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DNA复制过程中3种重要酶的作用及比较•解旋酶•DNA聚合酶•DNA连接酶①解旋酶解开母链双螺旋②单链DNA结合蛋白稳定母链DNA③DNA聚合酶指导前导链由5’至3’方向连续合成DNA聚合酶④滞后链的合成是不连续的，引物酶合成RNA引物，DNA聚合酶在引物后边合成DNA片段，即冈崎片段RNA引物冈崎片段⑤RNA引物被移除，DNA连接酶连接冈崎片段DNA复制过程5’3’ATCGAATCGGTTTACCTTAGCCAA解旋酶1、解旋酶作用实质：DNA复制过程中，断开氢键，使双螺旋解旋为单链。ATCGAATCGGTTUACCTTAGCCAADNA聚合酶母链DNA子链DNA引物3′3′5′5′2、DNA聚合酶DNA聚合酶的作用特点（1）需要模板：以DNA母链为模板，按照碱基互补配对原则合成子链；（2）需要引物：只能将单个脱氧核苷酸连接到已有的核酸片段上；（3）连接方式：形成磷酸二酯键；（4）作用方向：子链只能从5’→3’方向合成。（5）种类：普通DNA聚合酶、用于PCR的耐高温的Taq酶冈崎片段冈崎片段冈崎片段滞后链的合成子链母链3′3′5′5′磷酸二酯键DNA链解旋方向3、DNA连接酶恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，又被称为“分子针线”3、DNA连接酶T4DNA连接酶T4DNA连接酶还可把平末端之间的缝隙“缝合”起来，但效率较低T4DNA连接酶DNA连接酶的作用特点（1）用途：a、DNA复制中连接冈崎片段；b、在基因工程中连接目的基因和载体；（2）不需要识别连接的DNA序列；也不需要模板；（3）作用实质：形成磷酸二酯键连接DNA片段；3种酶的作用比较DNA聚合酶DNA连接酶作用作用部位作用特点(条件)常用类型拼接DNA片段，形成重组DNA两脱氧核苷酸的脱氧核糖与磷酸间形成的磷酸二酯键(1)将DNA双链上的两个缺口同时连接起来，不需要模板(2)在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键E·coliDNA连接酶T4DNA连接酶以母链DNA为模板合成子代DNA(1)只能将单个核苷酸连接到已有的核酸片段上，形成磷酸二酯键(2)需要引物普通DNA聚合酶，耐高温的Taq酶解旋酶将DNA两条链的氢键打开形成两条单链