羊的人工授精技术及操作要点

羊的人工授精技术及操作要点羊人工授精是人为的利用器械采取公羊的精液，经过品质检查和一系列处理，再通过器械将精液输入发情母羊生殖道内，达到母羊受胎的配种方式。人工授精可以提高种公羊的利用率，既加速了羊群的改良进程，防止疾病的传播，又节约饲养大量种公羊的费用。人工授精技术包括器械的消毒、采精、精液品质检查、精液的稀释、保存和运输、母羊发情鉴定和输精等主要技术环节。一、消毒技术1.器械的消毒采精、输精及与精液接触的所有器械都要消毒，并保持清洁、干燥，存放在清洁的柜内或烘干箱中备用。假阴道要用2%的碳酸氢钠溶液清洗，再用清水冲洗数次，然后用75%的酒精消毒，使用前用生理盐水冲洗。集精瓶、输精器、玻璃棒和存放稀释液及生理盐水的玻璃器皿洗净后要经过30分钟的蒸气消毒，使用前用生理盐水冲洗数次。金属制品如开膣器、镊子、盘子等，用2%的碳酸氢钠溶液清洗，再用清水冲洗数次，擦干后用75%的酒精或进行酒精灯火焰消毒。2.场地的消毒准备一间向阳、干净的配种无菌室，要求地面平整，光线充足，面积为10～12平方米，室温为18℃～25℃。也可选择宽敞、平坦、清洁、安静的室外场所。日常消毒用1%新洁尔灭或1%高锰酸钾溶液进行喷洒消毒，每日于采精前和采精后各进行1次。每星期对采精室进行1次熏蒸消毒，所用药品是40%的甲醛溶液500毫升，高锰酸钾250克。3.羊体的消毒公羊实施配种前和情期母羊实施配种前，用1%新洁尔灭溶液对羊体进行反复消毒。4.消毒应注意的问题严格遵守消毒时间和消毒药品的配量要求;熏蒸消毒时，应关闭门窗，第2天应提前1小时到岗，敞开门窗;注意安全，防止物品损坏，每次消毒完毕，应及时关掉电源。二、采精技术1.采精前的准备（1）器械的准备：所有的器械都要提前清洗、干燥、消毒，存放于消毒柜内备用。（2）公羊的准备：种公羊第一次采精时的年龄应在1.5岁左右，不宜过肥，也不宜过瘦，初次参加采精的公羊，应先进行采精训练，方法是让其“观摩”其他公羊配种;或用发情母羊的尿液或分泌物涂抹在公羊鼻尖上，刺激性欲。采精调教训练成功后，才能进行正式操作。（3）假阴道的安装：安装假阴道时，先将内胎装入假阴道外壳，再装上集精瓶，注意内胎平整，不要出现皱褶。为保证假阴道有一定的润滑度，用清洁玻璃棒蘸少许灭菌凡士林，均匀涂抹在假阴道内胎和前三分之一处。为使假阴道温度接近母羊温度，从假阴道注水孔注入少量温水，使水约占内外胎空间的70%，假阴道温度在采精时应保持在40℃～42℃。注水后，再通过气体活塞吹入气体，使假阴道保持一定弹性，吹入气体的量一般以内胎表面呈三角形合拢而不向外鼓出为适宜。2.采精采精前用温水洗种公羊阴茎的包皮，并擦干净。将台羊保定后，引公羊到台羊处，采精时采精员站立在公羊的右侧，当种公羊爬跨时，迅速上前，右手持假阴道靠在母羊臀部，其角度与母羊的阴道的位置相一致（与地面成35～45度角），用左手轻托阴茎包皮，迅速将阴茎导入假阴道中。羊的射精速度很快，当发现公羊有向前冲的动作时即已射精，要迅速把装有集精瓶的一端向下倾斜，并竖起集精瓶，送精液到处理室，放气后取下集精瓶，盖好盖，并记录公羊号，放于操作台上进行精液品质检查。3.采精频率成年种公羊每日采精1～2次，连采3天休息1次，初采羊可酌减。4.采精注意事项严格遵守消毒技术要求，所有采精物品未经消毒不得应用。采精训练是一项细致的工作，必须由采精熟练人员负责进行。所用采精器的环境条件必须严格把握，温度要控制在40℃～42℃。三、精液品质检查精液品质检查的目的是为了评定精液品质的优劣，以便决定它能不能用于输精配种，同时，也为确定精液的稀释倍数提供科学依据。1.外观检查（1）颜色：正常的精液为浓厚的乳白色，肉眼可看到乳白色云雾状。（2）气味：正常精液无味或略带腥味。（3）精液量：公羊一次采精的精液量一般为0.5～2.0毫升，山羊平均为0.8～1.0毫升，绵羊平均为1.0～1.2毫升。经外观检查，凡带有腐败臭味，出现红色、褐色、绿色的精液判为劣质精液，应弃掉不用，一般情况下不再做显微镜检查。2.显微镜检查（1）精子活率：精子的活率是指在38℃的室温下直线前进的精子占总精子数的百分率。检查时以灭菌玻璃棒蘸取1滴精液，放在载玻片上加盖玻片，在400～600倍显微镜下观察。全部精子都做直线运动评为1级，90%的精子做直线前进运动为0.9级，以下以此类推。（2）精子的密度：是指每毫升精液中所含的精子数。取1滴新鲜精液在显微镜下观察，根据视野内精子多少分为密、中、稀三级。密是指在视野中精子的数量多，精子之间的距离小于1个精子的长度;中是指精子之间的距离大约等于1个精子的长度;稀为精子之间的距离大于1个精子的长度。为了精确计算精子的密度，可用血球计数器在显微镜下进行测定和计算，每毫升精液中含精子25亿以上者为密，20亿～25亿个为中，20亿以下为稀。（3）精子质量的评定标准：精液为乳白色，无味或略带腥味，精子活力在0.6以上，密度在中等以上（每毫升精液的精子数在20亿以上），畸性精子率不超过20%，该羊精液判为优质精液。以上几项质量标准任何一项达不到要求，均被定为劣质精液。4.精液检查时应注意的问题做显微镜检查时，温检箱内温度控制在38℃左右。精液品质检查要求迅速准确，室内要清洁，室温保持在18℃～25℃。精子的形态检查，一般1周内对同1头公羊精液做1次染色检查，其他时间可根据经验做直观估测。四、精液的稀释、分装、运输和保存1.精液的稀释精液稀释的目的是扩大精液量，增加每次采精的可配母羊数，提高种公羊的利用率，还可供给精子营养，增强精子活力，有利于精液的保存、运输和输精。（1）稀释液的配制：稀释液的配方选择易于抑制精子活动，减少能量消耗，延长精子寿命的弱酸性稀释液。配方一：生理盐水稀释液：是用注射用生理盐水或经过过滤消毒的0.9%氯化钠溶液作稀释液。此种稀释液简单易行，稀释后的精液应在短时间内使用，是目前生产实践中最为常用的稀释液。但用这种稀释液稀释时，稀释的倍数不宜太高，一般以2倍以下为宜。配方二：奶汁稀释液：奶汁先用7层纱布过滤后，再煮沸消毒10～15分钟，降至室温，去掉表面脂肪即可。这种稀释液稀释效果好，但稀释倍数不能太高，以3倍以下为宜。配方三：葡萄糖卵黄稀释液：在100毫升蒸馏水中加葡萄糖3克、柠檬酸钠1.4克，溶解后过滤3～4次，蒸煮30分钟后灭菌，降至室温，再加新鲜卵黄（不要混入蛋白）20毫升，再加青霉素10万单位振荡溶解。这种稀释液有增加营养的作用，可作7倍以下的稀释。（2）精液的稀释倍数：要根据精子密度、活力而定稀释比例，稀释后的精液，每毫升有效精子数不少于7亿个。（3）精液稀释的操作步骤：根据镜检得出精子密度确定稀释倍数，根据稀释倍数计算出应加入的稀释液的量，用量杯量取应加的稀释液量。稀释前将两种液体置于同一温水中，然后将稀释液沿着精液瓶缓缓倒入，为使混合均匀可稍加摇动或反复倒动1～2次，稀释完毕后，立即进行活力镜检，并将镜检结果填人采精登记表。（4）精液稀释应注意的事项：稀释液温度与精液温度保持一致，在20℃～25℃室温和无菌条件下操作，精液稀释的倍数应根据精子密度而定，一般为1～3倍，稀释后的每毫升有效精子数不能低于7亿个。2.精液的分装将稀释好的精液根据各输精点的需要量分别装于2～5毫升小试管中，精液面距试管口不少于0.5～1.0毫升，然后用玻璃纸和胶圈将试管口扎好，在室温下自然降温。分装后贴上标签，标签上注明精液采出的日期、时间、活力、密度、公羊的品种。3.精液的运输在近距离运送精液时，不必进行降温，将装有精液的集精瓶或小试管口封严，用棉花包好放入保温瓶中即可。远距离运输时，可用直接降温法降温。运输精液时要防止剧烈震动，降温或升温都要缓慢进行，每次输送的精液都要注明公羊号、采精时间、精液量和精液品质。4.精液的保存（1）常温保存：精液稀释后，保存在20℃以下的室温环境中。在这种条件下，精子运动明显减弱，可在一定限度内延长精子存活时间。常温保存只能保存1天。（2）低温保存：在常温保存的基础上，温度进一步缓慢降至0℃～5℃之间。可用直接降温法，将精液装入小试管内，外面包以棉花，再装入塑料袋内，直接放入装有冰块的广口保温瓶或保温箱中，使温度逐渐降至2℃～4℃。低温下保存的有效时间为2～3天。（3）冷冻保存：精液的冷冻保存要求的技术、环境和设备条件较严格，操作过程也比较复杂，这里不加详述。五、发情鉴定适时配种是提高羊人工授精受胎率的关键措施之一，母羊发情的主要表现：食欲减退、兴奋不安、嘶鸣、爬跨其他羊或接受其他羊爬跨而静立不动;阴门红肿，频频排尿而流出透明的黏液;用试情公羊与母羊接触（隔着试情架），母羊表现温驯，并将后躯转向公羊，阴门肿胀;用阴道开膣器插入阴道，使之开张，发情盛期的母羊阴道潮红、润滑，子宫颈口开张，分泌的黏液呈豆花样。六、输精1.输精前的准备（1）人员的准备：输精人员应穿工作服，用肥皂水洗手擦干，用75%酒精消毒后，再用生理盐水冲洗。（2）输精器械的准备：把洗涤好的开膣器、输精枪、镊子用纱布包好，一起用高压锅蒸汽消毒。（3）母羊的准备：对发情母羊进行鉴定及健康检查后，才能输精，母羊输精前，应对外阴部进行清洗，以1/3000新洁尔灭溶液或酒精棉球进行擦拭消毒，待干燥后再用生理盐水棉球擦拭。（4）精液的准备：将精液置于35℃的温水中升温5～10分钟后，轻轻摇匀，做显微镜检查，达不到输精要求的不能用于配种。2.输精方法将用生理盐水湿润后的开膣器插入阴道深部触及子宫颈后，稍向后拉，以使子宫颈处于正常位置之后轻轻转动开膣器90度，打开开膣器，开张度在不影响观察子宫的情况下开张的愈小愈好（2厘米），否则易引起母羊努责，不仅不易找到子宫颈，而且不利于深部输精。输精枪应慢慢插入到子宫颈内0.5～1.0厘米处，插入到位后应缩小开膣器开张度，并向外拉出1/3，然后将精液缓缓注入。输精完毕后，让羊保持原姿势片刻，放开母羊，原地站立5～10分钟，再将羊赶走。3.输精次数和输精量输精次数：母羊1个情期应输精2次，发现发情时输精1次，间隔8～10个小时应进行第2次输精。输精量：每头份的输精量，原精液为0.05～0.10毫升，稀释后精液应为0.1～0.2毫升。4.输精时应注意的问题输精人员要严格遵守操作规程，输精员输精时应切记做到深部、慢插、轻注、稍停。对个别阴道狭窄的青年母羊，开膣器无法充分打开，很难找到子宫颈口，可采用阴道内输精，但输精量需增加1倍。输精后立即做好母羊配种记录。每输完一只羊要对输精器、开膣器及时清洗消毒后才能重复使用，有条件的建议用一次性器具。