高效液相色谱法在青霉素生产工艺中的应用研究

龙源期刊网高效液相色谱法在青霉素生产工艺中的应用研究作者：郑红娜来源：《科学与财富》2016年第13期摘要：随着科学技术的迅速发展，我国的医疗事业和医疗检测事业也得到了较大的进步。青霉素是在临床医学中具有重要作用的抗生素类物质，能够抵抗病菌的感染，变相提高机体的免疫能力。近年来，国家加大了对医药的质量安全的认定，同时也保证了社会生活的稳定进行。文章对高效液相色谱法在青霉素生产中的应用进行了分析，根据一系列的适用性试验和样品验证，通过对吸收峰值的分析，确定了青霉素中的主要成分。同时也证明了高效液相色谱法的检测简便性和高效性。关键词：青霉素钠；青霉素钾；高效液相色谱法；有关物质在青霉素生产工艺中，需要对生产过程进行成分的认定，但是在中国药典的记载中，还没有适合的检测方案。但是相似的药品检测已经在高效液相色谱法中得到了成分的检测。高效液相色谱法主要是以液体为流动相，并在高压的作用下，将混合药物在设备中进行成分的分离，同时在检测设施中对相应的成分进行认定。由于其具有高灵敏度，该设备已经在化工和医学方面有了较广泛的应用。一、仪器与试药Agilent1100型色谱系统。青霉素对照品（中国药品生物制品检定所，批号为130437—200502，含量为88.8%）；青霉素钠、注射用青霉索钠、青霉素钾、注射用青霉素钾（均为国内药厂产品）；磷酸二氢钾、磷酸均为分析纯，乙腈为色谱纯。二、方法与结果1、色谱条件选择流动相：USP29，BP2007，EP5.0中，青霉素钠（钾）的有关物质采用梯度洗脱，流动相A为磷酸盐缓冲液一甲醇一水（10：30：60），流动相B为磷酸盐缓冲液一甲醇一水（10：40：50），这两种流动相黏度较大，会使柱压过大，因此参照2005年版《中国药典（二部）》含量测定方法，以磷酸盐缓冲液和乙腈为流动相。检测波长：利用DAD检测器的全波长扫描，在210～300nm波长范围内选取不同波长，对青霉素的起始物、中间体和主要杂质的HPLC图进行比较，结果在225nm波长处色谱峰信息最多，且各峰分离良好。龙源期刊网洗脱方法：USP29，BP2007，EP5.0中青霉索钠（钾）的有关物质测定采用梯度洗脱，2005年版《中国药典（二部）》中含量测定为等度洗脱。分别按梯度洗脱和等度洗脱试验。结果表明，等度洗脱主峰的保留时间为40.02min，在66.26min处有一杂峰，按一般要求有关物质检查保留时间至少是主峰保留时间的2倍，等度洗脱运行时间过长，因此选择梯度洗脱方法。2、色谱条件与系统适用性试验3、可能的有关物质确定根据现有生产工艺，在成品的青霉素原料中可能会有加入的前体苯乙酸及中间体产物6一APA。β一内酰胺是结构中最不稳定的部分，易发生水解和分子重排，主要杂质有青霉噻唑酸、青霉酸、青霉醛、青霉胺、俚一青霉噻唑酰基羟胺酸、青霉烯酸等。4、方法学考察专属性考察：取苯乙酸和6一APA适量，用水溶解后，即得起始物及中间体样品溶液，备用。将配制好的溶液在上述色谱条件下测定，发现起始物及中间体与主峰均达到基线分离。将样品进行酸、碱、强光、高温、高湿及氧化破坏，并将处理好的溶液在上述液相色谱条件下测定，发现加速破坏所产生的杂质峰与主峰均达到基线分离。5、样品检测三、结果与讨论在高效液相色谱法中需要借助流动相进行青霉素的应用分析，但是在实际的检测中，在青霉素的流动相中存在甲醇物质，虽然对青霉素物质的检测没有误差的影响，但是在青霉素盐在于甲醇的混合中，会增加物质的粘性，不利于液相色谱吸收峰值的建立，往往都是在较大的柱压环境中，实现了设备的正常使用，因此要更换流动相中的甲醇物质，通过实验表明乙腈作为适合。上述实验中分别采用于市场环境中的青霉素物质，通过高效液相色谱法分析表明，青霉素的杂质含量都较低，符合国家的药品检测标准。其中在杂质含量是否标准的测定中，要以溶液中主峰的吸收峰面积为对照，计算每种杂质吸收峰面积之和，通过面积和不得大于主峰面积的1.0%为标准进行数据验证。并要严格按照高效液相色谱法的实验流程检测，提高药品检测的精确性。本法不仅可以有效控制药品的质量，大大提高标准的严谨性，还使国内产品与国际产品同步，为打开国际市场创造了条件，促进了国内医疗事业的发展。结语：通过对青霉素生产过程的质量和成分认定，能够确立药品的安全性，提高医疗药品的质量安全，并在严格的药品认证中建立统一的标准，并利用准确的验证方法，提高药品的检测水平。高效液相色谱法在近年来的药品检测中应用十分广泛，并通过高效和精准的数据分龙源期刊网析，提高了药品质量监督水平，保障了人们医疗安全的同时，也提高了我国的医药建设水平。在未来的发展中，还要对医药的验证方法进行探索，提高医药的科学化建设。参考文献：[1]胥秀英，谢云，刘红，张红兰，郑一敏.反向高效液相色谱法在吗替麦考酚酸酯合成新工艺检测中的应用[J].重庆理工大学学报，2014（01）.[2]李宝全.谈青霉素的生产工艺过程[J].黑龙江科技信息，2015（02）.[3]吴旭国.浅谈青霉素的生产工艺过程[J].民营科技，2012（02）.