高效液相色谱仪维护保养操作规程

题目U3400高效液相色谱仪维护保养操作规程第1页共6页编码SOP-YMP-034版次01起草部门审核QA审核批准起草日期审核日期审核日期批准日期颁发部门总经办颁发数量份生效日期分发单位质量部、后勤保障部目的:建立高效液相色谱仪维护保养规程。范围：高效液相色谱仪的维护保养。责任：质量部、后勤保障部负责人。内容：1.泵的维护1.1流动相的更换1.1.1将新流动相置于储液瓶中。1.1.2打开放空阀，启动泵使新的流动相从放空阀出口流出20ml.左右。1.1.3关闭放空阀，然后将进样阀与色谱柱相连接端卸开，用小容器放置于进样阀的出口处。1.1.4启动恒流泵，让流动相从进样阀出口流出10ml左右。1.1.5重新连接色谱柱，设定适当流速，当流动相流出约30倍于色谱柱体积，并且检测器基线平恒后，流动相更换完毕。1.2换非互溶性流动相（如甲醇系统更换为正己烷系统）1.2.1准备50ml能与新旧流动相互溶的中介溶剂（如异丙醇）。1.2.2用中介溶剂更换泵中的旧流动相，步骤同‘更换互溶流动相’中的1－5过程（不要接色谱柱）。1.2.3如果色谱柱中流动相也需要更换，用该溶剂冲洗色谱性。1.2.4准备新流动相并置于储液瓶中。1.2.5用新流动相更换中介溶剂步骤同‘更换互溶流动相’中的1－5过流动相更换完毕。1.3换缓冲液流动相（如磷酸盐缓冲液更换为甲醇系统）1.3.1取超纯水或去离子水500ml。1.3.2用水更换色谱系统中缓冲液（不包括色谱柱），具体步骤与‘更换互题目U3400高效液相色谱仪维护保养操作规程第2页共6页编码SOP-YMP-034版次01溶流动相’中的1－5过程相同。1.3.3用水含量10%－60%范围的溶剂冲洗色谱柱中的盐。1.3.4用新流动相更换水或冲洗色谱柱溶剂，具体步骤与‘更换互溶流动相’中的1－5过程相同。1.3.5【注意】由于一般缓冲液遇到甲醇、异丙醇等高含量有机溶剂混合液时容易将缓冲液中盐结晶出来，而结晶盐对密封圈、柱塞杆以及进样阀内部转子和定子都有很大的损坏，也容易阻塞输液管路，因此要特别仔细操作。1.3.6用缓冲液作流动相或一段时间不使用泵，在关机前，首选用含量较高的超纯水或去离子水混合溶剂冲洗色谱柱和系统中的盐，然后用纯甲醇或乙腈冲洗。2.恒流泵中气泡的排除在初次使用、长时间没有使用、流动相脱气效果不好等情况下系统内会出现气体，导致压力不稳、流速不稳甚至不能输液等问题。一般按如下顺序排除系统内气泡：2.1打开放空阀，按仪器前面板的“冲洗”功能键，用大流量冲洗系统直到流出的液体连续，证明气泡已经排除；2.2如果用“冲洗”状态仍不能吸液，可以用吸耳球或注射器在排液口抽吸，直至液体流出；2.3如果仍然无液体流出，可能是球阀座粘连，取出单向阀（取出方法见零件更换部分），向单向阀两端分别吹气，一通一堵为正常，两端均堵说明阀球阀座粘连，需清洗阀球阀座（见‘单向阀的拆装与清洗’）。3.在线溶剂过滤器的清洗为了防止由于流动项杂质微粒进入色谱系统，P203高压恒流泵在放空阀内安装了在线过滤器，经泵出口流出的液体通过在线过滤器，经排空管流出的溶液不通过在线过滤器。仪器使用一定时间后，建议用户清洗在线过滤器的烧结不锈钢过滤片。用扳手卸下压帽，将密封环和烧结不锈钢过滤片一同取出清洗，清洗后按原位装上。题目U3400高效液相色谱仪维护保养操作规程第3页共6页编码SOP-YMP-034版次01清洗具体过程如下：3.1取下过滤片放在（1：4，V/V）硝酸溶液的烧杯中超声清洗15分钟。3.2取出后用蒸馏水超声清洗10分钟。3.3用吸球吹出过滤头中的液体。3.4再用蒸馏水超声清洗10分钟（正相系统注意将过过滤片烘干）。4.溶剂过滤头的清洗由于溶剂不干净，杂质有可能阻塞溶剂过滤头上的过滤板孔隙；或长时间使用缓冲液，过滤头表面容易产生一层膜，阻碍流动相正常通过。严重时，即使是已超声过的溶剂，泵吸液时也会有气泡在四氟输液管里产生，因此应经常对过滤头进行清洗。具体方法是：4.1取下过滤头放在（1：4，V/V）硝酸溶液烧杯中超声清洗15分钟。4.2取出后用蒸馏水超声清洗10分钟。4.3用吸球吹出过滤头中的液体。4.4再用蒸馏水超声清洗10分钟。4.5用吸球吹净过滤头中的水份。4.6将过滤头重新插入溶剂瓶中（正相系统注意将过滤头烘干）。5.柱塞杆后部的清洗5.1当使用含盐的流动相时，由于脱水或蒸发，有可能在宝石柱塞杆密封圈的后面形成晶体。泵运动时这些盐晶体会损坏密封圈和柱塞杆，因此最好每天开机前和关机后都要用纯净水冲洗一次密封圈（在柱塞密封圈和二级密封圈之间），保持清洗管内有水以防止形成晶体。5.2取一内径为1.6mm合适长度的塑料管套入所要清洗泵头的上清洗管：另再取一内径为1.6mm合适长度的塑料管套入所要清洗泵头的下清洗管，塑料管另一端插入废液瓶中。5.3用针头外径为1.6mm的塑料注射器吸取一定的清洗液（如纯净的水），将针头插入连接上清洗管的塑料管的另一端。5.4缓慢将清洗液注入清洗管中。题目U3400高效液相色谱仪维护保养操作规程第4页共6页编码SOP-YMP-034版次015.5此时高压泵最好是在正常运转，连续重复数次，即可达以清洗柱塞杆的目的。6.单向阀的拆装与清洗6.1通常单向阀不用清洗。然而，阀中一旦有沉渣就会影响其性能。当单向阀已完全组装好时，用下面的方法可使其得到改善。6.2入口单向阀取出：将输液管从入口压帽拆下，用扳手卸下入口压帽，取出单向阀组件。6.3【注意】记住单向阀组件的位置，单向阀组件的标记通常是向下的方向。6.4出口单向阀取出：用扳手将主副泵腔连接管拆下，用扳手卸下出口压帽，取出单向阀组件。6.5乙醇超声清洗15分钟两次，吹净里面的溶剂。将清洗好的单向阀组件按原位置重新装配在泵头上，注意单向阀组件的标记环位置。6.6在整体清洗单向阀组件无效时，需要拆开单向阀组件来冲洗。6.7【注意】为了避免阀组件的丢失，冲洗时用一个小容器盛装是一个好办法。如果泵较长时间不用（超过一个月），必须用去离子水清洗泵头及单向阀，以防止阀被阀座“贴住”，泵头进流动相。7.泵头的拆卸与安装7.1泵头整体的拆卸与安装:7.1.1拆卸泵头无需打开机箱盖，泵头的拆卸与安装具体做法如下：7.1.2卸掉泵头上所有与泵头相连接的输液管路7.1.3用仪器所配的3＃内六角扳手，均匀旋下四个泵头固定螺丝，泵头即可卸下。7.1.4安装泵头时，注意要均匀旋紧四个泵头固定螺丝，泵头即可卸下。7.1.5连接拆装泵头时卸掉的输液管路。7.2柱塞密封圈的更换:7.2.1柱塞和柱塞密封圈长期使用会发生磨损，主要与流量、操作压力和所使用的流动相有关。因为这些可变因素对磨损的影响程度不确定，所以部件的耐题目U3400高效液相色谱仪维护保养操作规程第5页共6页编码SOP-YMP-034版次01磨程度也是不确定的。7.2.3当更换柱塞密封圈时，有必要也检查一下宝石柱塞杆的表面有无损耗。如果表面纵向上有小的划痕，也要更换这些柱塞，因为有磨损的表面将导致密封圈更大程度的损耗。7.2.4泵头的拆卸与安装具体做法如下：7.2.4.1泵头置于工作台上压住压板（4.10），用2.5＃内角搬手，均匀松开两个固定螺钉（4.11）,取下压板（4.10）7.2.4.2卸下导向套（4.9），柱塞杆组件（4.8），柱塞弹簧（4.6），定位套等。7.2.4.3在灯光下用放大镜来观察柱塞杆表面是否有轴向磨损，如无磨损待清洗：否则需要更换柱塞杆。7.2.4.4用镊子小心地从泵体中取出柱塞密封圈（除非更换塞杆密封圈，一般用户不宜自行拆卸）。7.2.4.5将新的密封圈（其带弹簧的开口应朝泵头方向）放入泵头体中。7.2.4.6泵头置于工作台上，缓慢推压板（4.10），将两柱塞杆压入柱塞密封圈，均匀旋紧两个因定螺钉（4.11）。8.【注意】柱塞杆非常容易断，拆卸组装应小心。保险丝的更换8.1保险丝更换过程如下：8.2关掉电源开关。8.3从电源插座上取下电源电缆。8.4用十字螺丝刀将保险丝后盖打开。换上新保险丝后，推上保险丝盒盖。【注意】要使用相同型号的保险丝。保险丝型号：250V/0.1A（5×18mm）题目U3400高效液相色谱仪维护保养操作规程第6页共6页编码SOP-YMP-034版次01附：变更记载版本号生效日期变更原因、依据及变更内容01新建立9.检测器的故障排除当仪器在运行过程中出现反常现象时，按下列方法检查：症状可能原因原因确定解决方法1.短刺2.锯齿型基线3.连续的尖刺汽泡流过流动池连接好流动池的入/出口管，取出流动池，在流动状态下检查有无气泡，以及窗口或流动池有无污染堵塞1.给池出口端加压（0.2－0.3Mpa）或连－0.3mm×2m背压件。2.流动相脱气1.随着泵的往复出现尖刺2.基线不平稳流动池中有气泡用甲醇冲洗流动池内部，卸下流动池的入口管接头，用注射器将甲醇从出口管推进除去气泡。1.漂移2.噪音过大流动池窗口污染清洗流动池1.漂移2.涌动流动相中含有杂质停止流动时，漂移停止或只安装空流动池时，漂移停止。检查泵、柱、储液瓶和流动相有无污染物。噪音过大光源灯变暗换上新的氖灯。基线随着泵的往复出现噪音仪器处于强空气中或流动相肪动1.改变仪器放置位置，将它放在受保护环境中。2.用一调节阀或阻尼器以减少泵的脉动。