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guava®easyCyte微毛细管细胞分析平台Guava细胞分析平台作为生命科学和治疗领域的提供者和合作者，默克密理博公司致力于细胞生物学与免疫学研究领域解决方案的研究与开发。Guava系列细胞分析仪是为细胞生物学与免疫学实验研究专门设计的。Guava仪器紧凑集约型的设计，易于掌握的操作功能，强大分析能力，实现了集仪器、软件和试剂于一体的完整细胞分析研究平台。2GuavaeasyCyte系列微毛细管细胞分析平台采用目前先进的荧光检测系统和优质的光学组件以期最大可能的提高检测灵敏度。程序化软件模块避免操作错误，将给出精确的和可重复的数据。专业设计，大大简化了复杂的操作流程，轻松完成开机、样品检测和关机维护。easyCyte8HT双激光六色八参数高通量easyCyte8双激光六色八参数高通量easyCyte5HT单激光三色五参数高通量easyCyte5单激光三色五参数高通量easyCyte6HT单激光四色六参数高通量easyCyte6单激光四色六参数高通量easyCyte6HT-2L双激光四色六参数高通量easyCyte6-2L双激光四色六参数高通量3独创的微毛细管上样每一台Guava系统均采用了全世界独有微毛细管液流(上样)设计，摒弃了传统的鞘液流方式，系统不需要使用鞘液即可形成稳定的单细胞流。由于Guava采用微毛细管设计，使最小上样量可达到1000个细胞/Test。微毛细管上样设计使得上样细胞无损失，同时高精确的注射泵上样，体积精确可控。微毛细管核心技术带来的优点：•固定化细胞流路，液流自动校准，操作简捷；•样品需求少(最小上样量1000个细胞/Test)，节省试剂和样本；•无需使用鞘液，最大程度减少废液的产生(每运行8小时的废液产生量不超过50ml)，减小了仪器的体积；•精度注射泵与PEEK管路系统双保险，较少Clog的烦恼；•上样细胞无损失，上样体积精确可测，实现绝对细胞计数；•直接从样品管中吸取细胞样本。与传统基于鞘液流体动力学的细胞上样模式，无鞘液的微毛细管上样系统。样品上样时，由微毛细管与样品液体接触的横截面中心形成的负压区，形成单细胞流上行。注射泵提供稳定精确的上样流与上样体积。由微毛细管和注射泵协同作用形成的单细胞流更加精确与稳定。每运行8小时的废液产生量不超过50ml。上样体系小，每个test最小上样量仅为1000个细胞，这使您可以减少样本的需求量、节约样本处理时间与抗体试剂的消耗，从而提高您的研究效率以及节省您的实验室运营成本。SheathFluid:~10mL/testWaste:8,000mLper8hourrunTypical#CellsPerProtocol:100,000-1,000,000cells/testTraditionalWasteSampleSheathFluidLaserLaserSheathFlowInjectionTipWasteSampleFlowSheathFluid:NoneWaste:50mLper8hourrunTypical#CellsPerProtocol:≥1,000cells/testMicrocapillarySampleLaserWasteLaserWasteFlowCellSampleSampleFlow45Guava细胞分析检测系统专利的微毛细管技术和激光系统保证了仪器能够检测包括哺乳动物细胞、微生物、藻类、细菌以及微珠在内的多种样本。在检测过程中，荧光标记的细胞首先被吸入微毛细管上样针内，通过流动室时，蓝色激光或红色激光并线激发细胞上的荧光素，其产生的散射光信号被光电倍增管等电子器件捕捉。经过数字处理后，通过GuavaSoft软件模块，将数字信号呈现在计算机上，以进行数据分析和处理。液流系统Guava的液流系统由微毛细管、注射泵、废液瓶、管路组成。由微毛细管与样品液体接触的横截面中心形成的负压区，使单细胞流更加精确与稳定。注射泵提供稳定精确的上样流与上样体积，保证了Guava可以在不需要使用任何参考微珠的情况下进行绝对细胞计数。由于系统不需要使用鞘液，每运行8小时所产生的废液仅有50ml，极大地减少了废液处理带来的工作量。系统内部管路材料均使用PEEK材料，PEEK对蛋白与颗粒均不吸附，管路清洗异常简单方便。光路设计全固态激光器Guava系列微毛细管细胞分析系统均采用全固态激光器。全固态激光器(DPL)具有体积小、重量轻、效率高、性能稳定、可靠性好、寿命长、光束质量高等优点。半导体激光泵浦的全固态激光器是20世纪80年代末期出现的新型激光器。全固态激光器由于其单位输出的热负荷降低，可获取更高的功率，更长的系统寿命和可靠性。使用寿命超过25000小时。6sampleflowcellwasteLaser独特的双激光共线性设计Guava双激光系统(easyCyte6-2L/6HT-2L、easyCyte8/8HT)采用了独特的双激光同步共线性设计，两个波长的激光即不相互干扰也不需要进行激光间时间延迟的校正。消除了以往多激光光路设计中普遍存在的信号延迟误差问题。7RainbowBeadDataRainbowBeads校正——流式细胞分析仪检测的金标准RainbowCalibrationParticlesfromSpherotech-8Peakdetection.SPHEROTM多色荧光校验微珠是检验流式细胞性能的金标准。通过该校验能够测试仪器的灵敏度和线性信号。从图中独立的荧光波峰显示了仪器的高灵敏度，不存在信号间的交叉；FITC，PE，PECy5.5清晰的八峰证明了仪器信号良好的线性度。CD4stainingofWholeBloodacrossall6FluorescentChannels不同的荧光通道，相同的实验结果——完美配合您的实验设计6种荧光染料检测全血种的T细胞实验过程：取成人全血，每10ul为一份，分别与CD4-FITC,CD4-PE,CD4-PECy5.5,CD4-PECy7,CD4-APC,CD4-APCCy7混合，室温孵育15分钟。每份样品中加入180ul，含0.2%PFA固定液的细胞裂解液。在easyCyte8HT中上样检测CD4%和CD4T细胞记数。如图表所示，可在所有的6个荧光通道中都可以分到清晰的CD4群体，得到细胞绝对记数，和CD4百分比结果。精密设计的数字化光电转换系统Guava精密的数字化光化电转换系统数据获取速度更快，拥有数字化的光电转换系统，荧光间的补偿调节更加简单，激光内的荧光补偿可自由进行，可实现实时在线补偿与离线补偿。进样系统——高通量自动进样•上样系统预设了1块96孔板与10个单样品管(1.5ml或0.5mltube)的位置，使得高通量上样与中低通量上样可同时完成，避免了从中低通量到高通量上样时需要手动切换所带来的麻烦。•特有的桨式mixer为每个样品提供上样前的再重悬，避免样品在等待过程中产生下沉。保证所有样品都是在均匀悬浮状态时上样，从而减小孔间误差。•自动上样程序整合了样品间清洗程序，同时对上样针与mixer进行清洗和空干，极大程度地避免了样品间交叉污染(carryover0.05%)。进样系统——单管上样系统•上样系统预设了2个单样品管(1.5ml或0.5mltube)的上样位置，手动可以进行快速上样与样品读取。8InputSignalAmplifierFastADCDSP**digitalsignalprocessorheightwidthareaComputerWashtubesPlateholderTubespositions9GuavaSoft数据采集和分析系统GuavaSoft是一套专为细胞生物学研究量身定制的软件。包括了无需补偿设置的模块化软件GuavaSuite，拥有强大图形显示和数据分析能力的InCyte，以及广受好评的ExpressPro操作软件。集数据获取、数据分析和仪器维护程序于一体。通过GuavaSoft友好的视窗操作界面，使数据获取和实验分析的操作更为灵活。通过对多种复杂、交叉的数据进行更深入、更立体的分析，协助您完整地了解细胞生物学事件。10GuavaSuiteAssay-specificSoftwareModules——优化过的自动分析模块GuavaSuite由一系列特异性模块组成，为凋亡研究、细胞活力分析和细胞周期等应用分别专门设计的实验方案、补偿参数及分析模板。由于每个模块只针对一种特异性应用，其独特的补偿优化设计，使您无需进行复杂的补偿调节*；预设的实验方案，自动设置标准化结果呈现形式；分析模块内嵌，自动计算数据结果。所有这些只为加快您的实验过程，得到更精确的数据。*需配合Guava的试剂一起使用。GuavaSuite特点：•针对性强，一个模块专为一类研究而设•预设实验方案，补偿内置，一键式操作完成数据获取•自动呈现标准化数据窗口，无需手动设置数据的横纵坐标•分析模板内嵌，针对不同研究分别优化的分析功能，使结果更准确•批处理功能，96个数据分析一键完成•自动保存为Excel格式，可以FCS2.0格式输出GuavaSuite功能化模块包括：•细胞绝对计数和活力分析(ViaCount)•早期凋亡AnnexinV•线粒体膜电位•活化的Multi-Caspase检测•晚期凋亡Tunel•细胞周期CellCycle•细胞毒实验•细胞示踪•细胞增殖•抗体定量检测11GuavaInCyte软件：流式细胞分析的新高度——多维分析，解析高通量数据信息InCyte是第一款集合了多种统计方法于流式分析的软件。它为您提供特异性的图示分析功能，整合6×96个生物信息，在HeatMap上直观地显示数据间的关联性，协助您快速判断分析结果。引入拖曳式Gating模式，自动嵌入内在逻辑关联；自动批处理功能，96个数据分析一次完成。InCyte所提供的数据获取和分析功能，已远远超出了对一个样品进行统计的层面，已然成为一款理想的，从生物信息学角度解析多参数、多样本间关联性研究的平台，适用于siRNA筛选，药物研发中化合物的筛选以及其他高通量的细胞生物学检测。HeatMap(热图)：Heat:由浅至深的蓝色代表了信号的强/弱。颜色愈深，则信号愈强。Map:显示样品在96孔板中的位置，直观显示样品名。同时，根据所检测的指标(1-6个)，将样品孔相应地分割成1-6等分的饼图。通过HeatMap的诠释，可比较96孔板上不同样品的检测结果，而且可以整合1至6张96孔板上的信息，即比较6×96个样品的数据，显示多参数信号的强/弱，展现各参数间的关联。直观的图示能够有效地协助您做出快速、准确的判断。以药物研发中化合物的筛选为例：ScreencompoundsforApoptosisinductioninJurkatCells.WanttofindcompoundthatinducesapoptosisviamultiplemarkersinJurkatcells.ApoptosisMarkersTested:Caspase8,Caspase9,MitochondrialdepolarizationandAnnexinVSetUp:Four96wellplates:Plate1-JurkatCells+compounds–Caspase8ReagentsPlate2-JurkatCells+compounds–Caspase9ReagentsPlate3-JurkatCells+compounds–MitoPotentialReagentsPlate4-JurkatCells+compounds–NexinReagentsTheHeat-MapdisplayscomparativefindingsinJurkatcellsforall4apoptoticmarkers(Legendinset).CertaincompoundsdemonstratedCaspase-8(F9,H11)orCaspase-9-(B11,C4)specificmodesofinductionwhileothersinvok