猪的人工授精技术

牛羊冷冻精液的储存与运输汇报人：陆艳凤汇报时间：2015.7.8所在部门：江苏牧院动物科技学院冷冻精液的运输精液冷冻技术展望冷冻精液的保存精液冷冻保存意义内容第一讲精液冷冻保存意义1.1人工授精概念定义：利用人工和器械的方法采集公猪精液，对其进行品质检查，稀释保存等处理，再用器械把精液输送到发情母猪生殖器官内，从而使其受孕的一种配种方法。内涵（三要素）：（1）通过人为方式；（2）借用一定仪器设备；（3）实现母猪与公猪完美结合－－交配。人工授精技术环节：采精精液品质评定稀释保存运输输精等环节。1.2人工授精优越性减少种公猪饲养数量（减少90%），降低种猪生产成本；减少由公猪直配造成的疾病传播；充分发挥优秀公猪遗传潜力，提高利用率(是本交的300倍)；克服公母猪体格差异太大造成的配种困难；维持母猪群成批配种、分娩和断奶，改善猪群整齐度；优良基因的利用不受时间和地域的限制，加快遗传改良现实意义：①实现猪场净化；②提高母猪产仔数；③降低工作量；④提高专业化水平。1.3猪群生殖生理怀孕114天+产仔哺乳28天+在发情配种5天≈147天1.3猪群生殖生理1.3猪群生殖生理1.4国内外发展概况1、国外概况：欧美猪人工授精应用于20世纪70年代。①近年来美国畜牧界专家预计5～7年人工授精应用率将达到80％以上。②精液稀释剂研制使精液稀释后能保存5-7天，每次采集精液能分成10-20个单独头份。③先进授精器材，准确发情鉴定和授精，更好地掌握发情周期、适时配种，取得和本交一致甚至更好结果。1.4国内外发展概况2、国内概况我国人工授精始于60年代“四化”，技术效果不佳，主要由于缺乏恒温保存设备、缺乏精液营养液产品、缺乏一次性输精管、缺乏AI操作技术规范、缺乏对品种的认识等。近几十年来，通过我国畜牧科技工作者不断实践创新，无论技术水平及授精母猪头数都处在世界前列。目前，我国的猪产业完善了专业供精站建设，实行了配种补贴，受胎率比自然配种更高，同时也降低了成本、减少了疾病。第二讲人工授精效率分析2.1人工授精制约环节猪生产中相互制约5个环节影响人工授精效益的因素:1.品种是关键；2、营养是基础；3.健康是保证；4.环境是辅因；5、管理出效益。品种改良养殖环境饲料营养猪群保健生产管理2.2提高母猪受孕率的步骤SEMENOVA人工授精站1.公猪管理和照料2.精液采集3.精液加工4.精液包装1.刺激母猪发情2.发情鉴定3.站立发情4.排卵配种区域5.精液储存6.使用前准备7.输精8.妊娠检测2.3八个关键影响因素饲养公猪精液采集实验室准备工作精液处理与质量控制精液分装保存与运输发情鉴定正确输精早期诊断成功应用人工授精技术可让母猪分娩率高于85%，窝产仔数+0.5头2.3.1公猪管理重要注意点特殊的公猪饲料1.饲料的质量对用于人工授精公猪所产生的精液质量和数量的影响很大。2.公猪的体况太肥或太瘦都可能造成精液质量的下降。3.不平衡的饲料可能导致公猪的性欲下降和其他一些问题的发生。4质量差的饲料=低浓度的精液+低质量的精液+低数量的精液。5.公猪必须有一个舒适的环境，温度控制在20度，相对湿度70%左右。6.．经常的运动及常规的采精计划使公猪保持旺盛的工作激情。7．常规的免疫计划和驱虫方案使公猪站的公猪总保持最佳的健康水平。8.测试新引进的公猪，每头人工授精的公猪每年将产生2000个后代，所以对其精液质量的检测是必须的。记录一头新公猪最先配过的12头母猪以检查其精液的质量，不要使用混合精液或用其他公猪配这些测试母猪。乙脑细小病毒猪丹毒猪瘟疥癣2.3.2驯化新公猪（1）1.大多数种公猪都试着爬垮任何物体2.因种猪品种不同其性欲也表现不同3.确认假母台上用带有公、母猪气味的分泌物涂抹好4.让新种公猪观看一头有经验的老公猪采精过程5.确认年轻公猪不会产生疑惑6.使新公猪集中注意力于假母台的正确位置处7.保持足够耐心。每天驯化公猪不要超过20—30分钟8.不要生气愤怒或击打公猪，如此会使公猪失去信心杜洛克大白长白我确信她们看起来绝不是这样！讨厌！大小子2.3.2驯化新公猪（2）2.注意树立年轻公猪的自信心3.开始几次射出精液的精子密度很低，采集精液并不重要4.首先要驯化新公猪快速、正确地爬跨假母台5.在一个场内精液采集站，一头发情母猪可以关在紧邻假母台的栏内以刺激公猪性欲6.每周采集年轻公猪精液不超过一次7.至少用12头母猪进行精液配种测试，以确认其受孕率8.等到母猪产仔后通过仔猪进一步检测新公猪没有任何遗传缺陷你温暖的双手使我感觉很舒服好！只剩一天又该采我的精液了唇裂畸型腿疝气无肛门畸型尾畸型背1.一些公猪在开始阶段被采精时感觉非常敏感嘿！你介意吗？2.3.3精液采集1.采精是第一个步骤，也是最容易受到污染的阶段。2.准备好采精杯，放上采精袋和过滤纸，预热到37度。3.把预热好的采精杯放入保温的精液运送箱中，然后拿到采精区域。4.把公猪赶到采精区域，然后诱导公猪爬上假母猪。5.把采精杯从精液运送箱中取出，放在一个安全和容易拿到的地方。6.戴上双层手套，用干净的纸巾擦洗包皮囊。7..脱掉外层手套，用手握住阴茎，引诱公猪把阴茎全部伸出来。8.让第一次射出的液体流在地上，然后用干纸巾擦干净。精液受污染的危险来自于：1．包皮尿液2．水3．包皮囊上掉下的尘土4．空气中的尘埃5．汗液以上任何一个因素都可能破坏精液的质量。保温采精杯1升的采精保鲜袋过滤纸橡皮筋两双采精手套采精杯2.3.3精液采集1．当奶油状白色的液体开始流出来时，开始用采精杯采集。2.继续采集直到公猪完全停止。3.马上把采好精液的采精杯放入保温运送箱中，不要拿掉过滤纸。4.把保温运送箱放在转移窗口中，关上窗口的门。5.让公猪自己从假母猪上下来，不要推它或催它。6.把公猪放回自己的栏中，准备下一个采集。7..记住：很多精液从一开始采集时就污染了，破坏了精液的质量。8.我们必须在采集时保护精液受外界物质或温差变化的影响。实验室传送窗口采精区域空气中的尘埃水和空气包皮囊中的灰包皮液和尿液低温在进入采精杯前就污染了灰尘2.3.3精液采集手握采精法用温的生理盐水清洗猪腹部和包皮一手带双层手套，另一手持集精杯公猪伸出阴茎时，脱去外层手套用手紧握伸出的公猪阴茎螺旋状龟头顺其向前冲力将阴茎的“S”状弯曲拉直收集浓份精液于集精杯的一次性采精袋采精流程成年公猪：2次/周采精频率青年公猪：1次/周2.3.3精液采集3.4采集前实验室准备工作1．实验室的准备工作至少在计划采精前1小时必须开始2．实验室工作人员必须穿上工作服，擦净所有工作台、墙面和地面，保持室内没有灰尘，把实验室的温度定在22-24度之间。3．打开恒温水槽，预热到37度，准备好足够的稀释液，放入恒温水槽中4．把所有的采精器皿放在预热箱中，预热到37度5．准备好采精杯，放入预热箱中6．准备好检测设备：恒温载物台、显微镜、精虫计数器7．准备好记录本、识别用标签、笔等8．当采精员要开始采精时，把预热好的采精杯放入保温运送箱中，通过传递窗口送到采精区域。开始采精的时间开始做实验室准备工作的时间橡皮圈过滤纸1升采精袋采精区域实验室设备显微镜（恒温载物台）、精子密度仪、电子天平、恒温水浴锅、17度恒温箱、干燥箱、预热箱、双蒸馏水机、磁力搅拌器等器材采精杯、温度计、玻璃烧杯、塑料有柄烧杯玻璃棒、放水瓶、载玻片、盖玻片、洗涤瓶等耗材输精瓶、输精管、润滑剂、PVC手套、采精袋、精液过滤纸、橡皮筋、稀释粉等3.4采集前实验室准备工作2.3.5猪精液的品质检查品质检查的目的精液显微镜检查精液外观检查颜色乳白色或浅灰色呈云雾状绿色、黄色浅红色、红褐色气味略带腥味恶臭等异常气味pH值正常精液pH值为7.0~7.8pH值越低,精子密度越大采精量电子天平称量法按1g=1mL计射精量为200~500mL正常正常异常异常2.3.5猪精液的品质检查（外观检查）精子活率检查精子畸形率检查精子密度检查2.3.5猪精液的品质检查（镜检）玻片升温至37℃取精液10µl制片于37℃恒温台上显微镜下400倍观察精子与受精能力相关精子活率精液品质的指标按0.1~1.0的十级评分法进行评估目测估测法活率要求鲜精活率＞0.7才可进行稀释配制保存精液活率＞0.6才可以使用2.3.5猪精液的品质检查（镜检）玻片升温至37℃取精液10µl制片于37℃恒温台上显微镜下400倍观察精子玻片升温至37℃取精液10µl制片于37℃恒温台上显微镜下400倍观察精子估测法精子密度仪法血细胞计数法主观性强，误差大＜一个精子为“密”＝一个精子为“中”＞一个精子为“稀”最准确，但速度慢滴上1滴稀释精液原精液200μL3%NaCl稀释10倍计数板上放盖玻片计数5个中方格精子将该数乘以50万方便、时间短、重复性好猪精子密度一般为2~3亿/mL生产上主要以精子密度仪法检测2.3.5猪精液的品质检查（镜检）注意：让稀释后的精液通过毛细作用自行吸入！用吸管稀释后精液注入计数室共有两个对称的计数室2.3.5猪精液的品质检查（镜检）以图示次序计数，精子的头部为准，依数上不数下，数左右不数右的原则进行计数格线上的精子。白色精子不计数1mL原精液内的精子数＝5个中方个数的精子数×5×10×1000×稀释倍数如果为原精液，则不乘以稀释倍数2.3.5猪精液的品质检查（镜检）取中层精液抹片固定液固定20minGiemsa染色90min水洗并风干置1000倍油镜下观察精子＞300个畸形率检查方法显微镜直接观察伊红或姬姆萨等染色后普通显微镜观察畸形率要求一般要求不超过18%为宜染色后显微镜观查2.3.5猪精液的品质检查（镜检）把混合好的精液漫漫倒入输精瓶或精液管/袋中，每头份容量为100毫升盖上输精瓶盖或封好精液管/袋的口，贴上标签，慢慢冷却。对4小时以后才使用的精液，必须放入17度的恒温冰箱中保存在储存的过程中，精子会沉淀下去，每隔24小时以180度的角度漫漫转动输精瓶/管/袋每天必须对每一次采集的精液进行抽样，检查其活力或活率，用恒温载物台把载玻片加热到37度需要使用精液时，把分装好的精液从恒温冰箱中取出，可以让其慢慢升温把分装好的精液放入保温运送箱中，送到配种区域每天根据所需要输精的母猪数量，计算出所需要的精液头份数把输精瓶预热至37℃瓶盖封口恒温载物台只是在要输精时才把精液从冰箱中取出如果把用不完的精液再放回冰箱将破坏精液的质量2.3.6精液稀释与保存2.3.6精液稀释与保存稀释后精子的密度：每毫升不能低于1.5亿；稀释液与精液温度差不能超过0.5度；稀释液与精液混合时应当缓慢进行、高倍稀释时应当稀释一半后停顿一分钟后再继续进行稀释。保存温度生产上：常温17℃常温保存要求精液需缓慢降温，室温1~2h或纱布包裹每12h将精液摇匀1次，要轻缓均匀注意冰箱内温度的变化防止温度升高或降低减少保存箱开关次数，以减少对精子的影响使用前检查活率，活率＜0.6精液应弃之用稀释液保存的精液，应尽快用完2.3.6精液稀释与保存2.3.6精液稀释与保存2.3.7精液分装与运输精液的分装瓶装管装袋装分装简单方便用于冷冻保存输精方便，但需分装机分装后标注公猪品种公猪耳号生产日期稀释液名称精液运输关键保温、防震、避光运输注意事项运输前应检查活率，低于0.7的精液严禁调出包装瓶（袋）应排尽空气，以减少运输震荡运输过程中，放入保温箱中保温（16~18℃）到达目的地，检查精子活率，合格方可接收运输过程中，应严格避光2.3.7精液分装与运输2.3.8发情鉴定（现象）爬跨另一头母猪暗示将要开始发情。食欲减退。烦躁不安，当其它母猪休息时，却表现出要“找公猪”行为。渴望的表情，眼睛失去注意力。耳朵向上竖起。身体颤抖。接受背部按压时站立不动。尾巴上下摇摆。阴户红肿。阴道有黏液流出。母猪阴道“成熟”。如果把手指放在阴唇间有潮湿、温暖的感觉。母猪在发情期间将出现以上局部或全部症状。2.3.8发情鉴定（步骤）2.3.8发情鉴定（方法）发情鉴定最佳方法是当母猪喂料后半小时表现安静时进行，每天进行两次发情鉴定，上下午各一次，检查采用人工查情与公猪