克隆形成实验

克隆形成实验1、取对数生长期的细胞，按250个/孔接种于5cm培养皿中，5ml，过夜培养使细胞贴壁。2、细胞贴壁后换含茶血清和生理盐水血清培养基，5ml，两种培养基血清浓度分别为5%，10%，20%，同时设置3孔重复。3、培养10d以后，用甲醇固定10min，待甲醇挥发完全，用10%Gimsa（取一份gimsa染液，加十分蒸馏水）染色15-30min，用蒸馏水洗，放置干燥，镜检计数。4、克隆形成率=克隆数/接种细胞数×100，克隆形成抑制率（%）=（1-实验组克隆形成率/对照组克隆形成率）×100%