第一章-革兰氏阳性球菌

第一章革兰氏阳性球菌球菌阳性：葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌阴性：淋球菌、脑膜炎球菌第一节葡萄球菌属Staphylococcus广泛存在于自然界、空气、水、土壤、人及动物体表、天然孔道等，多数是不致病的腐物寄生菌。引起化脓性炎症、败血症，食物中毒、毒性休克综合征等疾病。分类（1）金黄色葡萄球菌(S.aureus)：多数致病（2）表皮葡萄球菌(S.epidermidis)：偶可致病（3）腐生葡萄球菌(S.saprophyticus)：不致病金黄色葡萄球菌S.aureus一、形态球状，固体培养基上生长者呈葡萄串状，脓汁和液体培养基中呈双球或短链，无芽孢和鞭毛，个别形成荚膜。二、培养及生化特性1.普通培养基上生长良好2.血平板上生长更佳，致病菌株溶血3.产生金黄色色素4.高度耐盐:7%5.分解葡、乳、麦、蔗糖，产酸不产气，致病菌株能分解甘露醇,凝固酶阳性。三、抗原性蛋白质抗原：细胞壁的一种表面蛋白SPA（StaphylococcusproteinA)，能与多种哺乳动物IgGFc片段非特异性结合。四、致病性和毒力因子化脓性疾病：主要引起化脓性炎症。通过各种途径侵入机体，导致皮肤或器官的多种感染，甚至败血症。毒素性疾病：由葡萄球菌产生的外毒素引起。毒力因子主要包括酶和毒素，可引起两类疾病：1.溶血素（Haemolysin）包括α,β,δ,γ溶血素。不耐热蛋白质。损伤细胞膜的毒素,对多种哺乳动物红细胞有溶血作用，对白细胞、血小板、肝细胞、成纤维细胞、血管平滑肌细胞等均有损伤作用。2.肠毒素(enterotoxin)耐热抗酸蛋白质。耐100℃30min和胃蛋白酶水解。按抗原性不同，分为A、B、C1、C2、C3、D和E7个血清型，均可引起急性胃肠炎即呕吐为主要症状的食物中毒。3.凝固酶能使含有抗凝剂的人或兔血浆发生凝集的酶类物质。作用：有助于致病菌株抵抗吞噬细胞和杀菌物质，感染局限化，也是鉴别致病性的重要指标。4.耐热核酸酶、纤维蛋白溶酶、透明质酸酶等利于细菌扩散。扩散因子。五、微生物学诊断标本的采集不同病型采取不同的标本。化脓性病灶采取脓汁、渗出液，败血症采取血液，脑膜炎采取脑脊液；食物中毒则分别采集剩余的食物、呕吐物和粪便。直接涂片检查分离培养普通平板培养、血液琼脂平板、高盐培养基。鉴定：纯培养物1致病性葡萄球菌的鉴定：（1）产生凝固酶和耐热核酸酶（2）产生金黄色色素，有溶血性；（3）发酵甘露醇2葡萄球菌肠毒素的检查：呕吐物、粪便或剩余食物作细菌分离鉴定的同时，接种至肉汤培养基，培养后取滤液，100℃30min后，静注6-8周龄的幼猫。若在注射后4小时内发生呕吐、腹泻、体温升高或死亡等现象者，提示有毒素存在的可能。第二节链球菌属Streptococcus链球菌属细菌是化脓性球菌中的另一大类常见细菌，广泛分布于自然界，多数不致病，有些可导致人或动物各种化脓性炎症、肺炎、乳腺炎、败血症。一、分类（一）根据抗原结构分1.属特异性抗原（P抗原）：核蛋白抗原2.群特异性抗原（C抗原）：多糖抗原，兰氏（Lancefield)分类的基础，将链球菌分为20个血清群（A-V，缺I和J）大写英文字母表示。3.型特异性抗原：蛋白质抗原，多与菌体毒力与免疫力有关。⑴α型溶血性链球菌不完全溶血，半溶或草绿色溶血。菌落周围有1-2mm宽的草绿色溶血环。多为条件性致病菌。⑵β型溶血性链球菌完全溶血，菌落周围形成一个2-4mm宽、界限分明、完全透明的无色的溶血环。致病力强。（二）根据溶血现象分类⑶γ型链球菌不溶血，菌落周围无溶血环，也称为不溶血性链球菌。无致病性。二、形态球形或卵圆形，直径0.6-1.0um。呈链状排列，链长短不一。致病性菌链长，液体培养基中菌链长。三、培养特性营养要求复杂，需补充血液、血清、葡萄糖等。在血液琼脂平板上形成灰白色、表面光滑、边缘整齐、直径0.5-0.75mm的细小菌落。不同菌株溶血不一。在血清肉汤中易形成长链，管底呈沉淀。1.链球菌溶血素(Streptolysin)溶血素O：SLO，对氧敏感溶血素S：SLS，对氧稳定2.M蛋白抗吞噬作用3.耐热核酸酶、链激酶(纤维蛋白溶酶)、透明质酸酶等侵袭性物质。四、致病性和毒力因子所致疾病：可引起多种动物发病，如牛羊乳房炎、猪的败血症等。无乳链球菌（Streptococcusagalactiae）停乳链球菌(S.dysgalactiae)乳房链球菌(S.uberis)马链球菌兽疫亚种(S.equisubsp.zooepidemicus)马链球菌马亚种(S.equisubsp.equi)猪链球菌(S.suis)化脓链球菌(S.pyogenes)肺炎链球菌(S.pneumoniae)五、微生物学诊断标本的采集：根据临床疾病类型的不同，采集适当的标本—渗出液、脓汁、乳腺炎乳液、脑脊髓液、尿液和感染组织。检验方法（一）直接检查：可直接涂片，革兰氏染色镜检。（二）分离培养:在涂片前先接种血平板，37℃24-48h。观察菌落形态和溶血情况。然后涂片染色镜检。（三）细菌鉴定：菌落形态、溶血特性、细菌形态、生化特性。如定群、定型，则要作血清学试验。猪链球菌引起猪脑膜炎、关节炎、肺炎、心内膜炎，因败血症死亡。人感染后表现脑膜炎、败血症等。根据荚膜抗原差异分35个血清型，1、2、7、9为猪的致病菌，2型最常见。菌落小，灰白、透明，在液体培养基中呈短链。毒力因子分2类：与粘附有关的有溶菌酶释放蛋白、磷酸甘油脱氢酶和纤连蛋白结合酶；毒素类包括溶血素，具有巯基的穿孔素，有较强的免疫性。还有一种可能的毒力因子是胞外蛋白因子。1.金黄色葡萄球菌可产生的毒素、酶及其致病作用。2.链球菌产生的毒素、酶及其致病作用。3.链球菌在血液琼脂培养基上的溶血表现。4.链球菌的兰氏分型。5.如何从污染的病料组织中分离致病性葡萄球菌？复习思考题