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MBPSepharoseHighPerformance原理麦芽糖结合蛋白(MBP)有42.5KD大小，不含Cys，作为融合蛋白的标签，通常放在N端在大肠杆菌中进行表达。MBP能促进融合蛋白的可溶性表达，尤其对于难表达的真核细胞蛋白，膜蛋白，病毒蛋白有很好的促溶表达能力，MBP融合蛋白的纯化在生理条件下进行，使用麦芽糖进行温和洗脱。保护了MBP标签蛋白的活性。标签在纯化后期需要用酶切去除，常用的内切酶是FactorXa，麦芽糖酶和肠激酶。MBP预装柱是带有糊精特异性配基的琼脂糖高效凝胶。柱床参数柱床体积结合能力推荐工作流速最大流速MBPSepharoseHighPerformance1mlApprox.16mgMBP-bGal0.5ml/min2ml/min纯化简要概述结合缓冲液：20mMTris-HCl,200mMNaCl,1mMEDTA,1mMDTT,pH7.4洗脱缓冲液：20mMTris-HCl,200mMNaCl,1mMEDTA,1mMDTT,10mMMaltose,pH7.41，用5-10倍柱体积的结合缓冲液平衡柱子。2，上样。3，用5-10倍柱体积的结合缓冲液平衡分离柱，直到基线，即所有未结合物质都被冲洗出柱子。4，用5倍柱体积的洗脱缓冲液进行洗脱。净化1，用4倍柱体积的0.5MNaOH清洗柱子。2，用至少2个柱体积的蒸馏水润洗柱子，直到基线，pH及电导稳定。填料性质及化学稳定性产品配基pH稳定性平均颗粒尺寸MBPSepharoseHighPerformance1mlMBP-NTR短期4-12长期4-934μm在绝大多数通常使用的水溶性缓冲液中保持稳定。储存用5个柱体积的20%的乙醇在中性pH值的条件下冲洗介质和柱子，在4°-8°条件下储存。