三萜及其苷类

第七章三萜及其苷类(TriterpenoidsandSaponins)SectionOneIntroduction一、三萜的定义•定义:由30个碳原子组成的萜类化合物，分子中有6个异戊二烯单位，通式(C5H8)6。•三萜类(triterpenes)在自然界分布广泛，有的游离存在于植物体，称为三萜皂苷元(Triterpenoidsapogenins)；有的以与糖结合成苷的形式存在，称为三萜皂苷(Triterpenoidsaponins)。•因三萜皂苷多溶于水，振摇后可生成胶体溶液，并有持久性似肥皂溶液的泡沫，故有此名。三萜皂苷多具有羧基，故又称其为酸性皂苷。•与甾体皂苷相同，三萜皂苷也具有溶血、毒鱼及毒贝类的作用。二、三萜的分布•三萜类(triterpenes)在自然界分布广泛，菌类、蕨类、单子叶、双子叶植物、动物及海洋生物中均有分布，尤以双子叶植物中分布最多。•主要分布于石竹科、五加科、豆科、七叶树科、远志科、桔梗科及玄参科。含有三萜类成分的主要中药如人参、甘草、柴胡、黄芪、桔梗、川楝皮、泽泻、灵芝等。•少数三萜类成分也存在于动物体，如从羊毛脂中分离出羊毛脂醇，从鲨鱼肝脏中分离出鲨烯；从海洋生物如海参、软珊瑚中也分离出各种类型的三萜类化合物。三、存在形式多以游离或成苷成酯的形式存在苷元：四环三萜、五环三萜常见的糖：葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、鼠李糖，糖醛酸，特殊糖（如芹糖、乙酰氨基糖等）糖链：单糖链、双糖链、三糖链成苷位置：3、28（酯皂苷）或其它位-OH次皂苷：原生苷被部分降解的产物五环三萜类化合物多数三萜皂苷苷元以五环三萜形式存在。其C3-OH与糖结合成苷，苷元中常含有羧基，故又称酸性皂苷，在植物体中常与钙、镁等离子结合成盐。五环三萜主要有下面几种类型：一、齐墩果烷型(oleanane)又称b-香树脂烷型(β-amyrane)，在植物界分布极为广泛。其基本碳架是多氢蒎的五环母核，环的构型为A/B反，B/C反，C/D反，D/E顺，C28常有-COOH，有时也在C4位，C3常有羟基，C12、C13位往往有不饱和双键的存在。123456789101112131415161718192021232425262728293022齐墩果烷(oleanane)A/B,B/C,C/Dtrans,D/EcisCOOHHHO齐墩果酸(olennolicacid)齐墩果酸首先由油橄榄的叶子中分得，广泛分布于植物界，如在青叶胆全草、女贞果实等植物中游离存在，但大多数与糖结合成苷存在。齐墩果酸具有抗炎、镇静、防肿瘤等作用，是治疗急性黄胆性肝炎和慢性迁延性肝炎的有效药物。含齐墩果酸的植物很多，但含量超过10%的很少，从刺五加(Acanthopanaxsenticosus)、龙牙葱木(Araliamandshurica)中提取齐墩果酸，得率都超过10%，纯度在95%以上，是很好的植物资源。甘草(Glycyrrhizaurlensis)中含有甘草次酸(glycyrrhetinicacid)和甘草酸(glycyrrhizicacid)[又称甘草皂苷(glycyrrhizin)或甘草甜素]。甘草次酸有促肾上腺皮质激素(ACTH)样作用，临床上用于抗炎和治疗胃溃疡。但只有18-βH的甘草次酸才有此活性，18αH者无此活性。COOHHOROH甘草次酸甘草酸乌拉尔甘草皂苷A乌拉尔甘草皂苷B黄甘草皂苷RHb-D-gluA2b-D-gluA4b-D-gluA3b-D-gluA2-D-gluA-b-D-gluA-b-D-gluA-b-D-gluA-甘草酸（Glycyrrhizicacid）植物来源：豆科植物甘草(GlycyrrhizauralensisFisch)的干燥根及根茎英文名称：Liquorice分子式及分子量：C42H62O16;822.92药理作用：甘草酸具有肾上腺皮质激素样作用，能抑制毛细血管通透性，减轻过敏性休克的症状。可以降低高血压病人的血清胆甾醇。甘草酸二铵（注射剂）DiammoniumGlycyrrhizinate【主要成分】同甘草酸二铵胶囊。【药理作用】同甘草酸二铵胶囊。【适应证】同甘草酸二铵胶囊。【不良反应】同甘草酸二铵胶囊。【用法用量】静脉注射1日1次，150mg/次，用10％葡萄糖注射液250ml稀释后缓慢滴注。【注意事项】本品未经稀释不得进行注射；治疗中应检测血清钠、钾和血压；治疗中出现高血压、血钠滞留、低血钾等应停药或适当减量。甘草次酸（Glycyrrhetinicacid）植物来源：豆科植物甘草(GlycyrrhizauralensisFisch)的根、根茎英文名称：Liquorice分子式及分子量：C30H46O4;470.64药理作用：甘草次酸具有抗菌、抗肿瘤及肾上腺皮质激素样作用，可制成抗炎抗过敏制剂，用于治疗风湿性关节炎、气喘、过敏性及职业性皮炎、眼耳鼻喉科炎症及溃疡等。OHCH2OHHOHOCH2R1CH2OHR2R1R2OHOHHOHOHOHbb---柴胡皂苷元A柴胡皂苷元B柴胡皂苷元C二、乌苏烷型又称-香树脂烷型(α-amyrane)或熊果烷型，其分子结构与齐墩果烷型不同之处是E环上两个甲基位置不同，即C20位的甲基移到C19位上。此类三萜大多是乌苏酸的衍生物。A/B,B/C,C/Dtrans,D/EcisHHH232526272930乌苏烷（ursane)1920熊果酸（Ursolicacid）植物来源：木犀科植物女贞(LigustrumlucidumAit.)叶英文名称：GlossyPrivet分子式及分子量：C30H48O3：456.683β-Hydroxyurs-12-en-28-oicacid(I)药理作用：熊果酸又名乌索酸，乌苏酸，属三萜类化合物。具有镇静、抗炎、抗菌、抗糖尿病、抗溃疡、降低血糖等多种生物学效应。研发进展：近年来发现它具有抗致癌、抗促癌、诱导F9畸胎瘤细胞分化和抗血管生成作用。研究发现：熊果酸能明显抑制HL－60细胞增殖，可诱导其凋亡；能使小鼠的巨噬细胞吞噬功能显著提高。体内试验证明，熊果酸可以明显增强机体免疫功能。说明它的抗肿瘤作用广泛，极有可能成为低毒有效的新型抗癌药物。中药地榆(Sanguisorbaofficinalis)具有凉血止血的功效，其中含有地榆皂苷B,E(sanguisorbinBandE)，是乌苏酸的苷。H地榆皂甙BR=H地榆皂甙ER=3-Ac-glcAra(p)HHCOOR三、羽扇豆烷型羽扇豆烷三萜类E环为五元碳环，且在E环19位有异丙基以α构型取代，A/B、B/C、C/D及D/E均为反式。DEHHHH192021222930羽扇豆烷(lupane)白桦脂醇(betulin)存在于中草药酸枣仁、桦树皮、棍栏树皮、槐花等中。白桦脂酸(betulinicacid)存在于酸枣仁、桦树皮、柿蒂、天门冬、石榴树皮及叶、睡菜叶等中。羽扇豆醇(lupeol)存在于羽扇豆种皮中。羽扇豆醇R=CH3白桦脂醇R=CH2OH白桦脂酸R=COOHRHO2726252423222119181716151413121110987654321HHHH202930H四、木栓烷型由齐墩果烯经甲基移位转变而来。HHHH2324252627HH28木栓烷齐墩果烯五、何伯烷型和异何伯烷型何伯烷型的结构特点：与羽扇豆烷型的主要区别在于异丙基的位置。C19位异丙基移到C21位；C17位甲基移到C18位，即C28由C17位移到C18位；C21位异丙基为α型。与何伯烷型相比，异何伯烷型的C21位异丙基为β型。何伯烷HHHH1718192021何伯烷HHHH1718192021雷公藤酮是失去25甲基的木栓烷型衍生物。化学名3-hydroxy-25-nor-friedel-3,1(10)-dien-2-one-30-oicacid.COOHOHO23242627H28雷公藤酮三萜皂苷的理化性质•1.性状：苷元有较好晶型，皂苷多为无定形粉末。•2.气味：皂苷多数具有苦而辛辣味，其粉末对人体黏膜具有强烈刺激性，但甘草皂苷有显著而强的甜味，对黏膜刺激性弱。皂苷还具吸湿性。•3.表面活性：亲水性基团为糖，亲脂性基团为苷元，当二种基团比例适当时具有表面活性。皂苷水溶液经强烈振摇能产生持久性的泡沫，且不因加热而消失。4.溶解度•皂苷：可溶于水，易溶于热水，溶于含水醇（甲醇、乙醇、丁醇、戊醇等），溶于热甲醇、乙醇；几不溶于乙醚、苯、丙酮等有机溶剂。•皂苷在提取的过程中会产生次级苷，水溶性下降，溶于中等极性有机溶剂（醇，乙酸乙酯）。•皂苷元：不溶于水，易溶于石油醚、苯、CHCl3、Et2O。5.溶血作用•皂苷水溶液能与红细胞壁上的胆甾醇结合，生成不溶于水的分子复合物，破坏了红细胞的正常渗透，使细胞内渗透压增加而发生崩解，从而导致溶血现象，故皂苷又称为皂毒素(saptoxins)。因此，皂苷水溶液不能用于静脉注射或肌肉注射。•但并不是所有的皂苷都具有溶血作用，如以人参二醇为苷元的皂苷则无溶血作用。•溶血指数：指在一定条件下能使血液中红细胞完全溶解的最低皂苷浓度。如甘草皂苷，溶血指数1：4000，溶血性能较强。6.沉淀反应•皂苷的水溶液可以和一些金属盐类如铅盐、钡盐、铜盐等产生沉淀。此性质可用于皂苷的分离：先用金属盐使皂苷沉淀下来，分离出来之后在对其分解脱盐。如：三萜皂苷+PbAc2→沉淀→分解脱铅→皂苷•缺点：铅盐吸附力强，容易带入杂质，并且在脱铅时铅盐也会带走一些皂苷，脱铅也不一定能脱干净。•三萜皂苷为酸性皂苷，可用中性PbAc2沉淀，而甾体皂苷则为中性皂苷，须用碱性PbAc2沉淀。7.显色反应1）浓H2SO4-醋酐（Liebermann-burchard）反应样品溶于冰醋酸，加浓硫酸-醋酐(1:20)，产生红→紫→蓝→绿→污绿等颜色变化，最后褪色。甾体皂苷也有此反应，但颜色变化快，在颜色变化的最后呈现污绿色；而三萜皂苷颜色变化稍慢，且不出现污绿色。2）五氯化锑（kahlenberg）反应三氯化锑或五氯化锑反应将样品醇溶液点于滤纸上，喷以20%三氯化锑（或五氯化锑）氯仿溶液（不应含乙醇和水）干燥后，60-70℃加热，显黄色、灰蓝色、灰紫色斑点，在紫外灯下显蓝紫色荧光（甾体皂苷则显黄色荧光）。注意：五氯化锑腐蚀性很强，宜少量配置，用后倒掉。3）三氯醋酸（Rosen-Heimer）反应样品溶液点于滤纸上，喷25%三氯醋酸乙醇溶液，加热至100℃，显红色→紫色斑点。4）氯仿-浓硫酸（salkawski）反应将样品溶于氯仿，加入浓硫酸后，在氯仿层呈现红色或兰色，硫酸层有绿色荧光出现。5）冰醋酸-乙酰氯（Tschugaeff）反应样品溶于冰醋酸，加乙酰氯数滴及氯化锌结晶数粒，稍加热，则呈现淡红色或紫红色。三萜皂苷的提取分离一、苷元的提取与分离（一）提取1.醇提，提取物直接进行分离；2.醇提，有机溶剂萃取；3.制备成衍生物再进行分离；4.将皂苷进行水解，有机溶剂提；（二）分离硅胶柱层析石见穿粗粉氯仿提取氯仿提取液浓缩至小体积,放置,过滤固体析出物方法(1)溶于适量甲醇甲醇溶液加少量硅胶拌匀,加热除去溶剂，上硅胶柱硅胶柱(1)环己烷-乙酸乙酯(9:1)洗脱除去亲脂性较强成分(2)环己烷-乙酸乙酯(8:2)洗脱TLC检查齐墩果酸部分方法(2)少量苯洗涤(除去亲脂性较强成分)淡黄色固体95%乙醇溶解(1:100)过滤、浓缩、放置齐墩果酸粗品反复重结晶齐墩果酸纯品回收溶剂齐墩果酸粗品95%乙醇重结晶齐墩果酸纯品二、三萜皂苷的提取与分离特性：难以结晶，多为无定形粉末。由于糖分子的引入，极性基团明显增多，致使极性增强，故具有较大的极性而易溶于醇类溶剂、含水醇及水。难溶于弱极性的有机溶剂。◆常用的提取方法甲醇或乙醇提取脱脂正丁醇萃取沉降总皂苷大孔吸附树脂柱醇提药材醇提液减压浓缩后,加适量水，亲脂性溶剂萃取亲脂性杂质水层正丁醇萃取正丁醇层通过大孔吸附树脂柱，水:醇(极性递减)洗脱洗脱液蒸干总皂苷（二）分离•1.分配柱层析法以硅胶为支持剂，CHCl3-MeOH-H2O，CH2Cl2-MeOH-H2O，EtOAc-E