搜索
1/GE/June7,2004AKTAPrimeplus整合了层析所用的各种部件，设计紧凑、功能齐全，是性价比很高的一款层析设备•流速范围0.1–50ml/min•操作压力最高到2.0MPa(20bar,190psi)2/GE/June7,2004AKTAPrimeplus主机组分收集器控制面板系统泵3/GE/June7,2004AKTAPrimeplus流程图A或者B缓冲液通过三通阀依次到达泵、压力感受器、上样阀、层析柱、紫外、电导、pH最后到达组分收集器，我们依次看一下这些组件在设备上的位置4/GE/June7,2004AKTAPrimeplus主机－－A液选择阀A缓冲液有8个缓冲液入口即A1～A8，可以方便的选择不同的缓冲液或者样品5/GE/June7,2004AKTAPrimeplus主机－－梯度配比阀三通梯度配比阀，默认与A缓冲液相通，与B缓冲液不通，当需要梯度洗脱时，三通阀在A、B之间切换，通过控制切换时间形成缓冲液比例梯度6/GE/June7,2004AKTAPrimeplus主机－－泵头泵采用的是三泵头活塞泵，通过偏心轮驱动，活塞在活塞腔内往复运动将液体泵出，在这个过程中可能会有极少量的液体渗漏到活塞腔后面，所以在AKTAprimeplus泵头上设计有用来排出渗漏液的小孔，不至于液体腐蚀泵头，小孔内有少量的液体流出是正常的，但是如果有较多的液体流出说明密封出了问题需要维修。小孔7/GE/June7,2004AKTAPrimeplus主机－－压力感受器压力感受器用来测定系统压力，如果压力超出设定值，系统会报警并且处于暂停状态，用来保护层析柱的安全。AKTAprimeplus的最高耐压为2MP8/GE/June7,2004AKTAPrimeplus主机－－梯度混合器梯度混合器的作用是当走线性梯度或者阶段时将缓冲液充分混匀，为了达到较好的混合效果，使用不同流速时需要更换合适的混合池，混合池体积适合的流速范围见下表9/GE/June7,2004AKTAPrimeplus主机－－上样阀默认状态——Load，从混合池来的液体管道直接接在上样阀的7口，7进1出，直接进入柱子。而在2口和6口之间可以连接样品环（sampleloop，固定体积)，在3口连接可以接注射器的接头（luerfemale/1/16’’maleunion——大体积样品；Injectionneedle——小体积样品）。此时，把装有样品（0.2um过滤澄清)的注射器连接在3口，推注射器。样品经过3-2-充满样品环，大于样品环体积的样品从6-4进入废液，将样品装载到样品环中，注意在执行inject命令之前不要拔出注射器，否则样品会自动流到废液中。上样——Inject，柱子平衡好（观察电导COND，pH的数值和变化趋势)，紫外归零（Autozero）后将Injectvalve切换到Inject，则液体从7-6-loop-2-1，就把样品环中的样品上到柱子上。Waste：当需要冲洗进口管道和泵头时可以将上样阀切换到waste状态此时7进5出到废液缸，可以使用大流速快速冲洗管道和泵头。使用自带的Pumpwash命令时，Injectvalve自动切换到7进5出，进废液。10/GE/June7,2004AKTAPrimeplus主机－－柱位我们会把层析柱接在上样阀1号口和监测器之间11/GE/June7,2004AKTAPrimeplus主机－－紫外监测组件连接柱子的方盒装物为紫外流动池，标配的紫外流动池的光径为2mm，如果需要提高检测的灵敏度可以换成5mm的流动池，最靠近设备的地方是汞灯光源，通过滤光片得到单色波长的光，标配的率光片有280nm的254nm可以方便的更换，更换后注意灯的位置，使用280nm对应的灯的位置为实心点，使用254nm对应的灯的位置为虚心点，从紫外流动池到电导流动池然后到pH流动池（选配），电导流动池和pH流动池可以在线检测电导和pH。12/GE/June7,2004AKTAPrimeplus主机－－收集切换阀收集切换阀也是一个三通阀，默认的液体流向是废液管道，当需要收集时切换到组分收集器管道13/GE/June7,2004AKTAPrimeplus主机－－收集器自带的组分收集器，标配有95和175管的收集盘，滴口配有红外感应器放置液滴滴在两管之间，所以滴口管道长度有一定要求，收集壁高度可以调整，调整收集盘位置时一定注意将传动橡皮齿轮用手搬开14/GE/June7,2004AKTAPrimeplus主机－－柱夹槽配有五个柱夹槽口放置柱夹用来夹持较大的层析柱15/GE/June7,2004峰收集FixedVol.fractionation16/GE/June7,2004峰收集FixedVol.+peakfractionation17/GE/June7,2004AKTAprimeplus的所有操作都是通过面板按钮来实现的按OK进入子菜单；按ESC退到上级菜单；按上下箭头，翻页或者调整参数大小。18/GE/June7,2004面板操作按钮在收集过程中按该按钮分布收集器立即前进一管停止程序或方法运行梯度运行过程中，按此键，系统将保持当前浓度运行，而流速和分步收集继续，再按一下，继续梯度运行按此键，系统暂停运行，包括泵和收集，再按一下，继续19/GE/June7,2004AKTAprimeplus使用操作打开AKTAprimeplus主电源（如果配有primeview需要先打开电脑电源），自检后显示templates主菜单，与templates平行的共有7个主菜单，可以使用上下键选择，通常首先翻到最后一个check菜单，按OK查看与计算机连接是否正常。20/GE/June7,2004运行预编好的方法模板运行保存的方法手动运行编辑方法将方法拷入电脑或拷回检查系统状态设定系统参数这7个主菜单的作用依次为21/GE/June7,2004用上下键找到manualrun，按OK进入manualrun设置，在这里我们通常只需设置两个参数即setflowrate和setpressurelimit,其他的可以在运行后更改。先介绍最常用的ManualRun22/GE/June7,2004单位ml、min浓度%B收集单位ml、min、drop收集数量（每管）限压（保护层析柱）MPa缓冲阀位1-8样品阀位waste、load、inject开始梯度（长度ml/目标浓度%B）流速ml/minManualrun参数设置中的含义如下显示startrun按OK开始运行，提示检查收集器，按OK继续，系统处于pause状态，按pause/cont按钮继续。23/GE/June7,2004管道排气按OK后Prime按照设定的流速运行，如果进口管道内的气泡太多，泵仍然泵不出液体，此时需要拧下泵头左上部的堵头换上上样阀的3号口的接头用注射器抽去管道内的气泡，然后再拧上堵头24/GE/June7,2004液晶面板显示的各种信息可以用上下键查看，需要更改参数时在相应显示处按OK后用上下键增加或减少数值或者更改选项，按OK执行在运行中按pause/cont键暂停或者继续，按end键结束实验。25/GE/June7,2004创建一个全自动程序选择一个没有占用的方法号设置方法的基准：ml或者min设置报警压编辑断点，第一个断点永远是0，断点内的参数类似手动设置中的参数。增加断点，输入该断点内的所有参数Esc回到上一级菜单end并save程序如果要运行该程序回到主菜单选择runstoredmethod，按序列号找到要运行的程序，按OK运行。26/GE/June7,2004模板template最常用的applicationtemplate中的最后一个systemwashmethod，选择要清洗的管道，该模板使用与开始实验前或做完实验后对管道和泵头快速自动冲洗。27/GE/June7,2004在参数设置setparameters中最常用的是setupandcalibration子菜单pH校正：setuppH－－calibrationpH泵流速校正：startpumpcalibr.以及设置延迟体积：setdelayUVtoFrac.28/GE/June7,2004AKTAPrimeplus数据采集和分析——PrimeView，安装了该软件的在电脑桌面上会显示有以下两个图标数据采集数据处理29/GE/June7,2004双击PrimeView数据采集图标打开数据采集软件30/GE/June7,2004运行曲线图谱（Curve）：记录系统采集到的全部数据，系统开始运行后，自动开始记录，结束后，自动保存（manualrun接结果最多只能保存10个，超过10的会把最早的覆盖）。运行日志（Logbook）：记录系统收到的所有指令31/GE/June7,2004属性选项卡的作用选择浏览曲线及设定曲线颜色设定X，Y轴的坐标范围32/GE/June7,2004双击PrimeView数据处理图标打开数据处理软件，按打开文件夹打开文件33/GE/June7,2004在浏览属性中选择需要显示的曲线34/GE/June7,2004设置合适的X、Y轴范围浏览曲线X、Y轴积分表35/GE/June7,2004点击图谱积分工具进行图谱积分36/GE/June7,2004积分结果——图谱及积分表，在属性工具中的peaktable选项卡中选择需要显示的项目37/GE/June7,2004可以将当前图谱打印出来38/GE/June7,2004也可以以报告的格式输出结果预览报告内容39/GE/June7,2004输出报告内容可按自己的要求编辑报告格式40/GE/June7,2004日常维护和troubleshooting-所有缓冲液和样品需要过0.45um滤膜-在连接层析柱之前确保管道内没有气泡-使用20％乙醇保存系统，避免缓冲液和盐类长时间留存-经常用湿抹布擦拭仪器表面-检测信号不稳定时使用反压阀-紫外流动池可以用1N的氢氧化钠清洗-pH流动池可以用0.1N的氢氧化钠和0.1N盐酸交替清洗