西洋参皂苷的提取及纯化衣洁菡目录前言111目的和意义2国内外的研究现状3人参皂苷的分类4实验方法及步骤5本项实验的创新点67前言西洋参是人参的一种,又称花旗参,两者虽然同种,但因为气候影响,前者的参面横纹比后者更明显,有效成分含量也较高。人参皂苷为西洋参的主要有效成分,它具有西洋参根的主要生理活性,是由皂苷元和糖相连构成的糖苷类化合物。目的和意义由于人参皂苷尚未实现全化学合成,其单体皂苷只能从西洋参的根、茎等部位提取总皂苷后,经加工、分离及纯化得到。各种皂苷的含量、存在部位不尽相同,且药理作用有的相似、有的相反、有的具有独特的药理作用。为了充分发挥各单体的生物活性,有望进一步对各单体进行制备,应用于新药开发领域。故对总皂苷的提取、人参皂苷Rb1和Re的分离和纯化进行了实验研究。人参各单体皂苷普遍具有调节免疫系统、降低血清中胆固醇含量、防止心血管疾病、消炎、解毒等生理功效。firstthenfinally国内外的研究现状人参皂苷的研究始于1854年,美国学者首先从西洋参中提取分离出了总皂苷,1962年藤田等人从人参根中分离得到了人参皂苷及苷元,70年代初,研究得到了多种人参皂苷单体。我国学者也对人参皂苷成分进行了深入的研究,从1981年到目前,匡学海、蔡培列、陈英杰等人已从人参属植物中发现了40多种人参皂苷。人参皂苷的分类:人参皂苷属四环三萜类化合物,按其苷元部分的结构不同可分为三种类型,既原人参二醇型皂苷(简称PPD),如人参皂苷Ra1、Ra、Rb1、Rb2、Re和Rd;原人参三醇型皂苷,(简称PPT),如人参皂苷Rf、Rg2和Rh1等;齐墩果酸,如人参皂苷Ro。实验方法及步骤:一、总皂苷的提取:1、取西洋参60ºC烘干粉碎,称取100g,用12倍量的70%的乙醇水浴加热回流提取3次(400mL×3),每次2小时。2、三次提取液混合,减压浓缩至50mL,得西洋参粗提液。3、D101大孔吸附树脂的预处理(具体见相关参考文献)4、西洋参粗提液用15倍量的水溶解,过滤后上预处理好的D101大孔吸咐树脂柱。先用水洗柱以除去大部分杂质,再用2%的NaOH溶液洗柱除去色素,后用2%的HCl溶液洗柱,再用水洗柱至流出液为中性。最后用90%(浓度根据文献及具体情况)的乙醇淋洗,收集流出液。5、流出液回收,60ºC减压干燥,得干燥黄白色粉末为西洋参总皂苷,称重并用HPLC检测人参皂苷Rb1和Re的质量分数。二、人参皂苷Rb1和Re的分离:取西洋参总皂苷6.0g,用30mL70%的乙醇溶解,加入300mL丙酮搅拌(丙酮的加入必须在搅拌下缓缓进行,以免二醇组皂苷析出过快将大量的三醇组皂苷包裹在沉淀中,而达不到预期的分离效果),析出沉淀,静止放置。过滤沉淀并干燥,得棕黄色干燥粉末为A部分(Rb1),称重。将母液回收,减压蒸干,得棕黄色粉末为B部分(Re),称重。HPLC分别测定A、B中Rb1和Re的质量分数。三、人参皂苷Rb1和Re的纯化:A部分用20mL水溶解,加200mL丙酮搅拌,析出大量沉淀,静置,过滤,沉淀再用20mL水溶解,加200mL丙酮同法处理,静置,过滤,60ºC减压干燥,得黄白色干燥疏松粉末,为人参皂苷Rb1。称重并用HPLC检测,人参皂苷Rb1的质量分数。A部分丙酮沉淀的母液回收溶剂至干,得到的粉末与B部分合并,用30mL95%的乙醇溶解,加300mL丙酮搅拌,析出沉淀,静置,过滤,母液回收至干,再用20mL95%乙醇溶解,加200mL丙酮同法处理,过滤,溶液回收至干,再用丙酮同法处理一次,过滤,回收溶液至于,60℃减压干燥,得黄白色干燥疏松粉末,为人参皂苷Re。称重并用HPLC检测人参皂苷Re的质量分数。1、Rb1的纯化:2、Re的纯化:本项试验的创新之处:firstthenAfterthat首先建立了西洋参皂苷的实验室反应体系,利用该方法研究了人参皂苷的生物活性。本实验采用萃取、大孔树脂进行分离纯化,得到总皂苷和单体皂苷;采用高效液相对单体成分进行定量测定,结果稳定、可靠。具有重要的理论意义和应用价值,本研究不仅优化了人参皂苷的提取工艺,也为西洋参的药用价值做出了贡献。Discussionandconclusion123