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一、准备1、打开仪器设备2、将washtool插入样品池，形成闭合流路3、组装注射针二、清洗1、洗涤剂①300mL超纯水加入3mL洗涤剂配制成1%洗涤剂清洗样品池②2支注射针洗5遍2、超纯水①2L水洗样品池（1.5-3L）②2支注射针洗30-50遍Ps：清洗干净很重要三、脱气样品、buffer（2mL）、超纯水（2mL）500-600mmHg脱气10min四、加样1、参比池①已脱气的超纯水或buffer300μL润洗2遍②吸取已脱气的超纯水或buffer300μL，轻弹注射器壁赶出气泡③将注射器对准参比池（右侧孔）插入，轻轻碰触底部后抬起约1mm，缓慢推入④用镊子放入黑色封闭针，封闭参比池⑤一般一周换一次水，但是必须保证样品池与参比池液体体积相同，建议每次用之前进行更换2、样品池①已脱气的超纯水300μL润洗2遍②吸取样品300μL，轻弹注射器壁赶出气泡（注：有效体积为190μL，但是加入体积少于300μL，仪器不稳定）③将注射器对准样品池（左侧孔）插入，轻轻碰触底部后抬起约1mm，缓慢推入3、注射针（50μL）①将空的注射针旋入黑色手柄内，放置仪器上（手柄上量程稍偏右感觉放置到槽内后向下用力、左旋、卡入槽内即可）②校准注射针量程（52μL），可看到手柄内黑色点上下移动，最后回到定部③取出注射针，先用buffer润洗2遍，并排除气泡后吸取样品50μL④将注射针旋入黑色手柄内，放置仪器上五、设置参数1、清除上次数据选择全部数据，点击“Delete”2、设置所需实验参数选择IncrementalTitration后点击“Insert”：①设置两次滴定的时间间隔，通常120（s）②样品单次注射体积：2（μL）③总注射次数：25点击“OK”3、样品浓度在ExperimentDetails中设置SyringeConcentration（注射器中液体浓度），CellConcentration（样品池中样品浓度）4、其他参数：一般不用更改，为默认状态如：autoEquilibrate为Medium；Timeout不选则六、运行1、点击StimngRate选项后面的三角形蓝色键2、点击最上面的三角形绿色键3、保存数据至相应位置七、结束1、实验结束后将样品吸出2、按照实验开始时清洗仪器的步骤进行清洗3、将样品池和参比池泡上300μL水4、收拾台面并带走废物