2019年生物安全培训个人防护和操作规范

生物安全实验室的个人防护和操作规范2019.12.16个人防护装备是指用于防止工作人员受到物理、化学和生物等有害因子伤害的器材和用品。在生物安全实验室中，这些器材和用品主要是保护实验人员免于暴露于生物危害物质（气溶胶、喷溅物以及意外接种等）危险的一种物理屏障。个人防护装备所涉及的防护部位：1、眼睛2、头面部3、躯体4、手5、足、耳（听力）6、呼吸道个人防护装备装备包括：1、眼镜（安全镜、护目镜）2、口罩、面罩、防毒面具3、帽子4、防护衣(实验服、隔离衣、连体衣、围裙)5、手套6、鞋套7、听力保护器等。个人防护装置选择原则1、实验室工作人员根据不同级别的生物安全水平操作选择个人防护装置。2、结合工作的性质选择个人防护装备个人防护装备要求工作人员应掌握的要点：1、必须十分了解和掌握自己工作性质和特点2、所涉及的实验工作需要使用个人防护装备的类型3、正确的使用方法个体防护的配备原则－1BSL－1实验室工作人员在实验时应穿工作服，戴手套必要时佩戴防护眼镜。完成实验，工作服必须脱下留在实验室并定期消毒洗涤。个体防护的配备原则－2BSL－2实验室除符合BSL－1的要求外，还应该符合下列条件：在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服。离开实验室时，防护服必须脱下留在实验室内。先消毒，然后统一洗涤或丢弃。戴帽子和口罩。如可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套。工作完全结束后方可除去手套。不得戴着手套离开实验室。个体防护的配备原则－3当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行，而必须采取外部操作时，为防止感染性材料溅出或雾化危害，必须使用面部保护装置（护目镜、面罩、个体呼吸保护用品或其他防溅出保护设备）。个体防护的配备原则－4BSL－3实验室除符合BSL－2的要求外，还应该符合下列条件：在进行感染性组织培养、有可能产生感染性气溶胶的操作时，必须使用个体防护设备（两层防护服，两层手套，生物安全专业防护口罩）。当不能安全有效地将气溶胶限定在一定范围内时，应使用呼吸保护装置、佩戴眼罩等。个体防护的配备原则－5工作人员在进入实验室工作区前，应在专用的更衣室（或缓冲间）穿着背开式工作服或其他防护服。工作完毕必须脱下工作服，不得穿工作服离开实验室。可再次使用的工作服必须先消毒后清洗。在实验室中必须配备有效的消毒剂、眼部清洗剂或生理盐水，且易于取用。应配备应急药品。个体防护的配备原则－6在使用已被传染性物质污染的仪器时，需戴手套。在使用电话、计算机等设备进行文书工作前，必须脱掉手套。谨记不能带着手套离开BSL-3实验室。所有离开BSL-3实验室的物品必须正确消除污染，并放在干净的容器或袋子中。注意事项1、个人防护用品应符合国家规定的有关标准2、在危害评估的基础上，按不同级别的防护要求选择适当的个人防护装备3、对个人防护装备的选择、使用、维护应有明确的书面规定、程序和使用指导4、使用前应仔细检查，不使用标志不清、破损或泄漏的防护用品（一）眼睛防护装备1、安全眼镜和护目镜A）在所有易发生潜在眼睛损伤（物理、化学和生物因素引起）的生物安全实验室中工作时必须采取眼睛防护措施B）所选用的眼睛防护装备的类型取决于外界危害因子对眼睛危害程度。建议：工作人员在生物安全实验室工作时不配戴隐型眼镜不得戴眼镜防护装备离开实验室区域！d.眼镜配戴和卸下方法示意图对某些特殊的操作如腐蚀性液体喷溅出或细小颗粒飞溅出时佩戴安全眼镜是不够安全的！1）用铬酸类溶液洗涤玻璃器皿、碾磨物品.2）或在使用玻璃器皿进行极具爆破或破损危害（例如在压力或温度突然增加或降低的情况下）的实验室操作时。---在这些情况下，有必要保护整个面部和喉部，应该佩戴面罩。眼睛防护装备2、洗眼装置如发生腐蚀性液体或生物危害液体喷溅至工作人员的眼睛时，应该（或在同事的帮助下）在就近的洗眼台（洗眼装置）用大量缓流清水冲洗眼睛表面至少15到30分钟。事后必须立即填写事故报告单并立即报告主管领导。（二）淋浴装置和应急消毒喷淋装置1、规定：--BSL-2实验室在必要时应有应急喷淋装置--BSL-3实验室应设置淋浴装置（清洁区），必要时在半污染区设置应急消毒喷淋装置。2、要求：保持管道的通畅、必须告知工作人员应急消毒喷淋装置的摆放位置、培训其操作方法。---应急消毒喷淋装置在使用中可用大量冷水淋洗污染的部位，淋洗时间至少需要20分钟。如果为化学物品溅出污染，用大量急水冲洗。当使用紧急淋浴装置后必须立刻填写事故报告单并立即报告主管领导（三）头面部防护装备1、口罩普通口罩仅可以保护部分面部免受生物危害物质如血液、体液、分泌液以及排泄物等喷溅物的污染适用于---BSL-1或BSL-2实验室中使用——防护面罩——一次性面罩一次性简易防护帽2、防护帽在生物安全实验室中佩戴简易防护帽可以保护工作人员避免化学和生物危害物质飞溅至头部(头发)所造成的污染。要求：工作人员在实验操作时应佩带防护帽无纺布制成的一次性简易防护（四）呼吸防护装备1、当实验室操作不能安全有效的将气溶胶限定在一定的范围内要求使用呼吸防护装备。2、呼吸防护的有效装备----防护面具（正压面罩、个人呼吸器和正压防护服）使用：1、在进行高度危险性的操作（清理溢出的感染性物质和气溶胶）时，可以采用防护面具来进行防护。2、根据危险类型来选择防护面具。一次性防护面具一次性防护面具特点：1、在防护面具中装有一种可更换的过滤器，它可以保护佩戴者免受气体、蒸汽、颗粒和微生物及气溶胶损害的影响。2、过滤器必须与防护面具的正确类型相配套。3、为了达到理想的防护效果，每一个防护面具都应与操作者的面部相吻合。正压防护服使用中的全罩式防护面具正压面罩正确佩戴一次性防护面具使用要点：（1）佩戴时选择合适和合格的防护面具（2）遮盖住鼻子、口和下颚（3）用橡皮筋（松紧带）固定在头部（4）调整在合适的面部位置并加以检验（5）吸气时防毒面具应该有塌陷状（6）呼气时在面具周围不应该漏气卸下口罩时：首先提起面具下方橡皮筋（松紧带）越过头部，然后提起面具上方橡皮筋（松紧带）使面具脱离面部，值得注意的是：一次性防毒面具使用完毕后应先消毒再丢弃卸下一次性防护面具（六）手部防护装备——手套1、手套应在实验室工作时使用。2、在接触感染性物质（血液、体液、分泌液、渗出液、以及接触粘膜和非完整皮肤时），必须使用合适的手套以保护工作人员避免受到污染物溅出或生物污染的事故所造成的损害。3、手套被污染，应该尽可能早的脱下，消毒后丢弃。4、手套应按所从事操作的性质符合舒适、灵活、握牢、耐磨、耐扎和耐撕的要求，并应对所涉及的危险提供足够的防护。5、对实验室工作人员进行手套选择、使用前及使用后的配戴及摘除等培训。6、一次性手套不得重复使用,必须先消毒后丢弃。规范使用手套的几个要点：1.手套的选择：生物安全实验室一般使用乳胶橡胶或聚腈类或聚氯乙烯手套用于对强酸、强碱、有机溶剂和生物危害物质的防护2.手套的检查：在使用手套前应该检查手套是否退色、穿孔（漏损）或有裂缝。可以通过充气试验，将其浸入水中观察是否有汽泡来检查手套的质量聚氯乙烯手套乳胶手套聚脂手套3、手套的使用：a）一般情况下，佩戴一副手套即可（BSL-1和BSL-2实验室)b）若在生物安全柜中操作感染性物质时（BSL-3实验室）应佩戴两副手套。c）在操作过程中，外层手套被污染，立即用消毒剂喷洒手套并脱下后丢弃在生物安全柜中的高压灭菌袋中并立即戴上新手套继续实验。d）戴好手套后应完全遮住手及腕部，如必要可覆盖实验服衣袖。4、手套的清洗和更换：a)使用一次性手套，不可重复使用。用后立即进行高压灭菌消毒然后丢弃。b)不得戴着手套离开实验室区域.C)工作人员在完成感染性物质实验,离开生物安全柜之前,应该脱去外层手套丢入生物安全柜内的高压灭菌袋中。然后用消毒液喷洗内层手套，以避免污染门捏手、电灯开关、电话等（BSL-2和BSL-3实验室）。5、避免手套“触摸污染”a)戴手套的手避免触摸鼻子、面部和避免触摸或调整其他个人防护装备（如眼镜等）b)避免触摸不必要的物体表面如灯开关、门或捏手等c)如果手套撕破应该脱去，在换戴新手套前应清洗手部d)注意尽量不去触摸工作台面和其他物品戴手套注意要点:1)在实验室工作中要一直保持戴手套状态并选择正确类型和尺寸的手套；2)将手插入手套后将手套口遮盖实验服袖;手套的手要远离面部。脱手套过程及注意要点:用一手捏起另一近手腕部处的手套外缘,将手套从手上脱下并将手套外表面翻转入内；用戴着手套的手拿住该手套；用脱去手套的手指插入另一手套腕部处内面；脱下该手套使其内面向外并形成一个由两个手套组成的袋状；丢弃在高温消毒袋中并进行消毒处理。洗手根据(GB19489-2019）要求:1、应该安装洗手装置，该装置可以是脚控或红外控制的洗手池，或者配置一个酒精擦手器。2、洗手是一种减少有害物质暴露的有效措施，要经常洗手。a）在处理活体病原材料或动物等生物危害物质后，b）在脱去手套之后和离开实验室之前，c）在脱卸个人防护装备时发生手部可见的污染时，洗手后再继续脱卸其他个人防护设备之前。洗手一般用肥皂和水或使用酒精擦手器。（五）身体防护装备防护服（实验服、隔离衣、连体衣、围裙以及正压防护服）1、在实验室中工作人员应该一直或持续穿上防护服2、清洁的防护服应放置在专用存放处3、污染的防护服应放置在有标志的防漏消毒袋中4、每隔适当的时间应更换防护服以确保清洁5、当防护服已被危险材料污染后应立即更换6、离开实验室区域之前应脱去防护服。实验服隔离衣连体防护(六）足部防护装置当实验室中存在物理、化学和生物危险因子的情况下，穿合适的鞋子和鞋套或靴套。可以防止实验人员足部（鞋袜）避免受到损伤。BSL-2和BSL-3实验室要坚持穿鞋套或靴套。BSL-3和BSL-4实验室要求使用专用鞋。禁止在生物安全实验室中穿凉鞋、拖鞋、露趾和机织物鞋面的鞋。使用方法示意图靴套使用方法示意图鞋套使用方法示意图(七)听力防护装备御寒式防噪音耳罩一次性防噪音耳塞穿戴个人防护装备的顺序戴口罩→戴帽子→穿防护服→戴防护眼镜→穿鞋套→戴手套脱卸个人防护装备的顺序外层手套→防护眼镜→隔离衣→口罩和防护帽→鞋套→内层手套从事病原微生物操作遵循原则１、所有操作人员必须经过培训，通过考核，获得上岗证书。２、对所从事的病原微生物及相关操作进行危险评估并制定防护措施。３、熟悉实验室运行规则，正确操作和使用仪器和设备。４、掌握各种感染性物质操作准则和技术要点。病原微生物实验室的生物危险气溶胶(aerosol)：固体或＼和液体微粒稳定地悬浮于气体介质中形成的分散体系，粒径一般为0.001~100μm。微生物气溶胶(microbialaerosol)：微粒中含有微生物。感染性气溶胶(infectiousaerosol)：微粒中含有致病微生物。飞沫(droplet)：由于动物打喷嚏、咳嗽和呜叫等产生的以唾液、粘液和微生物等为主要成分的气溶胶。飞沫核(deopletcore)：当飞沫中的水分蒸发后剩余的粘液蛋白和微生物等。飞沫有90％以上的直径小于5μm，飞沫核的直径一般为1~2μm，均能长期飘浮在空气中，是引起动物疾病传播的重要途径。气溶胶粒子的大小不同，经呼吸道到达体内的深度和归宿不同粒径10μm，一般被阻留在鼻腔内；5~10μm，可到达支气管；5μm，可进入细支气管和肺泡。气溶胶粒子越小，进入的部位就越深：1μm的在肺泡内沉积率最高；0.4μm的粒子能较自由地进出肺泡并可随呼气排出体外，沉积较少。实验室中有可能产生微生物气溶胶的操作离心组织研磨混合培养液真空抽滤使用匀浆器、摇床和超声处理器（推荐使用塑料容器）实验室中有可能产生微生物气溶胶打开装有冻干物的安瓿管收集微生物培养物热的接种环放在菌液或菌苔上（推荐使用一次性接种环）在玻璃片上做触酶试验（推荐使用试管和毛细管等法）液体从吸管掉落到工作台面上从吸管中将最后一滴液体吹出（推荐使用不需要吹出最后一滴液体的移液管）用移液管反复吹吸混合磨口瓶子打开瓶塞时（推荐使用螺口