技术路线图(国自然)

“实验万事屋”出品技术路线例子1（蓝色已完成，紫色为实验目的）深度测序分析XX改变引起的基因表达谱的改变PathwayArray检测凋亡、侵袭转移相关通路蛋白表达变化根据下游靶分子群，利用生物信息软件Genes2Networks、Go-anaslysis建立XX调控相关的信号通路总结XX发挥调控作用的精细分子机制收集临床300例乳癌样本制备组织芯片，检测分析XX的表达、亚细胞定位，回顾性分析XX和肿瘤预后、分型的相关性验证XX下游关键调控分子在临床样本中的表达情况证实XX抑制癌变发生的功能作用和效应通路GSTpulldown联合Co-IP实验验证与XX直接相互作用的蛋白制备互作蛋白突变体，分析相互作用结合位点ChIP联合芯片技术鉴定与XX发生相互作用的基因DNA组织标本证实XX是重要的抑癌因子前期工作（已发表SCI）XX在乳腺癌组织中表达下调/缺失、癌旁高表达XX细胞实验功能验证XX-RNAi初步分子机制侵袭转移实验迁移实验XX在乳腺癌中确切的分子调控机制在体水平动物实验：裸鼠成瘤肿瘤组织和癌旁组织亚细胞定位不同体外功能实验+/-功能验证MDA-MB-231细胞较高表达MCF-7细胞低表达XX过表达细胞周期增殖曲线克隆形成XX在抑制乳腺癌癌变发生中发挥关键作用XX在体水平功能证实RNAi/回复过表达实验验证XX对下游信号通路的调控作用qPCR实验验证XX的结合目的基因DNA结合验证EMSA实验验证XX的结合目的基因XX蛋白结构生物信息学分析“实验万事屋”出品例子2（细胞水平、组织水平分开画图，如果有动物水平再另外画一个）1、细胞水平：2、组织水平“实验万事屋”出品例子3“实验万事屋”出品例子4HPV致病DNA正向示踪分析HPV致病蛋白逆向求源分析分离克隆宫颈癌细胞的表达差异DNA致癌相关蛋白一级分析合成相应mRNA生物探针表达谱基因芯片杂交分析鉴定相应蛋白的差异表达致癌相关蛋白二维显示分析共价离子蛋白芯片计算机距阵分析芯片原位蛋白分解距阵分析析译致病基因DNA核苷酸序列核酸印迹杂交分析筛查致病DNAPapnetPapnet筛查宫颈癌变筛查宫颈癌变DNA蛋白蛋白DNA病毒致癌蛋白分子生物特性分析病毒致癌蛋白分子生物特性分析提出干预阻断宫颈癌发生方案及策略提出干预阻断宫颈癌发生方案及策略病毒致癌分子调控机理分析HLA系统P53、Rb、E2F-1端粒体系统细胞素、活化因子“实验万事屋”出品例子5“实验万事屋”出品例子6（可以再改进下，不够美观）“实验万事屋”出品例子7“实验万事屋”出品例子8“实验万事屋”出品例子9“实验万事屋”出品例子10（图不够清楚，但仍可以看出结构清晰）“实验万事屋”出品例子10扫一扫轻松关注