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克氏双糖铁培养基（KIA）•配方：含蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、硫代硫酸钠、硫酸亚铁、琼脂、酚红、乳糖1％、葡萄糖0.1％•用途：主要用于观察肠杆菌科细菌是否分解乳糖、葡萄糖产酸产气、是否产生H2S。•斜面部分暴露于空气中，为有氧环境。而下部与空气隔绝是相对厌氧的环境(配KIA时，最重要的是斜面部分和管下部琼脂的长度，两者均为3cm，以保证两部分相对应的有氧或厌氧环境)。KIA指示剂为酚红，其在pH6.8时变为黄色;pH＞8.4为红色；KIA的pH为7.4，产少量的酸就可导致颜色变化;•如接种的是发酵葡萄糖不发酵乳糖的细菌，培养基内仅有0.1%葡萄糖可产酸。1)培养8-12h时，产生的酸足以引起斜面和底部颜色变黄色;2)葡萄糖被完全消耗，斜面部分的细菌在有氧条件下开始氧化降解氨基酸，产生的胺类很快就中和斜面上存在的酸；到18-24h，整个斜面又转换成碱性pH，颜色有变成红色。3)深部（厌氧区域），氨基酸降解不足以中和形成的酸，培养基仍为黄色。KIA结果观察：•A----发酵葡萄糖：底层呈酸性反应（黄色）斜面为碱性反应（红色）若发酵葡萄糖产酸产气，底层同时有气泡•C----发酵葡萄糖和乳糖：底层和斜面均呈酸性反应（黄色）•B----产生H2S：培养基变黑1.未接种细菌3.分解乳糖和葡萄糖产酸产气、硫化氢阴性（AA＋－）2.分解乳糖和葡萄糖产酸不产气、硫化氢阴性（AA－－）4.不分解乳糖、分解葡萄糖产酸不产气、硫化氢阴性（KA－－）5.不分解乳糖、分解葡萄糖产酸不产气、硫化氢阳性（KA－＋）