维生素C负荷试验

维生素C负荷试验摘要：负荷试验是评定人体水溶性维生素营养水平方法之一。其方法是先给被测者大剂量维生素，然后测定一定时间内尿中该维生素排出量。若被测者体内有充足的该维生素储备，大剂量摄入后则将从尿中大量排出，反之，被测者的该维生素营养状况较差，因而组织中储备贫乏，摄入大剂量后组织将大部分或全部储留，则尿中排出量减少。进行维生素C负荷试验时，被测者空腹，排尿后服维生素C500mg，饮水量可视季节而定，收集服用药后四小时尿。在尿瓶中应先加入1克草酸，使尿液pH保持在3-5，维生素C稳定而不被破坏。还原型维生素C其强还原性可还原染料2，6-二氯酚靛酚，该染料在酸性溶液中呈红色，被还原后失去红色，其溶液中过量，滴一滴染料时呈红色。在无杂质干扰时，被测溶液中维生素C还原的染料量与维生素C浓度成正比。关键词：维生素C、尿液、负荷量1材料与方法1.1实验材料与设备1.1.1实验材料及试剂1.1.1.1实验材料维生素C、220ml尿液(W)1.1.1.2实验试剂：(1)1%草酸称取草酸10克，溶解于100ml蒸馏水中。(2)2，6-二氯酚靛酚溶液称取NaHCO340.2mg,溶解于200ml沸水中，待冷，称取2，6-二氯酚靛酚染料50mg溶液于上述NaHCO3溶液中，冰箱内过夜，次日过滤在250ml容量瓶中，蒸馏水稀释至刻度，摇匀，置棕色瓶中，冷藏保存。标定：取已标定过的维生素C溶液2ml及1%草酸溶液5ml于锥形瓶中。以待标定的染料滴定，呈淡红色，15秒内不退色为终点。(3)维生素C溶液称取维生素C粉末20mg，以1%草酸稀释至100ml，冷藏保存。标定：吸取以上维生素C溶液2ml于锥形瓶中，加入6%KI溶液0.5ml，1%淀粉溶液2滴，再以标准的0.0010NKIO3溶液滴定至终点淡兰色。(4)0.1000NKIO3溶液：精确称取干燥的KIO30.3567克，用蒸馏水稀释至100ml。(5)0.0010NKIO3溶液：取上述溶液1ml，用水稀释至100ml，次溶液1ml相当于维生素C0.088mg。(6)1%淀粉溶液：称取可溶性淀粉0.5mg，加水一滴，搅拌成糊状倒入50ml沸水中，混匀。冷藏待用。(7)KI溶液：称取KI0.6g，溶解于10ml水中，临用时配置。21.1.2实验仪器及设备烧杯、容量瓶、锥形瓶、酸式滴定管、刻度吸管、量筒1.2实验方法步骤（1）留尿，在留尿样前在烧杯中先放入0.2-0.3g草酸。（2）保留约50ml尿样在小烧杯中，其余弃入厕所。（3）取2ml尿样，以10%草酸稀释至15ml，用2，6-二氯酚靛酚滴定，至出现淡红色15秒内部褪色为终点，记录染料用量。2实验数据记录与处理2.1实验结果表2-1实验结果记录表项目实验结果尿液量（ml）220消耗0.0010NKIO3溶液的量（ml）3.12标定维生素消耗染料ml数3.56标定尿液消耗染料ml数0.792.2数据处理2.2.1维生素C浓度维生素C浓度（mg/ml）=消耗0.0010NKIO3溶液ml数*0.088（mg/ml）所取维生素Cml数=3.12*0.088/2=0.13728mg/ml2.2.2T的计算T（1ml染料/维生素Cmg数）=维生素C溶液浓度（mg/ml）*维生素C溶液ml数/消耗染料ml数=0.13728*2/3.56=0.077122.2.3尿中维生素C含量尿中维生素C含量（mg/4小时）=VT*尿量（ml）WV:滴定尿样时所用染料的ml数T：1ml染料相当于维生素Cmg数（mg/ml）W：滴定时取尿样ml数尿中维生素C含量（mg/4小时）=0.79*0.07712*220/2=6.7mg/4小时33注意事项（1）收取尿样应调节pH至3-5，以保持尿中维生素C。（2）取样后立即测定，操作过程迅速。（3）所有试剂应用蒸馏水配制，滴定过程中应避免接触金属离子。（4）尿样用1%草酸稀释，稀释倍数视尿中维生素C含量而定，负荷尿为5-10倍，最好用去燃料量为1-4ml，结果较为准确，否则可加大或减少尿样量。4结论负荷试验是评定人体水溶性维生素营养水平方法之一。其方法是先给被测者大剂量维生素，然后测定一定时间内尿中该维生素排出量。若被测者体内有充足的该维生素储备，大剂量摄入后则将从尿中大量排出，反之，被测者的该维生素营养状况较差，因而组织中储备贫乏，摄入大剂量后组织将大部分或全部储留，则尿中排出量减少。测得尿中维生素C含量为6.7mg/4小时，口服500mg维生素C，4小时尿中排出维生素Cmg，一般认为尿中维生素C营养状况正常，所以根据所测得数据，本人维生素C营养状况正常。5参考文献[1]食品营养学、食品卫生学实验讲义[2]于守洋，刘志诚.营养与食品卫生监督检验方法指南.1989