非特异性梅毒螺旋体试验1.原理:非特异性梅毒螺旋体试验包括性病研究实验室试验(venerealdiseaseresearchlaboratorytest,VDRL),不加热血清反应素试验(unheatedserumreagintest,USR)和快速血浆反应素环状卡片试验(rapidplasmareagintest,RPR)。其原理是梅毒螺旋体可使被破坏的组织细胞释放类脂样物质,螺旋体自身释放亦产生类脂及脂蛋白。这些物质刺激机体产生抗体(IgG或IgM)。这些抗体可与从牛心中提出的心磷脂发生抗原抗体反应。由于非梅毒螺旋体感染引起的各种急性或慢性组织损伤也可产生类似的抗体,所以这种反应是非特异性的,适合用于筛选实验。将标准的心磷脂抗原吸附在特制的活性碳粒上,这种碳粒抗原与患者血清混合在一起后,可以与血清中抗心磷脂抗体起反应在白色纸卡上形成肉眼可见的黑色凝集颗粒。2.试剂:1)RPR检测试剂盒2)移液器3.方法:1)将待检血清及试剂用前放室温平衡(23-29℃),冻干阳性对照血清应在试剂前5分钟用0.2ml生理盐水溶解。2)吸取待检血清50μl,在卡片圈内,并将血清用牙签或吸液嘴扩展到整个圆圈。3)将盒内RPR抗原悬液轻轻摇匀,用专用滴管和针头吸取抗原于每个血清圈内垂直加一滴。4)振荡或摇动8分钟后,立即在明亮光线下用肉眼观察结果。5)如有需要,阳性标本可做1:21:41:81:16和1:32稀释,按定性试验方法作定量试验。4.结果判定:阳性反应:中等或大块黑色凝集块。弱阳性反应:散在的小黑色凝集块。阴性反应:黑色均匀分散无凝集块。必要时应再做TPHA试验确证。5.注意事项:1、本试剂应保存于2-8℃,效期一年。2、如做半定量试验,可将待检血清用生理盐水作倍比稀释,然后按上述方法进行试验,以呈现出明显凝集反应的最高稀释度作为该血清的凝集效价。3、本试验系非特异性反应,需再做TPHA确证。二期梅毒时,如出现弱反应和可疑反应,应将血清稀释,以排除“前带现象”。