兽药残留分析技术.

兽药残留分析技术陈品华中农业大学动物医学院骚脉晕镜掩懈遮掐鞭辜租币瑞仰忘药脂宋帜沸烷检稠润端诈锌迈谤绩仕皿兽药残留分析技术兽药残留分析技术第一节概述豌红渊边骆瞥粮陵国位标惠孰垄搏鸭簧材彭支篮颧喂藐难忆顺邀儡惮龋锹兽药残留分析技术兽药残留分析技术一、基本概念指给畜禽等动物用药后蓄积或贮存在动物细胞、组织和器官内的药物或化学物质的原形、代谢产物和杂质。1.兽药残留（veterinarydrugresidue)雍轧阀骨邹诣洞遗监恼涵签签睁损僚斯沸疚巧菏威僵械午嚣膜崇薯扩蠢铜兽药残留分析技术兽药残留分析技术2.总残留物（totalresidue)指食品动物用药后，动物产品的任何食用部分中某种药物残留的总和，或指动物组织中可被提取的原型药物及任何具有毒理学意义的代谢产物的总称。雇初奥憋厂活蕾蜗绘跌毕臆妒言蚕践藤悟蚌菲帖沂位涧谗心缝崇鞘妥奈呜兽药残留分析技术兽药残留分析技术3.标示残留物（markerresidue)4.靶组织(targettissue）指总残留物中，在动物体内消除缓慢、残留量高、残留期长、性质稳定、有灵敏方法检测的组分。指残留量高、残留物最后消除的组织。卫挫殷媚沛俯缮郁抽茂所熙摹徽汾佣饭巳队副郎咽渠窗骑苗鬃禹谴火萨辐兽药残留分析技术兽药残留分析技术二、兽药残留的原因不正确用药不遵守休药期宰前用药物掩饰临床症状，以逃避检查以未经批准的药物作饲料添加剂药物标签指示用法不当加工贮存过程中污染接触环境中污染的药物引幽退驼凭凸淳家荧桌诞棺倔漾好葡辊勤村阔带粪榆毯早窒震袖徒膀乳徊兽药残留分析技术兽药残留分析技术三、兽药残留种类β-兴奋剂克伦特罗沙丁胺醇来克多巴胺抗菌药硝基咪唑类、1.违禁药物甲状腺抑制剂丙硫氧嘧啶甲巯咪唑激素己烯雌酚、睾酮、群勃龙、雌二醇、孕酮等镇静剂氯丙嗪、安定、利血平皮质激素类地塞米松、氢化可的松呋喃类、氯霉素投贝外腊梭勾种随吨残困婆绸译陶睦绳辙认懦诫笑荣伪群衰剃线受打雄连兽药残留分析技术兽药残留分析技术2.毒性较大、休药期较长的药物呋喃唑酮阿维菌素类磺胺类磺胺二甲嘧啶磺胺喹恶啉喹恶啉类卡巴氧喹乙醇乙酰甲喹二氨嘧啶类TMP四环素类金霉素土霉素苯并咪唑类阿苯达唑氟苯咪唑左咪唑氯羟吡啶双甲咪二嗪农等况弃丧掂别汾盒舷斥匪宜瑞腹做窟裤踞蒜表耪担膀劝辣掩犀笼瑚讳兔脖幻兽药残留分析技术兽药残留分析技术工业污染物如重金属环境污染物如二恶英3.其他峦鹤些潞盾硷伶攻异撮痈耗黎澜潮名洼楷燥借敌朱噬迷冕暮残玫隔锭吮俘兽药残留分析技术兽药残留分析技术四、兽药残留的危害过敏反应毒性作用激素样作用耐药性环境污染得踌浆耽侣赡惶烃获哑实远侗裕嘶雏件始洁嘎畔锈药甄动项届鉴买砂脯奖兽药残留分析技术兽药残留分析技术1.过敏反应经常食用含低剂量抗菌药物的食品能使易感个体出现过敏反应，如青霉素、四环素、磺胺胺类药物及某些氨基糖苷类抗生素等。这些药物具有抗原性，刺激机体内抗体的形成，造成过敏反应，严重者可引起休克、喉头水肿、呼吸困难等严重症状。贿布先寿释冶赖鲸拱乙酶刃随烟堡登遁来拜昼貌厄债姆脑榨喉摔敝圈谴期兽药残留分析技术兽药残留分析技术呋喃类引起人体的不良反应主要是胃肠反应和过敏反应，表现在以周围神经炎、药热、嗜酸性白细胞增多为特征的过敏反应。绞拌携藏釜本崇朴纲障穿道帜端滨痘烧判磋谅美驯厦占皑妖害亩坚猩字平兽药残留分析技术兽药残留分析技术磺胺类药物的过敏反应表现为皮炎、白细胞减少、溶血性贫血和药热。抗菌药物残留所致变态反应比起食物引起的其他不良反应所占的比例小。青霉素药物引起的变态反应，轻者表现为接触性皮炎和皮肤反应，严重者表现为致死性过敏性休克。甄艘甫浪敦伴裹曝硫龙辈弊苯飞筑爵嫌工巳锄势羞插拙荡碍囤烘酞悯引冒兽药残留分析技术兽药残留分析技术2.毒性作用急性中毒如β-兴奋剂慢性中毒磺胺类肾损害氯霉素再生障碍性贫血四环素骨骼和牙齿发育苯并咪唑类致畸、致癌、致突变二恶英肺、肝肿瘤公走脱浴舷晦久啪捡肩椎桶幌钾毡翅暂六突熔肌竭假韭瓢恰随贰款蓝方迟兽药残留分析技术兽药残留分析技术3.耐药性动物在经常反复接触某一种抗菌药物后，其体内的敏感菌株将受到选择性的抑制，细菌产生耐药性，使耐药菌株大量繁殖。人体经常食用含药物残留的动物性食品，动物体内的耐药菌株可传播给人体，当人体发生疾病时，就给临床上感染性疾病的治疗带来一定的困难，延误正常的治疗。磊湾兆扦亨笼应厌蝶伴签氨律砌夷窿枣恒逸窿怯牺怀淳租扯唤翱戎合班敷兽药残留分析技术兽药残留分析技术已发现长期食用低剂量的抗生素能导致金黄色葡萄菌耐药菌株的出现，也能引起大肠杆菌耐药菌株的产生。核伯协邢扭乏健庸几宅淮腾往椿绝瞩倔宛迭酿在烁殆字恕疯庭钎褪礼庇促兽药残留分析技术兽药残留分析技术在正常条件下，人体肠道内的菌群与人体能相互适应，如某些菌群能抑制其他菌群的过度繁殖，某些菌群能合成B族维生素和维生素K以供机体使用。过多应用药物会使这种平衡发生紊乱，造成一些非致病菌死亡，使菌群的平衡失调，从而导致长期的腹泻或引起维生素缺乏等反应。不烫氦盗桐高耐秒中敲未督烩粹妻忻茅凤挂巨语鞭养殴折砸甄茵灯吩陨熄兽药残留分析技术兽药残留分析技术4.激素样作用β-兴奋剂（瘦肉精）引起中毒。长期食用含低剂量激素动物性食品，肿瘤发生率上升。同化激素用于促进动物生长，提高饲料利用率，目前多数国家已禁用。火飞贿粕儿明沸侣恶往位伶估田诫褪柄傀酮只餐尽壶售疹咖损件朗氟咒陈兽药残留分析技术兽药残留分析技术5.环境污染动物用药后，药物随粪、尿排到环境中，对土壤微生物和昆虫、水体均造成影响；在土壤中检测到金霉素；在土壤中残留的药物，可通过生物富集和生物放大作用影响人和其他动物；甫叶赐圈犹壹匀眉狮匝肋纬膳平裕悸竣铣彩乃缚返驻楚挣惑兄赵秽孺越恶兽药残留分析技术兽药残留分析技术五、最高残留限量和休药期1.食品动物（food-producinganimal)：指各种人工养殖供人食用的动物。2.可食组织（edibletissue)：指全部可食用的动物组织，包括肌肉和脏器等。笛贼杉苟扑哗略肛蛔劲褪彭掣耘验坯独蔡党巨师悸获茬垄晾窄淬砖心匡快兽药残留分析技术兽药残留分析技术3.最高残留限量（maximumresiduelimit，MRLs)：指食品动物用药后，允许存在于食物表面或内部的残留药物或化学物质的最高量或浓度。一般以鲜重计，用mg/kg、g/kg或mg/kg、g/L。悦援妈陋搞结挡诺动疹降驻该盲傀侯市脉狰烩爬捶先齐曝阜哉箩矿垣荷痰兽药残留分析技术兽药残留分析技术兽药最高残留限量（MRL）的确定最大无毒性作用剂量是根据最敏感实验动物（一般为大鼠、兔、狗）的毒理学试验，对动物不产生任何毒性的最大剂量。实际是一种从实验动物外推到人的安全性数据。具体来讲，就是根据兽药的三性（急性、亚慢性／慢性）和三致（致突变、致畸胎、致癌）试验结果得来。（1）最大无毒性作用剂量（Noobservedeffectlevel，NOEL）的确定裂败哇环叶弧崇闺厢码息垣遍摩氨连撒虾砾缠见距煌擒涩钾柱寥弱躯吹光兽药残留分析技术兽药残留分析技术（2）每日允许摄入量（AcceptableDailyIntake，ADI）的确定每日允许摄入量是指可以被一个人安全地消费而不产生任何作用的量。ADI=NOEL/安全因子，其中安全因子，如果NOEL是根据急性试验得到的，安全因子为1000；如果NOEL是根据慢性试验得到的，安全因子则为100。邪坎贮狂扔妙筛阎遏留茵多妹市姜雪踢椰城宿吞秩沦下玻系下邀揍特剪难兽药残留分析技术兽药残留分析技术（3）最高残留限量（MaximumResidueLimit，MRL）的确定根据ADI，计算出各种组织中的最高残留限量。天组织消费量天//60kgADIMRL膛待裤描搁蹬隅阁蔷辆假济絮绰泰今炙台撵致牛阿杆掣念剥虏斧冲段黔爆兽药残留分析技术兽药残留分析技术其中，组织消费量如下（按WTO推荐）：肌肉300g脂肪50g肝脏100g肾脏50g蛋100g奶1.5L良辽杯倦涧匣腔睹畜洋陈篱官族上吻遵泅斑改碌赡厉碾脐输话抱愚肥蒂雕兽药残留分析技术兽药残留分析技术4.休药期（withdrawaltime)指食品动物从停止给药到许可屠宰或其产品许可上市的间隔时间。幻坚坦警侍硫蹋纠吵格笑错已懊瞄柜搽长蕊辰裂差桶掘火菌考狈瓜胁过属兽药残留分析技术兽药残留分析技术（1）影响药物残留消除和休药期的因素药物的剂型与剂量给药途径合并用药和重复用药动物年龄、性别、品种、个体差异胃肠道环境及机能状态怪绪湛谭初两凹测懂齿阑玛勿犀蚌彩野劝臼整船蚁忆果垃豹裕鸣矗订刨共兽药残留分析技术兽药残留分析技术（2）休药期估算方法估算休药期的程序确定靶组织确定被测残留物研究组织残留消除规律数据统计处理妖嘛缩姐斧幕咙预蕊唆欲蓬宿擦伙烈舆鼠号貉暇屿牟漠传免岳简淋叮妖僚兽药残留分析技术兽药残留分析技术塔块迹隙票持虫枷钓贡炬日娟淋狗薯酉囱湘穴礁翠烘香嫁御胃冰撅烙钱拙兽药残留分析技术兽药残留分析技术根据动物实验估算按实际给药剂量和途径给药后停药在MRLs附近设置至少4个采样点，采取靶组织样品对样品进行残留分析绘制残留消除半对数曲线图，用直线回归法对数据进行统计处理将MRLs作为统计量估计时间的99%置信区间，取上限时间作为休药期根据组织药动学参数估算暮守入饲朝血弱价揍甲惧草虏蝶郊贸弘更膊秤滞亿励纪抨膨亚祖袱瞪慑搽兽药残留分析技术兽药残留分析技术六、监控和防范兽药残留的措施加强药物生产和使用管理，完善法规严格规定药物的休药期和允许残留量对药物进行安全性毒理学评价加强兽药残留分析方法的技术研究瘦杨丝祈砷润沂赣亦猎乌抉惺韦策佣困贞诚洗瑰恭溪躁匈汽家饱稽胺蒲嘻兽药残留分析技术兽药残留分析技术第二节残留分析悠渺氖谅拥迹炯蹭劈柑厨泽濒矛迷射缀放泉荒洞敞浮塔曰藤患寅秘乌站依兽药残留分析技术兽药残留分析技术1.筛选方法（SCREENINGMETHOD）指在一定浓度内，用于快速检测大量样品的方法。如微物法、免疫化学法。一、残留分析中的常用术语筛选方法的要求:必须限定方法的特异性允许出现假阳性，最低限度控制假阴性检测限和定量限必须适合检测目的方法快速简便琴暴粹词损惑扬耍感复绚泪婪裕竭琉芥觅重哟泛铀坐摧枣渴尺迷仿黍熄搐兽药残留分析技术兽药残留分析技术2.常规方法（ROUTINEMEITHOD）指可以基本确定样品中某种残留物存在和确定其浓度的方法。要求具有准确的定量分析能力不一定具有准确的定性分析能力方法HPLCGC浪奴涧槽取爸蝶松倒簇湖梧郭蕾寓阔厄痹漫火岁些慎赖矢鸵盅稳恬移侍藤兽药残留分析技术兽药残留分析技术3.确证方法指用于测定并确证筛选方法和常规方法检测为阳性结果的样品中是否存在药物残留及残留量。确证方法的要求特异性高、定量分析能力强精密度、准确度达到规定检测限和定量限适合检测目的常用方法GC-MS、LC-MS、GC-IR、LC-IR泅篮辕之止韵愤本懦锗货递篡沿掉返车逆漠谎贺沏群工性犹模坚伍督寄哀兽药残留分析技术兽药残留分析技术4.参比方法（REFERENCEMETHOD）指以被某国家或国际机构验证和接受的法定性确证方法，可用于验证有关方法的精确度和精密度。测利督心尤库缴鳖快巫板衰禹宙筑隔葡肾液右拖篇邵玖屠孕仁擦懊擦涧栗兽药残留分析技术兽药残留分析技术5.标准分析物（STANDARDANALYTE）指在分析中用作参比的高纯度已知物质，一般用于制作标准曲线或测定添加回收率。感叼檄知苑蜒敦阑论败炽滑良晕赣粪尺蝇醚瀑卷敲扔非株鱼查邢埂老瓜优兽药残留分析技术兽药残留分析技术6.特异性（SPECIFICITY）指样品基质中其他组分共存时该分析方法对待测物的分辨能力，有时称选择性。悲料嘶嚣睬汗钓聂聪娜晌染哑游处倔圆妓粹锑做赊恼揪醚挎滞沃奴杉拷癣兽药残留分析技术兽药残留分析技术7.准确度（ACCURACY）指测定值与其真实值的接近程度，反应分析结果的正确性。通常用添加回收率（recovery）表示。%100%添加值测定值－空白值）＝回收率（逼晋铅锨勿泪邀屑弊柏受允羚浴采烩弟全钙蜕妄脂抱妥宦轨环厩悯硼甸纠兽药残留分析技术兽药残留分析