布鲁氏菌病

布鲁氏菌病布鲁菌病(简称布病)是由布鲁菌引起的人、畜共患慢性传染病。家畜中牛、羊、猪最常发生，并由它们传给人和其它家畜。以生殖器官和胎膜发炎，引起流产、不育、睾丸炎为特征。该病被国际兽疫局定为B类传染病，我国也将其列入二类动物疫病。一、病原学1、形态特征：布鲁菌为细小的球杆菌，用病料涂片、染色、镜检时，常单个排列或密集成堆、成对，不形成荚膜和芽孢，无鞭毛，不能运动。革兰氏染色阴性，姬姆萨染色呈紫色。由于本菌吸收染料过程较慢，较其他细菌难于着色，所以，常用科兹洛夫斯基染色法染色，布鲁菌呈红色，其他细菌呈蓝色或绿色。方法为：病料涂片干燥后，滴加2％沙黄液，加热至蒸汽l-2min，水洗，再滴加1％孔雀绿溶液复染(不加热)l-2min，水洗、干燥后镜检。2、培养特性•本菌为需氧兼性厌氧菌。对营养要求高，初次分离，须在含有血液、血清、马铃薯浸液或胰酶消化蛋白胨等培养基上生长。初次分离培养时，生长缓慢，常要1周以上才能长出肉眼可见的圆形菌落，待驯化后传代，则2-3天就能生长良好。牛、羊种布鲁氏菌从病料初次分离培养时，需在10％C02环境中才能生长，几代后则不需要。•在血液琼脂上，形成圆形、灰白色、隆起的不溶血小菌落；在马铃薯斜面上可长出微带棕黄色菌苔。在液体培养基中呈轻度混浊，培养久时，可形成菌环。3、布鲁菌属共有6个种马尔他布鲁菌(羊布鲁菌，3个生物型)流产布鲁菌(牛布鲁菌，9个生物型)猪布鲁菌(5个生物型)犬布鲁菌沙林鼠布鲁菌绵羊布鲁菌马尔他布鲁氏菌主要感染绵羊、山羊，也能感染牛、猪、犬、兔和人等；流产布鲁氏菌主要感染牛，也能感染羊、猪、犬、兔和人等；猪布鲁氏菌主要感染猪，也能感染牛、羊、犬、人等；犬布鲁菌、沙林鼠布鲁菌、绵羊布鲁菌除感染本属动物外，对其他动物致病力很弱或基本无致病力。4、抵抗力•对干燥和寒冷有较强抵抗力，如在干燥土壤中存活2个月；流产胎儿中活75天，子宫渗出物中存活200天，冷乳中存活40天以上。•但对热很敏感，60℃加热30min，70℃5-10min死亡，煮沸立即死亡。•对消毒药的抵抗力不强，常用的消毒剂如3%来苏尔、2%氢氧化钠可在lh内将其杀死；5%石灰乳需2h、2%福尔马林需3h将其灭活。•对链霉素、庆大霉素、卡那霉素、四环素等敏感。二、流行病学1、易感动物：牛、羊(绵羊、山羊)、猪最易感。此外，马、狗、猫、狼、狐狸、猴、野兔、鸡、鸭及一些啮齿动物等以及人都可自然感染。一般情况下，初产动物最为易感，流产率也最高，随着产仔胎次的增加易感性也逐渐降低。2、传染源：主要是患病及带菌的羊、牛、猪，其次是犬。最危险的是受感染的妊娠母畜，在流产或流产时，布鲁菌随胎儿、胎水和胎衣、乳汁及阴道分泌物排出，感染公畜的精液含有布鲁菌。感染者粪尿间或排出病原菌。3、传播途径：•主要是经消化道传播，即通过采食被污染的饲料和饮水感染；•其次是皮肤、黏膜及生殖道。本菌有强的侵袭力和扩散力，不仅可从破损的皮肤侵入机体，而且可从无创伤的皮肤、黏膜侵入机体；•交配传染也是重要的传染途径之一；•吸血昆虫也可传播此病。4、人的感染一般不由人传染于人，在我国人感染的布鲁菌病主要是羊型，其次为猪型，牛型最少。从人体分离得到的布鲁氏菌大多是羊布鲁菌，一般牧区人的感染率高于其他地区，与病畜、污染的畜产品频繁接触的人易感，如毛皮加工人员、乳肉加工人员、饲养员、兽医、实验室工作人员等。三、致病机理•布鲁菌侵入机体，到达附近的淋巴结，被吞噬细胞吞噬，在细胞内增殖，随着细菌数量增多，破坏吞噬细胞进入血液散播全身，引起菌血症，如体温升高、出汗等，进入血液的细菌侵入嗜好部位如胎盘、胎衣中，其次是乳腺组织、淋巴结、骨骼、关节、滑液囊，以及睾丸、附睾、精囊等，引发病变。•布鲁菌侵入绒毛膜上皮细胞，引起绒毛坏死，并产生纤维素性脓性分泌物，使胎儿胎盘与母体胎盘脱离，发生流产。•布鲁菌进入胎衣中，随羊水进入胎儿引起胎儿病变。•布鲁菌也可由一个妊娠期至另一个妊娠期存在于单核吞噬系统及乳房内，下次妊娠时，布鲁菌再次侵入子宫，引起流产，由于染病后有免疫力，再次流产少见，经常见到晚期流产或正常分娩而胎衣滞留。•母猪各个胎儿的胎衣不相连，布鲁菌不一定侵入所有胎衣，因此病变并不完全相同，可全部胎儿死亡而流产，也可个别胎儿死亡。四、症状牛最主要症状是流产•多在妊娠后6-8个月发生；•流产胎儿多为死胎、弱胎；•多数胎衣滞留，从阴道流出污秽的灰白色或棕红色液体；•如引起子宫内膜炎可引起长期不孕，如无胎衣滞留，则不影响下次受孕；•关节炎、乳房炎；•公牛睾丸炎、附睾炎。新感染的牛群中，大多数母牛只流产一次，如牛群不更新，流产过1-2次得母牛可以正常生产，疫情似乎停止，一旦引进新牛群，可再次引起流产。因已感染的牛群非健康牛群。羊•多发生在妊娠后3-4个月；•流产前症状不明显，食欲减退，精神沉郁，阴道流出黄色粘液；•有的可能有乳房炎、关节炎、支气管炎等；•公羊发生睾丸炎、附睾炎。猪•主要症状是流产，大多发生在怀孕的第30-50天或80-110天，在妊娠的2-3周早期流产时，胎儿和胎衣多被母猪吃掉，常不被发现。•流产前母猪精神沉郁，阴唇和乳房肿胀，有时可见从阴道流出分泌物，；•流产的胎儿大多为死胎，胎衣滞留现象少见，也有发生胎衣不下及子宫炎，影响配种。•有的病猪产出弱胎或木乃伊胎，流产后从阴道排出黏性红色分泌物，大多经8-10天可消失。流产后又可怀孕，重复流产的较少见。•公猪睾丸炎和附睾炎，一侧或两侧无痛性肿大；•公、母猪都可能发生关节炎。四、病变•胎衣水肿，覆有纤维蛋白絮片或脓液，有的有出血点；•胎儿淋巴结、脾、肝肿大，胃内有淡黄色或白色粘液絮状物，以皱胃最为明显，胃肠浆膜下有点状或线状出血；•睾丸、附睾、精囊有炎性坏死灶或化脓灶；•关节炎：关节肿大，滑液囊有浆液和纤维素，重时有化脓性炎症和坏死。五、诊断1、参考母畜的流产、公畜睾丸和附睾炎，以及胎儿、胎衣及子宫、公畜睾丸的病理变化等都可作为初步诊断的依据。2、细菌学检查(1)病料涂片：流产胎儿、胎衣、分泌物中常有大量细菌，采集胎衣分泌物、流产胎儿的胃内容物、脾、肝、淋巴结、子宫坏死部分等组织做抹片，用革兰氏染色法染色见到革兰氏阴性菌，用柯兹洛夫斯基染色法染色，常可见到被染成淡红色的小球杆状菌，其他细菌或组织呈蓝色或绿色。(2)分离培养采取病料接种于10％马血清的马丁琼脂斜面。如病料有杂菌污染时，可用选择培养基培养。即是在l00mL马丁琼脂或肝汤琼脂中，加人2500IU杆菌肽、l0mg放线菌酮、600IU多黏菌素B，混合后倒人平皿中，供分离培养用。接种病料后，37℃培养，每3天观察一次。如有细菌生长，挑选可疑的菌落做细菌鉴定，如抹片、染色、镜检。将疑似菌落进行纯培养，进一步做布鲁氏菌生物学特性检验，用抗血清做玻片凝集试验等。（3）凝集反应细菌侵入机体后，经7-15天血液中就出现凝集抗体，随后凝集滴度逐渐增高。病畜流产后10天以上，大多数血凝滴度升高，阳性反应可保持几个月甚至2-3年以上。因此，流产后采血时间要在7-10天以后为好。目前，广泛采用凝集反应，常用的有血清玻板凝集反应和血清试管凝集反应。（4）全乳环状试验：取被检乳样1ml于灭菌小试管中，加布鲁菌病全乳环状抗原1滴于乳样中，充分混匀，置37℃水浴中60min，取出判定结果。强阳性：乳脂层形成明显蓝/红的环带，乳柱白色，临界明显；阳性：乳脂层的环带呈蓝/红，不显著，乳柱略带颜色；弱阳性：乳脂层的环带颜色较浅，但比乳柱颜色略深；疑似：乳脂层的环带颜色不明显，与乳柱分界不清；阴性：乳柱上层无任何变化，乳柱着色，颜色均匀。牛乳环状试验标准抗原：四氮唑染色抗原（红色），苏木精染色抗原（蓝色）（5）变态反应布鲁菌水解素，经被检动物尾根皮内注射，或肘关节皮肤较薄部位注射，24、48小时观察，有无发热，肿胀而判断。（6）其他方法：补体结合实验：抗原抗体复合物可以结合补体，但肉眼看不到，再加入致敏红细胞(溶血系统或称指示系统)，根据是否溶血，判定反应系统中是否存在相应的抗原或抗体。PCR、ELISA等六、防治布鲁氏杆菌为兼性细胞内寄生菌，药物治疗效果不好，常采用检疫淘汰的办法。非疫区，每年检疫一次，阳性牛进行淘汰；疫区一年两次检疫，阳性者淘汰，阴性者多次检疫，一年以上无阳性出现者，可判为健康群；引进动物时产地检疫，隔离观察两个月，并两次血清学为阴性者，方可引进。•培养健康牛群由犊牛培育，新生犊牛隔离饲养，用母牛初乳饲养5-10天，改用健康牛乳或灭菌乳饲养，5月龄、9月龄各检疫一次，均为阴性者可判为健康犊牛。•严格消毒流产胎儿、胎衣深埋或烧毁，污染圈舍、场地、用具用2%热氢氧化钠或10%石灰乳消毒，粪便堆积发酵，乳制品加热后使用，皮毛消毒后方可运出。•免疫接种猪布鲁菌2号弱毒疫苗，适用于牛、羊、猪都可作口服免疫。牛免疫期1年、绵羊1.5年、山羊、猪1年；马耳他布鲁菌5号弱毒疫苗用于牛、羊免疫。•人类可以感染布鲁氏菌病，传染源主要是患病动物，一般不由人传染于人，所以人类布鲁氏菌病的预防与消灭，有赖于动物布鲁氏菌病的预防和消灭。患病羊、牛、猪为其主要传染源。兽医、牧民、乳肉加工人员、及实验室工作人员等感染机会最多。七、公共卫生学•人因接触病畜或食用受染牛奶或奶制品而感染。潜伏期1-3周。临床特点是缓慢起病，长期发热、多汗、虚弱、全身痛和关节痛，以及睾丸炎、付睾炎等，孕妇可能流产。体检可以发现患者淋巴结有轻度肿大，偶见肝、脾、扁桃体和睾丸肿大。•预防本病，首先要注意职业性感染。凡在牧场工作人员、兽医等，必须严守防护制度(即穿着防护服装及消毒工作)。病畜乳肉食品必须灭菌后利用。•皮上划痕接种M104冻干活菌苗，免疫期1年，第2年复种1次，以后不必再接种，接种前必须做变态反应试验，阴性者方可接种。牛妊娠期：280d;猪：114d，三三三法，三个月三个周加三天；羊：母羊妊娠期平均为150d（绵羊144-152d、绒山羊147－155d）。预产期为配种月份加5。狗：妊娠期平均为60d（58-64d）猫：妊娠期为63d（60-66d）兔：妊娠期为30d（29-31d）水豹水貂妊娠期为47d（37-51d