气相色谱方法验证

北京海淀区西三环北路21号久凌大厦北楼910室邮编：100089电话：[phone]，传真：[phone],网址：电子邮件：[e-mail]1方案第1版顶空气相色谱法测定原料药中溶剂A和溶剂B含量的验证＊＊＊＊药业有限公司北京海淀区西三环北路21号久凌大厦北楼910室邮编：100089电话：[phone]，传真：[phone],网址：电子邮件：[e-mail]2＊＊＊＊有限公司方法验证名称：顶空气相色谱法测定原料药中溶剂A和溶剂B的含量方案号：版本号：第1版共21页：第1页生效日期：编写人：日期：审阅人：日期：批准人：日期：QA经理最初方案批准：总经理：日期：质量检验部经理：日期：质量保证部经理：日期：最终方案批准：总经理：日期：质量检验部经理：日期：质量保证部经理：日期：北京海淀区西三环北路21号久凌大厦北楼910室邮编：100089电话：[phone]，传真：[phone],网址：电子邮件：[e-mail]3＊＊＊＊有限公司方法验证名称：顶空气相色谱法测定原料药中溶剂A和溶剂B的含量方案号：版本号：第1版共21页：第2页目录名称页数1．目的·································································32．范围·································································33．仪器与试剂及色谱条件·················································34．验证实验内容·························································45．最终报告·····························································20北京海淀区西三环北路21号久凌大厦北楼910室邮编：100089电话：[phone]，传真：[phone],网址：电子邮件：[e-mail]4＊＊＊＊有限公司方法验证名称：顶空气相色谱法测定原料药中溶剂A和溶剂B的含量方案号：MVP-017版本号：第1版共21页：第3页一、目的1.验证顶空气相色谱法能否准确、精密的测定一定浓度范围内的原料药中溶剂A和溶剂B的含量。2.验证顶空气相色谱法测定原料药中溶剂A和溶剂B含量是否具有良好的选择性。3.验证方法在环境、条件发生一定变化时，能否有一定的耐受性。二、范围适用于＊＊＊＊药业有限公司原料药中溶剂A和溶剂B含量的验证，包括：空白试验、精密度、定量限、线性范围、准确度、耐受性等。三、仪器与试剂及色谱条件仪器与试剂GC—HP6890N（FID）Column：DB-1301（30m×0.32mmI.D.×1μm）Oven：90℃Inlet：150℃Detector:200℃ColumnPressure:4.8psiColumnflowrate:0.8ml/minSplitrate:1:25SamplerCondition:北京海淀区西三环北路21号久凌大厦北楼910室邮编：100089电话：[phone]，传真：[phone],网址：电子邮件：[e-mail]5＊＊＊＊有限公司方法验证名称：顶空气相色谱法测定原料药中溶剂A和溶剂B的含量方案号：版本号：第1版共21页：第4页Agilent7694Head-spaceSamplerEquilibrationtemperature:80℃Equilibrationtime:45minTransfer-linetemperature:105℃Carriergas:25ml/minPressurisationtime:0.5minInjectiontime:0.20min移液管：25ml，10ml，2ml吸量管：2ml胶头滴管分析天平顶空瓶（22ml），容量瓶：50ml微量注射器：25μl试剂：DMF（AR）、溶剂B（AR）、溶剂A（AR）、原料药（批号）无残溶的原料药四、验证实验内容1.空白试验（1）DMF用称液管移取2mlDMF于22ml顶空瓶中，加盖，作色谱处理。可接受标准：在溶剂B和溶剂A出峰位置处无干扰峰验证结果：结论：北京海淀区西三环北路21号久凌大厦北楼910室邮编：100089电话：[phone]，传真：[phone],网址：电子邮件：[e-mail]6操作者：核对者：北京海淀区西三环北路21号久凌大厦北楼910室邮编：100089电话：[phone]，传真：[phone],网址：电子邮件：[e-mail]7＊＊＊＊有限公司方法验证名称：顶空气相色谱法测定原料药中溶剂A和溶剂B的含量方案号：版本号：第1版共21页：第5页（2）空白取无残留溶媒（在水相结晶，不用溶媒处理）的普青_____g于22ml顶空瓶中，用移液管加入2mlDMF，加盖，摇匀，作色谱分析。可接受标准：在溶剂B和溶剂A出峰位置处无干扰峰。验证结果：结论：操作者：核对者：2.精密度2.1系统适应性溶液配制贮备液：向50ml容量瓶中精确加入溶剂B0.05g，溶剂A0.5g，用DMF定容。标准溶液A：称取贮备液1.2800g于50ml容量瓶中，用DMF溶液定容。精密称1.0g无残留的原料药于22ml顶空瓶中，加入2ml标准溶液A,加盖作色谱处理，各重复4次，计算4次的平均值，相对标准偏差。可接受标准：RSD≤5％验证结果：1.贮备液配制：称取溶剂Bg,溶剂Ag，用DMF定容至50ml。2.标准溶液A:称取贮备液g于50ml容量瓶中,用DMF溶液定容.3.称取无残留的原料药,,,,于22ml顶空瓶中，加入2ml标准溶液A,加盖作色谱处理。北京海淀区西三环北路21号久凌大厦北楼910室邮编：100089电话：[phone]，传真：[phone],网址：电子邮件：[e-mail]8＊＊＊＊有限公司方法验证名称：顶空气相色谱法测定原料药中溶剂A和溶剂B的含量方案号：版本号：第1版共21页：第6页标准溶液A色谱数据表结论：操作者:核对者:3.线性范围：3.1线性标准溶液配制：贮备液a:用移液管移取10ml贮备液于50ml容量瓶中，用DMF定容，摇匀。1＃标准液：用吸量管移取1.25ml贮备液于50ml容量瓶中，用DMF定容，摇匀，制成1＃贮备液。然后精密称g无残留的原料药于22ml顶空瓶中，加入2ml上述溶液，混匀。（约含500ppm溶剂A及50ppm溶剂B）。2＃标准液：用移液管移取25ml1＃贮备液于50ml容量瓶中，用DMF定容，摇匀，制成2＃贮备液。然后精密称g无残留的原料药于22ml顶空瓶中，加入2ml上述溶液，混匀。（约含250ppm溶剂A及25ppm溶剂B）。3＃标准液：用移液管移取25ml2＃贮备液于50ml容量瓶中，用DMF定容，摇匀，制成3＃贮备液。然后精密称g无残留的原料药于22ml顶空瓶中，加入2ml上述溶液，瓶号溶剂A峰面积溶剂B峰面积1.2.3.4.平均RSD北京海淀区西三环北路21号久凌大厦北楼910室邮编：100089电话：[phone]，传真：[phone],网址：电子邮件：[e-mail]9混匀。（约含125ppm溶剂A及12.5ppm溶剂B）。＊＊＊＊有限公司方法验证名称：顶空气相色谱法测定原料药中溶剂A和溶剂B的含量方案号：版本号：第1版共21页：第7页4＃标准液：用移液管移取25ml3＃贮备液于50ml容量瓶中，用DMF定容，摇匀，制成4＃贮备液。然后精密称g无残留的原料药于22ml顶空瓶中，加入2ml上述溶液，混匀。（约含62.5ppm溶剂A及6.25ppm溶剂B）。5＃标准液：用移液管移取25ml4＃贮备液于50ml容量瓶中，用DMF定容，摇匀，制成5＃贮备液。然后精密称g无残留的原料药于22ml顶空瓶中，加入2ml上述溶液，混匀。（约含31.3ppm溶剂A及3.13ppm溶剂B）。分别取1＃、2＃、3＃、4＃、5＃线性标准液，加盖作色谱处理。按照线性标准液1＃～5＃的浓度与其对应的溶剂B及溶剂A的峰面积，作线性回归得到溶剂B和溶剂A的工作曲线。可接受标准：γ≥0.99线性范围数据表序号溶剂A浓度溶剂B浓度溶剂A峰面积溶剂B峰面积1＃2＃3＃4＃5＃北京海淀区西三环北路21号久凌大厦北楼910室邮编：100089电话：[phone]，传真：[phone],网址：电子邮件：[e-mail]10＊＊＊＊有限公司方法验证名称：顶空气相色谱法测定原料药中溶剂A和溶剂B的含量方案号：版本号：第1版共21页：第8页溶剂A线性回归结果：a＝b＝r＝工作曲线：y＝溶剂B线性回归结果：a＝b＝r＝工作曲线：y＝结论：操作者：核对者：4.定量限3#贮备液逐级稀释，作色谱分析，按照色谱峰的信噪比为1：10时的浓度作为溶剂A和溶剂B的定量限。北京海淀区西三环北路21号久凌大厦北楼910室邮编：100089电话：[phone]，传真：[phone],网址：电子邮件：[e-mail]11结论：溶剂B的定量限：溶剂A的定量限：操作者：核对者：＊＊＊＊有限公司方法验证名称：顶空气相色谱法测定原料药中溶剂A和溶剂B的含量方案号：版本号：第1版共21页：第9页5.准确度5.1系统适用性a：称取贮备液g于50ml容量瓶中，用DMF定容，摇匀。b：取a液2ml于22ml顶空瓶中，加盖作色谱处理，各重复4次，计算4次的平均值，相对标准偏差。可接受标准：RSD≤5％结论：5.2准确度称取1.0g普鲁卡因青毒素产品，测出其溶剂B和溶剂A的残留量，然后加入一定量的标准溶液，加入三次,,计算其回收率，可接受标准：回收率应在90％～110％之间。瓶号溶剂A峰面积溶剂B峰面积1.2.3.4.平均RSD北京海淀区西三环北路21号久凌大厦北楼910室邮编：100089电话：[phone]，传真：[phone],网址：电子邮件：[e-mail]12验证结果：5.2.1溶剂B回收率称取原料药产品g于22ml顶空瓶中，加入2mlDMF溶液作色谱处理，根据工作曲线计算出该批产品中的溶剂B和溶剂A的含量。称量溶剂B峰面积溶剂A峰面积溶剂B含量溶剂A含量＊＊＊＊有限公司方法验证名称：顶空气相色谱法测定原料药中溶剂A和溶剂B的含量方案号：版本号：第1版共21页：第10页称取原料药产品1.0g于22ml顶空瓶中，加入2mlDMF及10μl,20μl,25μl的贮备液a，加盖作色谱处理，根据工作曲线计算溶剂B和溶剂A的含量。称样量（g）贮备液a（μl）溶剂B峰面积溶剂B含量丁醇峰面积丁醇含量溶剂B回收率：溶剂A回收率：北京海淀