尿常规检测操作规程

昆仑泌尿外科医院检验科临检室作业指导书文件编号；SZKL-LJ-02版本/修订号；1/0主题内容尿液常规检测标准操作规程生效日期：20150101页码；第1页共5页尿液常规检测标准操作规程1.目的通过对尿液颜色、浊度、PH、比重、蛋白、葡萄糖、酮体、亚硝酸盐、胆红素、尿胆原、红细胞、白细胞的检测，对泌尿系统疾病进行诊断。2.检测项目尿液PH、比重、蛋白质、葡萄糖、酮体、亚硝酸盐、胆红素、尿胆原、红细胞、白细胞、维生素C。3.检测原理3.1PH：酸碱指示剂法，试带测试区模块中含有甲基红和溴麝香草酚兰，用以测试尿液酸碱度。3.2尿比重：试剂条中的多聚电解质含有随机尿标本中离子浓度而解离的酸性基团，由模块中酸碱指示剂颜色变化换算成尿液比密值。3.3蛋白质：指示剂蛋白误差法，溴芬蓝产生阴离子，与带阳离子的蛋白质（主要是白蛋白）发生颜色反应。此反应对白蛋白最为敏感，而对其他蛋白（球蛋白、血红蛋白、本-周氏蛋白、粘蛋白等）稍次。3.4葡萄糖：葡萄糖氧化酶法，模块中葡萄糖氧化酶作用于尿液中葡萄糖，反应生成过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下释放出[O]，使色源产生颜色反应。3.5尿液酮体：模块中含亚硝基铁氰化钠，碱性条件下可与尿液中乙酰乙酸、丙酮起颜色反应。3.6胆红素：重氮法，在强酸介质中，模块中二氯苯胺重氮盐与尿液中直接胆红素起偶联反应生成红色的复合物。3.7尿胆原：在强酸条件下，模块中对-甲氧基苯重氮四氟化硼酸盐与尿胆原发生重氮偶联反应，生成胭脂红色的化合物。3.8亚硝酸盐：反应依赖于尿中革兰氏阴性细菌把硝酸盐还原成亚硝酸盐，亚硝酸盐与对氨基苯砷酸反应生成重氮化合物，重氮化合物奈基乙二胺二盐酸结合呈现出桃红色。3.9血红蛋白：尿液中的血红蛋白或其破坏释放的游离血红蛋白均含有亚铁血红素，可使过氧化物分解释放出新生态氧[O]，后者能使无色的邻甲苯胺（或四甲替联苯胺）变成兰色的邻甲联苯胺（或四甲体联苯胺）。3.10白细胞：模块中吲哚酚酯与粒细胞中的酯酶反应，产生吲哚酚，后者与重氮盐反应形成紫色缩合物。3.11维生素C：根据Tillman’sReagent原理，维生素C将染料由蓝色还原成红色。3.12空白（校正块）：尿在试纸上分布的状态及尿本身的颜色，一般都会给测定结果带来误差，高空白块就是为了排除这些产生误差的因素，各项目都使用同一空白块。4．标本采集及运送4.1标本类型：新鲜尿液，以清晨第一次或第二次中段尿为宜。4.2标本要求：20-40ml，中段尿于洁净干燥容器内。4.3标本的运送：标本留取后，1小时内送检。4.4标本拒收标准：细菌、白带、精液、粪便、经血污染的标本拒收。5．仪器及试剂5.1仪器名称：桂林优利特公司提供的尿干化学仪仪器厂家：桂林优利特公司仪器型号：URIT-180尿液分析仪（干化学仪）昆仑泌尿外科医院检验科临检室作业指导书文件编号；SZKL-LJ-02版本/修订号；1/0主题内容尿液常规检测标准操作规程生效日期：20150101页码；第2页共5页5.2试剂：桂林优利特公司提供的尿干化学试纸条（URIT11A）。6．操作步骤6.1当推进器处于初始位置，将干化学纸条浸泡于新鲜的、充分混匀的、未离心的尿标本中立即取出。6.2将试纸条置于平台检测区检测，确保试纸前端同工作台的前壁接触，推进器将试纸推至测试区进行检测。6.3当推进器退回初始位置时，重复以上步骤，进行下以下标本的检测。6.4仪器自动打印结果，同时通过LIS系统自动传入电脑。6.5镜检标本筛选：仪器检测结果中红细胞、白细胞、蛋白和亚硝酸盐全部为阴性及颜色和浊度正常的标本不需要镜检。7．室内质量控制7.1质控品：上海伊华公司多项目尿液分析质控液7.2质控程序7.2.1质控品复温到18～25℃，颠倒混匀。7.2.2在仪器主界面上选择“质控液测试”。用质控液浸湿试纸条，按标本操作程序进行质控检测。7.2.3质控结果与允许范围对比，结果合格再进行病人标本的检测。8．生物参考区间酸碱度（PH）：4.5～8.0比密：随机尿标本1.003～1.030；晨尿＞1.020；新生儿1.002～1.004蛋白质：阴性葡萄糖：阴性酮体：阴性隐血：阴性胆红素:阴性尿胆原：阴性或弱阳性亚硝酸盐：阴性白细胞酯酶：无维生素C：阴性9．临床意义9.1尿酸碱度：肉食者多为酸性，食用蔬菜水果可致碱性。久置腐败尿或泌尿道感染、脓血尿均可成碱性。磷酸盐、碳酸盐结晶多见于碱性尿；尿酸盐、草酸盐、胱氨酸结晶多见于酸性尿。酸中毒及服用氯化铵等酸性药物时尿可呈酸性。9.2尿蛋白质：分为短暂性蛋白尿，如功能性（发热、运动、充血性心力衰竭和癫痫发作等）和体位性（仅见于直立性体位），或持续性蛋白尿，如肾前性（免疫球蛋白重链和轻链分泌、肌红蛋白尿和血红蛋白尿等）、肾性（lgA肾病、肾毒性药物所致小分子蛋白尿和进展性肾病等）和肾后性（如尿路感染、前列腺或膀胱疾病和阴道分泌物污染等）。9.3尿葡萄糖：阳性见于糖尿病、肾性糖尿病、甲状功能亢进等。内服或肌注大量葡萄糖及精神激动等也可致阳性反应。昆仑泌尿外科医院检验科临检室作业指导书文件编号；SZKL-LJ-02版本/修订号；1/0主题内容尿液常规检测标准操作规程生效日期：20150101页码；第3页共5页9.4尿酮体：阳性见于妊娠剧吐、长期饥饿、营养不良、剧烈运动后。严重未治疗的糖尿病酸中毒患者，酮体可呈阳性反应。9.5尿隐血：尿隐血来自两种情况：①尿红细胞：无论实验前红细胞是否破坏，只要红细胞达到一定浓度，试带检测时均可出现隐血阳性。主要见于肾小球肾炎、尿路结石、泌尿系统肿瘤、感染等。②尿血红蛋白：即含游离血红蛋白的血红蛋白尿。正常人血尿中无游离血红蛋白。当体内大量溶血，尤其是血管内溶血，血液中游离血红蛋白可大量增加。当超过1.00-1.35g/L时，即出现血红蛋白尿。此种情况常见于血型不合输血、阵发性睡眠性血红蛋白尿、寒冷性血红蛋白尿症、急性溶血性疾病等。还可见于各种病毒感染、链球菌败血症、疟疾、大面积烧伤、体外循环、肾透析、手术后所致的红细胞大量破坏等。9.6尿胆红素：阳性见于完全阻塞性黄疸。阳性增强见于溶血性疾病及肝实质性病变如肝炎。9.7尿胆原：阴性见于完全阻塞性黄疸。溶血性黄疸时，一般尿胆红素阴性。9.8尿亚硝酸：阳性见于尿路细菌感染。如大肠埃希菌属、克雷伯菌属、变形杆菌属和假单孢菌属感染。注意，亚硝酸盐结果阳性与致病菌数量没有直接关系。9.9尿比密：增高见于少尿、急性肾炎、高热、心功能不全、脱水等；尿比密增高同时伴尿量增多，常见于糖尿病。尿比密减低见于慢性肾小球肾炎、肾功能不全、尿崩症等。连续测定尿比密比一次测定更有价值，慢性肾功能不全呈现持续性低比密尿。如临床怀疑肾小管疾病时建议采用冰点渗透压法测定尿渗量以明确诊断。9.10尿白细胞酯酶：阳性提示尿路炎症，如肾脏或下尿道炎症，表明尿液中白细胞数量＞20个/μl；阳性也可见于前列腺炎。9.11尿维生素C：主要用于排除维生素C对于化学分析结果的干扰，阳性提示试带尿液隐血、胆红素、亚硝酸盐和葡萄糖检测结果可能为假阴性。10．注意事项10.1标本要求：测定尿pH、葡萄糖、酮体、隐血、胆红素、亚硝酸盐时，标本必须新鲜。10.2试带保存：尿葡萄糖、胆红素试带易失效，应避光保存于室温干燥处。10.3尿蛋白质：通常混浊尿，试带法检测结果为阴性时，应再用加热醋酸法或磺基水扬酸法复查，以免漏诊阳性结果。10.4尿隐血：由于红细胞易于沉淀，所以测试前标本必须混匀。为防止强氧化剂或某些产过氧化物酶细菌的干扰，可将尿液煮沸2分钟，再用试带进行检测。10.5注意尿干化学分析试带测定结果与手工法化学试验测定结果的差异：如尿蛋白质试带测定的是白蛋白，对球蛋白不敏感；用葡萄糖氧化酶测定尿葡萄糖的灵敏度比班氏法高，但高浓度仅检测到为止“3+”为止。尿胆红素试带法结果比Harrison法灵敏度低；尿白细胞酯酶检测白细胞只能检出有无粒细胞，而不与淋巴细胞发生反应等。10.6尿干化学分析试带结果的确认试验：通常采用相同或更高灵敏度或特异度的要同或不同方法来检测同一物质。但是采用相同干化学分析试带重复检测不能作为确证试验。10.7试带法检测结果宜采用显微镜检查法来加以确认：国际上普遍认为，宜采用显微镜检查法来加以确认试带法检测结果。试带法白细胞酯酶和亚硝酸盐阳性时，宜采用病原微生物学检查来排除尿路感染可能，采用显微镜检查法来确认菌尿或白细胞尿。当显微镜检查提示存在异常上皮细胞时，宜做细胞病理学检查来确认结果。疑为膀胱移行上皮细胞癌时，宜采用图像流式细胞分析法和DNA分析法来确证。昆仑泌尿外科医院检验科临检室作业指导书文件编号；SZKL-LJ-02版本/修订号；1/0主题内容尿液常规检测标准操作规程生效日期：20150101页码；第4页共5页10.8干扰因素：试带法检测结果的干扰因素见下表影响尿试带结果的因素项目假阴性结果假阳性结果说明pH甲醛溶液——尿试带蛋白区溢出时pH降低蛋白质不能检出球蛋白、免疫碱性尿（pH9）、季铵类球蛋白轻链；色素尿清洁剂、氯己定、聚乙烯吡咯烷酮葡萄糖维生素C、尿路感染氧化型清洁剂、次氯乙酸出现酮体时试验灵敏度降低；比密增高时试验灵敏度降低；新试剂使维生素C的假阴性减少酮体不能检出β-羟丁酸；色素尿；尿中有大量左旋不与β-羟丁酸和丙酮反应；试带保存不当多巴代谢物；2-巯基乙醇与苯丙酮酸或酞类化合物呈磺酸红色或橘红色反应，和酮体呈色不同隐血甲醛；大剂量维生素C、氧化型清洁剂、次氯乙酸；部分品牌试带因使用含碘酯亚硝酸盐；高比密尿；尿路感染时微生物产生盐试剂垫，排除了维生素C标本陈旧过氧化物酶干扰胆红素尿中维生素C和亚硝酸盐非那吡啶、依托度酸、出现维生素C时试验灵敏度降浓度增高；曝光大剂量氯丙嗪；色素尿低；亚硝酸盐增多时试验灵敏度降低；硫酸吲哚对阴性和阳性结果都有干扰尿胆原甲醛（2g/l）；对氨基水杨酸、磺胺药、尿胆原缺乏不能用本试验检出曝光对氨基苯磺酸、非那吡啶（用非Ehrlich试剂）；色素尿亚硝酸盐感染细菌无亚硝酸盐药物使尿呈红色或在酸性因维生素C（≥250mg/l）还原酶、膀胱通过时间短、介质中尿呈戏色；直接和重氮盐反应形成无限制硝酸盐还原为亚硝酸盐；色素尿色产物，阻止偶联反应革兰阳性菌；饮食中无蔬菜比密葡萄糖、尿素、碱性尿酮酸、明显糖尿；注意有些指示剂已不受非离放射线造影剂子颗粒和造影剂影响；极碱性尿读数可降低；明显蛋白尿（＞1g/L）时结果增高白细胞酯酶尿中四环素浓度高、氧化型清洁剂、甲醛、葡萄糖（＞30g/L）、比密和维生素C、汞盐、叠氮钠；色素尿；草酸浓度增高时灵敏度降低；草酸盐、1%硼酸；阴道分泌物污染受呋喃妥因、庆大霉素、头孢含黏液标本、氨苄、高浓度白蛋白（＞5g/L）含淋巴细胞标本的干扰昆仑泌尿外科医院检验科临检室作业指导书文件编号；SZKL-LJ-02版本/修订号；1/0主题内容尿液常规检测标准操作规程生效日期：20150101页码；第5页共5页11.参考文献11.1尚红、王毓三、申子瑜主编，全国临床临验操作规程（第4版），人民卫生出版社，2015.