山东师范大学无脊椎动物实验：扁形动物综合实验

无脊椎动物学实验3扁形动物综合实验山东师范大学生命科学学院动物学教研室Email:saidaojiansina主要内容1实验目的2实验材料与用具3实验内容4实验的方法步骤与观察思考5、示范标本6、作业与思考1实验目的通过观察涡虫、吸虫、绦虫的外部形态和内部结构，了解扁形动物门的特征；了解自由生活涡虫的形态结构、功能对其生活及动物进化的意义。通过对华枝睾吸虫、其他吸虫及绦虫的结构观察，掌握吸虫纲、绦虫纲的主要特征，了解其适应寄生生活的结构特征和功能，了解寄生虫病的的发生传播途径及防治措施。2实验材料与用具活涡虫涡虫、吸虫（华枝睾吸虫、日本血吸虫装片）、绦虫（猪绦虫装片）以及虫卵装片等各种装片、玻片和标本。培养皿、显微镜、解剖镜、镊子、解剖针、0.004％醋酸、食盐、PH试纸、硫酸镁结晶、洋红粉末、熟蛋黄等。3实验内容观察涡虫的外形、运动，涡虫对不同刺激的反应观察涡虫、吸虫和绦虫的各种装片、玻片。观察涡虫、吸虫和绦虫标本。课后以小组为单位进行涡虫再生实验。4实验的方法步骤与观察思考4．1涡虫纲Tuebellaria4．2吸虫纲Trematoda4．3绦虫纲Cestoidea4．1．1涡虫的采集和饲养涡虫生活、荫蔽在阴凉小溪水底的石块或树叶下面。采集时，将水底石块、树叶捞起翻转，找到涡虫即用毛笔将涡虫刷入采集瓶中。涡虫饲养在放有石块或瓦片的玻璃缸或搪瓷盘中。饲养缸应放在阴凉处，饲养用水用泉水、井水或放置2—3天后的自来水，最适宜水温是22—260C。每星期喂食2次；食料用煮熟的蛋黄、猪肝、猪肉、螺肉等；投喂食物经半天后取出剩余的食料，然后调换新鲜的饲水，换水时进行饲养器皿的洗涤，保持饲水清洁。4．1．2观察活涡虫的外形观察、掌握涡虫特征，理解两侧对称体型及其进步意义。涡虫身体柔软、扁平呈叶片状。背面稍隆起、颜色较深，腹面较平、颜色较浅，表面具有纤毛。前端略呈三角形，两侧有耳突，耳突背面内侧有2个黑色眼点。口在腹面后端的三分之一处，口后方有一生殖孔。4．1．3涡虫的运动及其对刺激的反应4．1．3．1自由运动用毛笔从培养缸中选取活涡虫，置于培养皿内或载玻片上，观察涡虫依靠体表纤毛和肌肉收缩做滑行运动；置于水中，观察涡虫在水中腹面朝上做仰泳式游动。4．1．3．2对刺激的反应用镊子挡在涡虫前方，或在涡虫滑行前方放置一粒食盐，观察涡虫的反应及运动方向、方式的变化。用解剖针刺激涡虫的前、中、后不同部分，观察涡虫对刺激的反应。理解两侧对称体型与运动方式的关系。4．1．3．3趋性反应用吸管吸取涡虫放在培养皿中，将1滴0.04％的醋酸滴在涡虫水滴旁，2液滴间由液桥相连，观察涡虫运动、明确涡虫对酸的趋性反应，同时用PH试纸检测2液滴的PH值。4．1．4涡虫内部构造的观察了解各系统由那些器官组成，理解其进步性及其产生的意义。4．1．4．1活体观察将饥饿数日的涡虫置小烧杯中，用熟蛋黄末和洋红粉末混匀投喂，1－2h后虫体内部显示红色，取出涡虫置载玻片上用低倍显微镜观察肠管（红色）的分支情况。将涡虫置于载玻片水滴中，加入少许硫酸镁将涡虫麻醉，在体视显微镜下观察管状咽从口中伸出。将饥饿涡虫置载玻片水滴中，待虫体伸展后，加盖载玻片并用铅笔的橡皮头轻压、均匀碾开虫体，低倍显微镜下观察到虫体两侧一系列闪烁光亮，即原肾管分支末端焰细胞内鞭毛摆动所致，选取清晰处用高倍镜观察，可见到细管分支，即原肾管，其中有液体单向流动。4．1．4．2整体装片观察消化系统虫体腹面距后端约三分之一处有口，口内为肌肉发达的咽，咽连接3条盲支的肠，一支向前，两支向后，各有很多侧支分出。神经系统在低倍显微镜下观察可见到，体前端一对神经节，连接2条神经索，在体侧向后运行，以及索间横神经，呈梯形。生殖系统雌雄同体。雄性生殖器官：体侧精巢多对，输精小管连通输精管，在体中部的膨大部分为储精囊，阴茎肌肉质，通入生殖腔。雌性生殖器官：体前端卵巢1对，2条输卵管在体后端汇合成阴道，并与受精囊、圆形肌肉囊通入生殖腔。4．1．4．3横切片观察横切面弓形，背面隆起，腹面扁平，体壁由三个胚层组成。外胚层：表皮层由体表一层柱状细胞组成。腹面表皮细胞上有纤毛。腺细胞夹杂在表皮细胞之间，细胞大，囊状，内有很多颗粒，染色深。杆状体为分散在上皮细胞间的条状小体。基膜是表皮细胞基层的一层非细胞结构薄膜。中胚层：肌肉组织在基膜下构成肌肉层，包括环肌层，纵肌层，以及背腹肌。实质组织是细胞间彼此相通的合胞体，填塞在整个身体内各器官之间。内胚层：形成消化道的上皮细胞。4．2吸虫纲4．2．1观察华枝睾吸虫4．2．1．1形态结构观察虫体扁平，前端窄、后端宽圆。体前端有一个口吸盘，前端腹面三分之一处有个腹吸盘。腹吸盘前方有雌、雄生殖孔各一个。虫体末端有一个排泄孔。4．2．1．2内部结构观察消化系统口、咽、食道、肠。口位口吸盘中央，咽肌肉质，食道短，肠分两支，末端为盲端。排泄系统排泄管2条，纵行于虫体前半部两侧。排泄囊在受精囊后方，粗大、透明、略呈“S”形弯曲，由2条排泄管汇合形成，达虫体末端以排泄孔通体外。生殖系统雌雄同体。雌雄生殖系统各一套。雌性：卵巢1个3叶，位体中部。输卵管由卵巢发出，管短。卵巢后有梨形囊状受精囊。卵巢前有单细胞腺体，为梅氏腺。劳氏管位受精囊一侧，连接输卵管，开口于虫体背面。卵黄腺位体两侧，是肠外侧泡状小体。输卵管、受精囊、劳氏管及卵黄管汇合处为成卵腔。卵巢与腹吸盘间粗而弯曲的管道为子宫，以雌性生殖孔开口于腹吸盘之前。雄性：精巢一对，位体后半部，前后排列，树枝状。精巢发出细输精管，两输精管由后向前至卵巢前膨大为储精囊。以雄性生殖孔开口于腹吸盘之前。4．2．2观察肝片吸虫（又称羊肝蛭）寄生在牛、羊的肝管中。虫体较大，体前端突出形成头锥，口吸盘位于头锥中央，腹吸盘较大，位于头锥之后。肠干外侧有许多分支。4．2．3观察布氏姜片虫寄生于人、猪的小肠中。虫体大而扁平，卵圆形，形象姜片，故名姜片虫。虫体前端有1个口吸盘，腹吸盘靠近口吸盘,但比口吸盘大3～4倍。肠管2支，每支有4—6个波浪形弯曲。4．2．4观察日本血吸虫及卵和尾蚴4．2．4．1日本血吸虫装片观察：雌雄异体。雄虫：体粗短，虫体前端有一个口吸盘，稍后方有一个腹吸盘。腹吸盘后面的虫体两侧向腹面卷折形成1条抱雌沟。在腹吸盘后方，2肠管之间有7个灯泡状精巢。雌虫：体细长，吸盘不如雄性发达。虫体中2二肠管之间有1个卵圆形卵巢，后端肠管周围有暗色卵黄腺，虫体前端有子宫，子宫内充满虫卵。4．2．4．2日本血吸虫卵观察：卵椭圆形，壳薄，淡黄色，卵一侧有小刺。4．2．4．3日本血吸虫的尾蚴观察：身体分体部和尾部。体部圆筒状，后部稍膨大，有吸盘及头腺。尾部分尾干及尾叉。观察猪绦虫4．3．1．1绦虫卵观察：球形，黄褐色，壳厚。胚膜有辐射状条纹，卵内含六钩蚴。4．3．1．2头节、颈节观察：头节呈球形，前端中央为顶突，其上有2圈黑色小钩，顶突下方有4个圆形吸盘。头节之后为颈节，细小而不分节，以横分裂的方式不断向后产生新的节片，是未成熟节片，其内部结构尚未发育。4．3．1．3成熟节片：较未成熟节片长，体前部节片宽大于长，向后成熟节片越趋近方形。每节片有一整套完整的雌、雄生殖器官。雄性：精巢小，滤泡状，每成熟节片内有150~200个。每个精巢连1条细小输精小管会合成1条弯曲的输精管，通向节片一侧，末端膨大为阴茎，开口于生殖腔，通过生殖孔开口于体外。雌性：卵巢1个，3叶，位于节片后部中间，输卵管短。节片中部有1条棒状子宫，长条形卵黄腺位于卵巢下方，卵黄管与输卵管相通。输卵管后部有单细胞腺体围绕的部分为成卵腔，单细胞腺体称为梅氏腺。成卵腔1侧通出1条阴道，与输精管平行并共同开口于生殖腔。阴道基部近成卵腔处膨大为受精囊。排泄管：节片两侧个有1条透亮的纵行排泄管。横排泄管在节片后方，卵黄腺之下，与左右两侧的纵排泄管相连。4．3．1．4妊娠节片观察：为虫体后端的粗大节片，长大于宽呈长方形。高度分枝而且充满虫卵的子宫填满整个节片，子宫一侧分枝7~13枝。其它内部器官都已经消失而看不到。5、示范标本华枝睾吸虫卵：小型，灯泡状，淡黄色。卵壳薄而平滑，卵有一小盖和肩峰，另一端宽圆，有一小突。华枝睾吸虫胞蚴：袋状，内有一些胚球各形成一个雷蚴。华枝睾吸虫雷蚴：形状似胞蚴，雷蚴中的胚球形成6～8个尾蚴。华枝睾吸虫尾蚴：眼点一对，尾长。猪囊尾蚴：圆或卵圆形，为乳白色泡状体，大小为5.8~10mm，头节与小钩均已发生，缩陷于囊内，囊内充满乳白色液体。见于猪肉中。成虫标本：猪绦虫、牛绦虫、细粒棘球绦虫，6、作业与思考6．1解释涡虫活体实验所观察的现象6．2将涡虫以不同的方式进行切割后，置于有水培养皿中静养。同时估测涡虫的再生情况，并随时进行观察实验结果，分析产生结果的原因。6．3分析三胚层、两侧对称的进步意义6．4选绘形态结构图：涡虫，华枝睾吸虫卵和尾蚴，日本血吸虫卵和尾蚴，猪绦虫卵。6．5解释寄生虫对人体的危害及防治措施，