手术器械的名称、持握方法和用途。4、举例3种生理学实验常用仪器设备的性能和主要用途。专业班级：学号：姓名：同组人：实验日期：年月日室温：大气压：实验序号：二实验名称：神经与肌肉的生理活动观察一、实验目的1、掌握两栖类动物神经肌肉标本制备技术2、掌握肌肉收缩种类及其刺激条件3、学习电刺激器、生理信号放大器和计算机处理系统的使用方法。4、观察蛙坐骨神经干动作电位的基本波形，并了解其产生的基本原理。二、实验原理1、腓肠肌由许多肌纤维组成，刺激腓肠肌时，不同的刺激强度会引起肌肉的不同反应。当刺激强度过小时，不引起肌肉发生收缩反应，此时的刺激为阈下刺激。当全部肌纤维同时收缩时，则出现最大的收缩反应。这时，即使再增大刺激强度，肌肉收缩的力量也不再随之加大。可以引起肌肉发生最大收缩反应的最小刺激强度为最适刺激强度。2、肌组织对于一个阈上强度的刺激，发生—次迅速的收缩反应，称为单收缩。单收缩的过程可分为3个时期：潜伏朗、收缩期和舒张期。3、两个同等强度的阈上刺激，相继作用于神经—肌肉标本，如果刺激间隔大于单收缩的时程，肌肉则出现两个分离的单收缩；如果刺激间隔小于单收缩的时程而大于不应期，则出现两个收缩反应的重叠，称为收缩的总和。当同等强度的连续阈上刺激作用于标本时，则出现多个收缩反应的叠加，此为强直收缩。当后一收缩发生在前一收缩的舒张期时，称为不完全强直收缩；后一收缩发生在前一收缩的收缩期时，各自的收缩则完全融合，肌肉出现持续的收缩状态，此为完全强直收缩。4、神经干在受到有效刺激后，可以产生动作电位，标志着神经发生兴奋。如果在神经干另一端引导传来的兴奋冲动，可以引导出双相的动作电位，如在两个引导电极之间将神经麻醉或损坏，则引导出的动作电位即为单相动作电位。神经细胞的动作电位是以“全或无”方式发生的。坐骨神经干是由很多不同类型的神经纤维组成的，所以，神经干的动作电位是复合动作电位。复合动作电位的幅值在一定刺激强度下是随刺激强度的变化而变化的。三、主要仪器、试剂、材料及装置图1、实验材料：蛙2、实验仪器：手术器械、玻璃管、固定针、锌铜弓、生物信号采集系统、张力传感器、双针形露丝刺激电极、双凹夹、示波器、电子刺激器、微电极放大器、解剖显微镜、神经屏蔽盒（兼肌槽）、蛙板、支架、培养皿或不锈钢盘、污物缸、滴管、纱布、棉线3、实验试剂：任氏液；3MKCl溶液。四、实验步骤、现象及记录1、坐骨神经—腓肠肌标本制备：毁髓剥皮分离后肢分离神经游离腓肠肌分离股骨头铜锌弓检验标本活性。2、坐骨缝匠肌标本制备：毁髓剥制后肢标本剪断梨状肌金额坐骨神经分离缝匠肌及其神经铜锌弓检验标本活性。3、如图连接标本和电极、张力传感器，连接生理信号采集系统。刺激肌肉，记录收缩曲线。4、刺激坐骨神经，记录曲线。5、将神经肌肉标本置于神经屏蔽盒中，再连接计算机，刺激神经，记录曲线。6、取另一条蛙腿，分离并结扎坐骨神经，游离并结扎缝匠肌，制成坐骨神经风匠肌标本。五、实验结果及数据处理1、刺激强度与骨骼肌收缩反应的关系2、骨骼肌单收缩分析3、骨骼肌收缩的总合4、坐骨神经-腓肠肌强直收缩曲线5、神经干双向动作电位六、实验讨论及思考题解答1、剥去皮肤的后肢能用自来水冲洗吗？为什么？答：不能，低渗透压可能导致标本脱水和活性丧失。2、如何保持标本在实验过程中机能的稳定性？答：制作标本动作迅速准确；常用任氏液湿润标本；选择合适的刺激强度和时间。3、根据实验结果阐述骨骼肌的生理特性。专业班级：学号：姓名：同组人：实验日期：年月日室温：大气压：实验序号：三实验名称：动物常用采血方法及血细胞计数一、实验目的1、掌握动物的几种常用采血方法2、掌握红细胞计数、白细胞计数、血小板计数的方法二、实验原理将一定量的血液经一定倍数的等渗盐水稀释后，置于血细胞计数板的计数室内，计数一定容积溶液内的红细胞、白细胞和血小板，然后再推算出1mm3或1L血液内的各种细胞数。三、主要仪器、试剂、材料及装置图1、实验材料：家鸽、小鼠、家兔2、实验仪器：显微镜、离心机、37℃水浴、毛细采血管、血球计数板、滴管、小试管、注射器、手术剪、酒精棉球、污物缸3、实验试剂：(1)红细胞稀释液：NaCl0.5g；NaSO42.5g；HgCl20.25g；蒸馏水定容至100ml。(2)白细胞稀释液：冰醋酸2.0ml；1%龙胆紫（或1%美兰）1ml，蒸馏水定容至100ml。(3)血小板稀释液：尿素10-13g；柠檬酸钠0.5g；40%甲醛溶液0.1ml，蒸馏水定容至100ml。四、实验步骤、现象及记录1、动物的几种采血方法介绍与实践：心脏采血法、兔耳中央动脉采血法、鼠尾静脉采血法、翼根静脉采血法2、红细胞计数、白细胞计数、血小板计数：上述采血法采到的血液，分别用不同的稀释液稀释后，在显微镜下使用血球计数板计数。五、实验结果及数据处理家兔红细胞数约为5.7×106/mm3，白细胞数约为9.0×103/mm3，血小板数约为2.8×105/mm3。小鼠红细胞数约为9.3×106/mm3，白细胞数约为8.0×103/mm3，血小板数约为2.0×105/mm3。家鸽红细胞数约为3.2×106/mm3，白细胞数约为2.1×103/mm3，血小板数约为6.0×103/mm3。六、实验讨论及思考题解答1、列举5种动物采血方法。心脏采血法、兔耳中央动脉采血法、鼠尾静脉采血法、翼根静脉采血法、狗后肢静脉采血2、简述各种血细胞的基本功能。3、在操作过程中，哪些因素会影响血细胞计数的准确性？五、实验结果及数据处理家兔红细胞数约为5.7×106/mm3，白细胞数约为9.0×103/mm3，血小板数约为2.8×105/mm3。小鼠红细胞数约为9.3×106/mm3，白细胞数约为8.0×103/mm3，血小板数约为2.0×105/mm3。家鸽红细胞数约为3.2×106/mm3，白细胞数约为2.1×103/mm3，血小板数约为6.0×103/mm3。六、实验讨论及思考题解答1、列举5种动物采血方法。心脏采血法、兔耳中央动脉采血法、鼠尾静脉采血法、翼根静脉采血法、狗后肢静脉采血2、简述各种血细胞的基本功能。3、在操作过程中，哪些因素会影响血细胞计数的准确性？专业班级：学号：姓名：同组人：实验日期：年月日室温：大气压：实验序号：四实验名称：出血时间、凝血时间与红细胞溶解和血红蛋白测定一、实验目的1、学习出血时间、凝血时间测定的基本方法2、熟悉测定出血时间和凝血时间的意义3、了解血液凝固的基本过程及加速、延缓血液凝固的因素4、学习引起红细胞溶解的各种实验方法，观察溶血现象5、掌握测定血红蛋白含量的基本方法——比色法二、实验原理1、血液流出血管后会迅速凝固，凝血过程是一种发生在血浆中由多种凝血因子参与的连锁反应，可分为三个阶段：凝血酶原激活物形成、凝血酶形成、纤维蛋白形成。凝血系统包括内源性和外源性两套系统。2、出血时间指血液从皮肤针刺创口内流出到自动停止流出所需要的一段时间。常用于检查机体生理止血功能是否正常，初步了解毛细血管功能及血小板功能是否正常。凝血时间是血液流出体外时起至在体外自动凝固时止所需要的时间。凝血时间用于检查血液本身的凝血过程是否正常，而与血小板和毛细血管功能关系较小。检测凝血时间的方法有玻片法、试管法和毛细管法等。3、红细胞在高渗氯化钠溶液中，会失去水分发生皱缩；在低渗氯化钠溶液中，会因过多水分进入红细胞而膨胀，甚至破裂，使血红蛋白释出，此即红细胞溶解。红细胞对低渗溶液具有不同的抵抗力，这种抵抗力与红细胞表面积/体积比值有关，也即红细胞有不同的渗透脆性，表面积／体积比值小者抵抗力小(渗透脆性大)；反之，抵抗力大(渗透脆性小)。各种有机溶剂、酸、碱等都会使红细胞膜发牛溶解或破坏，血红蛋自释出，此即红细胞的化学性溶血。发生溶血后，残留的红细胞膜碎片被称为“血影”。4、测定血红蛋白的方法有很多，常用比色法。目测比色酸化法的原理是在一定量血液中加入少许盐酸，是红细胞膜破坏，并将细胞内的亚铁血红素转变为高铁血红素而呈现稳定的棕色。将其用蒸馏水稀释后与血红蛋白计的标准色进行目测比色，即得每100ml血液所含的血红蛋白克数或百分率。三、主要仪器、试剂、材料及装置图1、实验材料：家鸽、小鼠、家兔2、实验仪器：一次性定量毛细取血管（10μl-20μl）、移液管（1ml、2ml、5ml）、滴管、小试管、5ml试管、试管架、注射器、一次性刺血针、血红蛋白计、秒表、污物缸3、实验试剂：①171mMNaCl溶液②0.9%NaCl溶液③3.8%柠檬酸钠溶液④5%柠檬酸钠溶液⑤0.1mol/LHCl四、实验步骤、现象及记录1、出血时间测定：在皮肤表面做成针刺创口，让血液自然流出，不得用手挤压出血部位。从出血后开始每隔半分钟用滤纸吸去血滴一次，不能触及皮肤，直至血流停止。记录开始出血至停止出血的时间间隔。2、凝血时间测定：玻片法滴管采血后让血滴自然下滴到玻片上开始计时，血滴不应小雨黄豆大小。在室温下自然凝固，每隔半分钟轻挑一次，若有细血丝挑起，即为凝固，停止计时。3、血沉：采血后置于血沉管中观察记录。红细胞渗透脆性：配置不同浓度的低渗氯化钠溶液，分别加入血液，观察各管的溶血情况。4、血红蛋白含量测定：血红蛋白计目测比色法①用滴管滴加0.1mol/LHCl至血红蛋白计稀释管的刻度10处；②针刺表皮血管，用一次性毛细取血管采血20微升；③擦净毛细却血管尖多余血迹，将毛细管插入血红蛋白计稀释管的盐酸溶液中，吹出血液至管底，混匀，静止10min。④将稀释管插入血红蛋白计，用滴管向其中逐滴加入蒸馏水至颜色与标准玻璃色柱颜色一致。读出此时稀释管上的液面的读数。即为100ml血液中血红蛋白的克数。五、实验结果及数据处理家兔凝血时间约为7.5-10.2s，血红蛋白量约为11.9g/100ml血液。小鼠凝血时间约为24-40s，血红蛋白量约为14.8g/100ml血液。家鸽凝血时间约为23-34s，血红蛋白量约为12.8g/100ml血液。六、实验讨论及思考题解答1、简述生理性止血的过程。2、哪些因素会影响出血时间和凝血时间？3、如何判定红细胞的最大脆性和最小脆性？4、测定血红蛋白含量的实际意义，血红蛋白具有什么功能？专业班级：学号：姓名：同组人：实验日期：年月日