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第一节菌种的类型一、什么是菌种？狭义地讲，菌种即经工人培养并供进一步扩大繁殖用的食用菌的纯菌丝。一般是具有结实能力的双核菌丝。一级种培养基制备种菇或种木选择种菇或种木处理原始母种培养基制备原始母种一级母种转管扩繁二级种培养基制备二级种保存三级种培养基制备三级种制种流程二、菌种类型1.原始母种是由孢子萌发或由菇体组织分离而得的食用菌的纯菌丝。除单孢子分离外，所获得的纯菌丝一般具有结实能力，称为原始母种。2.再生母种由于生产需要，原始母种往往要经过一、两次的转管扩大培养，转管后的母种称为再生母种。3.原种是由再生母种扩大繁殖而得的食用菌纯菌丝。一般1支再生母种可以扩繁6-8瓶原种。4.栽培种由原种进一步扩大繁殖而得的食用菌纯菌丝。可以直接用于生产栽培。一般每瓶原种可以扩繁30-80瓶栽培种。第二节菌种场的建设一、建场原则1.地理位置要求地形开阔，地势高燥，交通运输、水电方便。2.环境要求环境清洁，空气清新，周围50米以内要没有酱醋作坊、牧场、畜禽圈舍及饲料库和“三废”排放的工厂3.房室要求各个房间要能密闭、保温、通风且光线充足，内墙壁的四角要砌成半圆形，最好防水涂料刷白室内外应用水泥或砖石铺设以便清洗和消毒。若有条件，各个房间都要安装水电及暖气设施。三、建筑布局菌种厂的厂房应按照配制培养基→蒸汽灭菌→分离或接种→菌丝培养的程序进行平面布局，相应安排配料间灭菌间、接种室和培养室，使其形成一条流水作业的生产线，以提高制种工效和保证菌种的质量。（一）简易菌种场的平面布局工具库原料库洗涤室配料装料室灭菌室冷却室缓冲间实验室接种室原种培养室栽培种培养室存放室办公室大门冷却室晒料场（拌料场）接种室一接种室二母种室灭菌设备灭菌设备装瓶（袋）机1拌料机工作车间日光温室群绿化区厕所辅料库一辅料库二工具库一工具库二主料库一主料库二培训室文化室锅炉房煤场值班室办公室宣传室实验室栽培种室（冷藏库）原种室二、标准食用菌实训基地平面规划图（三）规范化菌种场的平面布局1.每天菌种生产量与冷却室、接种室、培养室的面积应当适应。经验比例：500：5：1：362.培养基制作、灭菌、冷却、接种应当一条龙流水作业。3.冷却室和接种室在条件不允许情况下可经两室合用，冷却后用塑料膜在室内架起临时接种室进行接种。4.资金使用的重点应放在灭菌、冷却、接种三处的设备和室内标准化设置上。5.如菌种场等，应设在当地主要风向的上风头；带污染源的库室，如原料库等，应设在当地主要风向的下风头。6.原料库、晾晒场应远离冷却室、接种室和培养室7.灭菌锅应是双门的，一门与有菌区（培养基制作室）相通，另一门与无菌区（冷却室）相通，双门不能同时开放。8.冷却室、接种室要求作水磨石或油漆地面，四周墙壁和天花板油漆防潮，安装空气过滤装置。冷却室配备除湿和强制冷却装置，接种室配备分离式空调机。9.培养室要有足够的空调装置，保证高温季节能正常生产10.工作人员必须具有一定微生物常识，经过严格无菌操作训练，进入无菌区前须沐浴更衣。11.菌种灭菌后的运输工具必须灭菌或消毒后，方可进入无菌区使用。12.冷却室、接种室、培养室均采用拉门结构，减少开关式门扇启动过程的空气流通。13.保持冷却室、接种室的气压为正值，大约高出室外0.3－0.5大气压，其中接种室气压又要大于冷却室，冷却室大于缓冲室和培养室。14.栽培试验场与制种场应当分开，不能同时在一处或相距很近的地方。15.培养基制作室和其他仓库实验室为有菌区，冷却室、接种室、培养室为无菌区，其中冷却室、接种室为高度洁净的无菌区，要求空气净化程度达到100级（按国际标准，凡是达到≧0.5um尘埃的量≦3.5粒/l，即洁净度达到100级，表示环境中无尘无菌。思考题：1.菌种厂的选建有哪些要求2.（规范化菌种厂在布局上）哪些房室为有菌区哪些房室为高度无菌区和一般无菌区。3.你认为无论何级别的菌种厂的建场与布局都围绕着哪一个关键点？第二节制种设备用品的配备一、菌种制作常用的基本药品（一）一级菌种常用的化学药剂（分析纯）葡萄糖、蔗糖、蛋白胨、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾麦芽浸出膏、酵母浸出膏、硫酸镁、氢氧化钠、盐酸、PH试纸（二）二、三级菌种常用的化学品（工业级）石膏、碳酸钙、石灰、硫酸镁、过磷酸钙、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾二、基本器具（一）玻璃器皿1.试管2.三角瓶3.培养皿4.漏斗5.烧杯6.酒精灯7.菌种瓶8.试剂瓶（二）衡量器具1.天平2.杆秤3.磅秤4.量杯、量筒等（三）基础设备药品柜、工作台、铝锅、纱布、电炉、铲子扫把等。三、配料设备1.切片机将木材切成规格木片的专用机械。2.粉碎机将木片、秸秆等原料粉碎成一定粗细度碎屑的专用机械。QS450－4型枝桠切片粉碎机1800元QS－42型秸秆粉碎机1350元FS-42型原料粉碎机1400元3.筛选机用于清除木屑中的块、碎木等杂物用的专用机械。培养料筛选机：3吨湿料/小时4.搅拌机将培养料通过搅拌使其分布充分均匀的专业机械JB－40型原料搅拌机600元5.装瓶机将培养料装入菌种瓶的专用机械。PZP－16型食用菌培养料装瓶机装瓶能力：3000－4000瓶/小时6.挖瓶机将培养料从菌种瓶中挖出的专用机械。SWP－16型食用菌培养料挖瓶机挖瓶能力：1500－2000瓶/小时7.装袋机将搅拌混合均匀后适湿的培养料填入塑料薄膜筒内的机械ZD－A型螺旋装袋机920元BD－140型播种装袋机1650元四、灭菌设备（一）高压灭菌锅主要用于培养基、接种工具等的灭菌。1.手提式高压蒸汽灭菌锅2.立式高压灭菌锅ZG－80型蒸汽灭菌锅0.68立米3600元3.圆形卧式高压灭菌锅（二）常压灭菌锅所有常压灭菌锅均由灭菌锅和蒸汽发生系统两部分组成，各地有各种各样的形式。土蒸锅五、接种设备1.无菌室2.要求：①严密、光滑、清洁。3.②分内外两间，外间为缓冲间，可放置工作4.服、拖鞋、帽子、口罩、消毒用的药品、手持喷雾器5.污物桶等6.③采用推拉门，顶部安装小型排风扇，除照明7.灯源外，吊装紫外线灯8.④应有工作台、接种箱或超净工作台9.⑤常备器具：桌、椅、酒精灯、接种工具、酒10.精棉球瓶、记号笔等2.超净工作台是一种局部净化空气的设备，利用预过滤器和高效过滤器使空气以垂直或水平层流状态通过操作区以达到相对无尘无菌状态。3.接种箱①缩小的接种室②多采用长143cm、宽86cm、高159cm一人或双人操作③上层两侧安装玻璃，易开启④中部两侧留两个直径为15cm的圆孔，孔口上装40cm长的套袖4.接种工具六、培养设备1.恒温箱2.培养一级种和少量二级种。2.培养架二级种菌种架的层距应取瓶高＋15cm（共35cm）顶层离顶板45cm，底层离地面40cm层宽应取瓶径×5＋5（约50cm）层板最好用5cm窄的铺板，间距1cm，以保证上下层对流。七.菌种保藏设备电冰箱、保藏柜（4－5℃）八.液体发酵设备