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Primer5设计引物打开软件复制基因序列粘贴选项ASis-OK点击primer按钮,弹出菜单后点击search按钮选择PCRprimer,Pairs参数,并选择所需PCR产物长度,OK会弹出搜索结果菜单,点击OK在搜索出的结果列表里选择TM合适、GC含量高、无各种BUG的引物,点击editprimer,将所得引物复制而后点击S/A按钮,并继续点击editprimer,复制反向引物,引物设计达成。