FACSCanto-II流程

FACSCantoII开机1．打开电脑，进入Windows系统2．打开主机，激光电源3．登陆FACSDiva软件，等待联机成功4．观察各溶液桶液流情况，作必要添加处理5．Cytometer菜单-FluidicsStartup启动液流实验1．选择合适的Configuration（Cytometer-ViewConfigurations）2．新建实验（需要模板时，选Experiment菜单下的New****）3．建立Specimen，tube4．在Experiment菜单下ExperimentLayout下输入各管标记，设定存储数据量等5．在GlobalSheet上画图6．上样I）阴性管调电压，调节FSC/SSC电压，调节阈值，找到细胞群体，设门，调节各荧光的电压至阴性位置，设定界限II）单阳性管调节补偿，注意散射光的变化III）上样本，调节各门的位置，右键点击图形，选择ShowPopulationHierarchy显示population上下级关系，可以更改显示名称、颜色，作交、并、补集；选择CreateStatisticsView显示统计信息，右键点击统计选择EditStatesticsView更改统计内容设置7．导出结果，注意Sheet和GlobalSheet差别8．实验条件可以复制粘贴，可以将导出使用各种模板9．注意更换样本管时一定要将支撑臂推到底关机1．使用稀释过的次氯酸钠溶液（有效氯约0.5-1%）1-2ml，放置在上样位置，高速上样运行5分钟；2．使用3ml去离子水，放置在上样位置，高速上样10分钟；3．Cytometer菜单-FluidicsShutdown关闭液流4．放上约1ml去离子水在上样位置5．关闭Diva软件6．关闭仪器电源7．电脑关机特别维护1．每月可进行一次长清洗：Cytometry菜单-CleaningModes-LongClean2．每三个月可进行一次流动室清洗：使用流动室清洗液，Cytometry菜单-CleaningModes-CleanFlowCell3．上样针堵塞：Cytometry菜单-CleaningModes-SITFlush，使用稀释的次氯酸钠溶液高速上样半小时，用去离子水冲洗4．排除气泡：Cytometry菜单-CleaningModes-DegasFlowCell或是PurgeBubbleFilterandDegasFlowCell5．更换液体后：Cytometry菜单-CleaningModes-Primeaftertankrefill